[日本語] English
万見
- PDB-6ni2: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-bet... -

+
データを開く


IDまたはキーワード:

読み込み中...

-
基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6ni2
タイトルStabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
要素
  • Beta-arrestin-1
  • Fab30 Heavy Chain
  • Fab30 Light Chain
  • Nanobody 32
  • Vasopressin V2 receptor
キーワードSIGNALING PROTEIN/IMMUNE SYSTEM / arrestin / GPCR signaling transducer / scaffolding protein / SIGNALING PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex
機能・相同性
機能・相同性情報


renal water retention / Defective AVP does not bind AVPR2 and causes neurohypophyseal diabetes insipidus (NDI) / MAP2K and MAPK activation / Vasopressin-like receptors / regulation of systemic arterial blood pressure by vasopressin / vasopressin receptor activity / Activation of SMO / Golgi Associated Vesicle Biogenesis / Lysosome Vesicle Biogenesis / AP-2 adaptor complex binding ...renal water retention / Defective AVP does not bind AVPR2 and causes neurohypophyseal diabetes insipidus (NDI) / MAP2K and MAPK activation / Vasopressin-like receptors / regulation of systemic arterial blood pressure by vasopressin / vasopressin receptor activity / Activation of SMO / Golgi Associated Vesicle Biogenesis / Lysosome Vesicle Biogenesis / AP-2 adaptor complex binding / clathrin heavy chain binding / Ub-specific processing proteases / clathrin coat of coated pit / hemostasis / desensitization of G protein-coupled receptor signaling pathway / telencephalon development / Cargo recognition for clathrin-mediated endocytosis / positive regulation of systemic arterial blood pressure / inositol hexakisphosphate binding / Clathrin-mediated endocytosis / clathrin-dependent endocytosis / G protein-coupled receptor internalization / acetylcholine receptor binding / Thrombin signalling through proteinase activated receptors (PARs) / G alpha (s) signalling events / positive regulation of intracellular signal transduction / clathrin binding / negative regulation of Notch signaling pathway / pseudopodium / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate binding / positive regulation of receptor internalization / endocytic vesicle / small molecule binding / positive regulation of vasoconstriction / cellular response to hormone stimulus / activation of adenylate cyclase activity / visual perception / response to cytokine / G protein-coupled receptor binding / peptide binding / clathrin-coated endocytic vesicle membrane / adenylate cyclase-modulating G protein-coupled receptor signaling pathway / receptor internalization / Vasopressin regulates renal water homeostasis via Aquaporins / protein transport / Cargo recognition for clathrin-mediated endocytosis / Clathrin-mediated endocytosis / cytoplasmic vesicle / ubiquitin-dependent protein catabolic process / G alpha (s) signalling events / molecular adaptor activity / positive regulation of ERK1 and ERK2 cascade / endosome / positive regulation of protein phosphorylation / G protein-coupled receptor signaling pathway / negative regulation of cell population proliferation / positive regulation of cell population proliferation / positive regulation of gene expression / perinuclear region of cytoplasm / Golgi apparatus / endoplasmic reticulum / signal transduction / membrane / nucleus / plasma membrane / cytoplasm / cytosol
類似検索 - 分子機能
Vasopressin V2 receptor / Vasopressin receptor / Arrestin, conserved site / Arrestins signature. / Arrestin / Arrestin, N-terminal / Arrestin-like, N-terminal / Arrestin C-terminal-like domain / Arrestin (or S-antigen), N-terminal domain / Arrestin (or S-antigen), C-terminal domain ...Vasopressin V2 receptor / Vasopressin receptor / Arrestin, conserved site / Arrestins signature. / Arrestin / Arrestin, N-terminal / Arrestin-like, N-terminal / Arrestin C-terminal-like domain / Arrestin (or S-antigen), N-terminal domain / Arrestin (or S-antigen), C-terminal domain / Arrestin (or S-antigen), C-terminal domain / Arrestin-like, C-terminal / G-protein coupled receptors family 1 signature. / G protein-coupled receptor, rhodopsin-like / GPCR, rhodopsin-like, 7TM / G-protein coupled receptors family 1 profile. / 7 transmembrane receptor (rhodopsin family) / Immunoglobulin E-set
類似検索 - ドメイン・相同性
Beta-arrestin-1 / Vasopressin V2 receptor
類似検索 - 構成要素
生物種Lama glama (ラマ)
Bos taurus (ウシ)
Homo sapiens (ヒト)
synthetic construct (人工物)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4 Å
データ登録者Nguyen, A.H. / Thomsen, A.R.B. / Cahill, T.J. / des Georges, A. / Lefkowitz, R.J.
資金援助 米国, 2件
組織認可番号国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
National Institutes of Health/National Heart, Lung, and Blood Institute (NIH/NHLBI)2R01-HL016037-47 米国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2019
タイトル: Structure of an endosomal signaling GPCR-G protein-β-arrestin megacomplex.
著者: Anthony H Nguyen / Alex R B Thomsen / Thomas J Cahill / Rick Huang / Li-Yin Huang / Tara Marcink / Oliver B Clarke / Søren Heissel / Ali Masoudi / Danya Ben-Hail / Fadi Samaan / Venkata P ...著者: Anthony H Nguyen / Alex R B Thomsen / Thomas J Cahill / Rick Huang / Li-Yin Huang / Tara Marcink / Oliver B Clarke / Søren Heissel / Ali Masoudi / Danya Ben-Hail / Fadi Samaan / Venkata P Dandey / Yong Zi Tan / Chuan Hong / Jacob P Mahoney / Sarah Triest / John Little / Xin Chen / Roger Sunahara / Jan Steyaert / Henrik Molina / Zhiheng Yu / Amedee des Georges / Robert J Lefkowitz /
要旨: Classically, G-protein-coupled receptors (GPCRs) are thought to activate G protein from the plasma membrane and are subsequently desensitized by β-arrestin (β-arr). However, some GPCRs continue to ...Classically, G-protein-coupled receptors (GPCRs) are thought to activate G protein from the plasma membrane and are subsequently desensitized by β-arrestin (β-arr). However, some GPCRs continue to signal through G protein from internalized compartments, mediated by a GPCR-G protein-β-arr 'megaplex'. Nevertheless, the molecular architecture of the megaplex remains unknown. Here, we present its cryo-electron microscopy structure, which shows simultaneous engagement of human G protein and bovine β-arr to the core and phosphorylated tail, respectively, of a single active human chimeric β-adrenergic receptor with the C-terminal tail of the arginine vasopressin type 2 receptor (βVR). All three components adopt their canonical active conformations, suggesting that a single megaplex GPCR is capable of simultaneously activating G protein and β-arr. Our findings provide a structural basis for GPCR-mediated sustained internalized G protein signaling.
履歴
登録2018年12月26日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02019年11月20日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12019年12月4日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation_author.name
改定 1.22019年12月18日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation_author.identifier_ORCID

