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万見
- EMDB-9375: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-bet... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-9375
タイトルStabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
マップデータStabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
試料
  • 複合体: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
    • 複合体: Nanobody 32
      • タンパク質・ペプチド: Nanobody 32
    • 複合体: Beta-arrestin-1
      • タンパク質・ペプチド: Beta-arrestin-1
    • 複合体: Fab30
      • タンパク質・ペプチド: Fab30 Heavy Chain
      • タンパク質・ペプチド: Fab30 Light Chain
    • 複合体: Vasopressin 2 Tail
      • タンパク質・ペプチド: Vasopressin V2 receptor
機能・相同性
機能・相同性情報


renal water retention / Defective AVP does not bind AVPR2 and causes neurohypophyseal diabetes insipidus (NDI) / MAP2K and MAPK activation / Vasopressin-like receptors / regulation of systemic arterial blood pressure by vasopressin / vasopressin receptor activity / Activation of SMO / Golgi Associated Vesicle Biogenesis / Lysosome Vesicle Biogenesis / AP-2 adaptor complex binding ...renal water retention / Defective AVP does not bind AVPR2 and causes neurohypophyseal diabetes insipidus (NDI) / MAP2K and MAPK activation / Vasopressin-like receptors / regulation of systemic arterial blood pressure by vasopressin / vasopressin receptor activity / Activation of SMO / Golgi Associated Vesicle Biogenesis / Lysosome Vesicle Biogenesis / AP-2 adaptor complex binding / clathrin heavy chain binding / Ub-specific processing proteases / clathrin coat of coated pit / hemostasis / desensitization of G protein-coupled receptor signaling pathway / positive regulation of systemic arterial blood pressure / telencephalon development / Cargo recognition for clathrin-mediated endocytosis / inositol hexakisphosphate binding / Clathrin-mediated endocytosis / clathrin-dependent endocytosis / G protein-coupled receptor internalization / acetylcholine receptor binding / Thrombin signalling through proteinase activated receptors (PARs) / G alpha (s) signalling events / positive regulation of intracellular signal transduction / clathrin binding / negative regulation of Notch signaling pathway / small molecule binding / pseudopodium / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate binding / positive regulation of receptor internalization / endocytic vesicle / activation of adenylate cyclase activity / positive regulation of vasoconstriction / cellular response to hormone stimulus / visual perception / response to cytokine / G protein-coupled receptor binding / peptide binding / clathrin-coated endocytic vesicle membrane / adenylate cyclase-modulating G protein-coupled receptor signaling pathway / receptor internalization / Vasopressin regulates renal water homeostasis via Aquaporins / protein transport / Cargo recognition for clathrin-mediated endocytosis / Clathrin-mediated endocytosis / cytoplasmic vesicle / ubiquitin-dependent protein catabolic process / G alpha (s) signalling events / molecular adaptor activity / positive regulation of ERK1 and ERK2 cascade / endosome / positive regulation of protein phosphorylation / G protein-coupled receptor signaling pathway / negative regulation of cell population proliferation / positive regulation of cell population proliferation / positive regulation of gene expression / perinuclear region of cytoplasm / Golgi apparatus / signal transduction / endoplasmic reticulum / membrane / nucleus / plasma membrane / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Vasopressin V2 receptor / Vasopressin receptor / Arrestin, conserved site / Arrestins signature. / Arrestin / Arrestin, N-terminal / Arrestin-like, N-terminal / Arrestin C-terminal-like domain / Arrestin (or S-antigen), N-terminal domain / Arrestin (or S-antigen), C-terminal domain ...Vasopressin V2 receptor / Vasopressin receptor / Arrestin, conserved site / Arrestins signature. / Arrestin / Arrestin, N-terminal / Arrestin-like, N-terminal / Arrestin C-terminal-like domain / Arrestin (or S-antigen), N-terminal domain / Arrestin (or S-antigen), C-terminal domain / Arrestin (or S-antigen), C-terminal domain / Arrestin-like, C-terminal / G-protein coupled receptors family 1 signature. / G protein-coupled receptor, rhodopsin-like / GPCR, rhodopsin-like, 7TM / G-protein coupled receptors family 1 profile. / 7 transmembrane receptor (rhodopsin family) / Immunoglobulin E-set
類似検索 - ドメイン・相同性
Beta-arrestin-1 / Vasopressin V2 receptor
類似検索 - 構成要素
生物種Lama glama (ラマ) / Bos taurus (ウシ) / synthetic construct (人工物) / Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.0 Å
データ登録者Nguyen AH / Thomsen ARB / Cahill TJ / des Georges A / Lefkowitz RJ
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
National Institutes of Health/National Heart, Lung, and Blood Institute (NIH/NHLBI)2R01-HL016037-47 米国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2019
タイトル: Structure of an endosomal signaling GPCR-G protein-β-arrestin megacomplex.
著者: Anthony H Nguyen / Alex R B Thomsen / Thomas J Cahill / Rick Huang / Li-Yin Huang / Tara Marcink / Oliver B Clarke / Søren Heissel / Ali Masoudi / Danya Ben-Hail / Fadi Samaan / Venkata P ...著者: Anthony H Nguyen / Alex R B Thomsen / Thomas J Cahill / Rick Huang / Li-Yin Huang / Tara Marcink / Oliver B Clarke / Søren Heissel / Ali Masoudi / Danya Ben-Hail / Fadi Samaan / Venkata P Dandey / Yong Zi Tan / Chuan Hong / Jacob P Mahoney / Sarah Triest / John Little / Xin Chen / Roger Sunahara / Jan Steyaert / Henrik Molina / Zhiheng Yu / Amedee des Georges / Robert J Lefkowitz /
要旨: Classically, G-protein-coupled receptors (GPCRs) are thought to activate G protein from the plasma membrane and are subsequently desensitized by β-arrestin (β-arr). However, some GPCRs continue to ...Classically, G-protein-coupled receptors (GPCRs) are thought to activate G protein from the plasma membrane and are subsequently desensitized by β-arrestin (β-arr). However, some GPCRs continue to signal through G protein from internalized compartments, mediated by a GPCR-G protein-β-arr 'megaplex'. Nevertheless, the molecular architecture of the megaplex remains unknown. Here, we present its cryo-electron microscopy structure, which shows simultaneous engagement of human G protein and bovine β-arr to the core and phosphorylated tail, respectively, of a single active human chimeric β-adrenergic receptor with the C-terminal tail of the arginine vasopressin type 2 receptor (βVR). All three components adopt their canonical active conformations, suggesting that a single megaplex GPCR is capable of simultaneously activating G protein and β-arr. Our findings provide a structural basis for GPCR-mediated sustained internalized G protein signaling.
履歴
登録2018年12月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年9月25日-
マップ公開2019年11月20日-
更新2019年12月18日-
現状2019年12月18日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.22
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.22
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6ni2
  • 表面レベル: 0.22
  • UCSF Chimeraによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_9375.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_9375.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 52.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.04 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.22 / ムービー #1: 0.22
最小 - 最大-0.34983063 - 0.96552765
平均 (標準偏差)0.000315015 (±0.025749706)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ240240240
Spacing240240240
セルA=B=C: 249.59999 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.041.041.04
M x/y/z240240240
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z249