-
構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-9375
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

-
集合体

登録構造単位
A: Nanobody 32
B: Beta-arrestin-1
H: Fab30 Heavy Chain
L: Fab30 Light Chain
V: Vasopressin V2 receptor


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)110,0385
ポリマ－110,0385
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: immunoprecipitation, gel filtration, microscopy, fluorescence resonance energy transfer
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area6340 Å2
ΔGint-49 kcal/mol
Surface area33950 Å2

-
要素

#1: 抗体 Nanobody 32


分子量: 13665.136 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Lama glama (ラマ) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
#2: タンパク質 Beta-arrestin-1 / Arrestin beta-1 / Arrestin-2


分子量: 44309.578 Da / 分子数: 1 / Fragment: UNP residues 6-361 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bos taurus (ウシ) / 遺伝子: ARRB1
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
参照: UniProt: P17870
#3: 抗体 Fab30 Heavy Chain


分子量: 25512.354 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)
#4: 抗体 Fab30 Light Chain


分子量: 23435.064 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)
#5: タンパク質・ペプチド Vasopressin V2 receptor / V2R / AVPR V2 / Antidiuretic hormone receptor / Renal-type arginine vasopressin receptor


分子量: 3115.718 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: AVPR2, ADHR, DIR, DIR3, V2R
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
参照: UniProt: P30518
研究の焦点であるリガンドがあるかY

-
実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

-
試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complexCOMPLEXall0MULTIPLE SOURCES
2Nanobody 32COMPLEX#11RECOMBINANT
3Beta-arrestin-1COMPLEX#21RECOMBINANT
4Fab30COMPLEX#3-#41NATURAL
5Vasopressin 2 TailCOMPLEX#51RECOMBINANT
分子量単位: MEGADALTONS / 実験値: NO
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
12Lama glama (ラマ)9844
23Bos taurus (ウシ)9913
34synthetic construct (人工物)32630
45Homo sapiens (ヒト)9606
由来(組換発現)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
12Escherichia coli (大腸菌)562
23Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)7108
45Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)7108
緩衝液pH: 7.4
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持詳細: unidentified
急速凍結凍結剤: ETHANE

-
電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD
撮影電子線照射量: 104 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)

-
解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.13_2998: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
10cryoSPARC初期オイラー角割当
11cryoSPARC最終オイラー角割当
12cryoSPARC分類
13cryoSPARC３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 230021 / 対称性のタイプ: POINT

+
万見について

-
お知らせ

-
2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

-
2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

+
2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

+
2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

+
2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

-
万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る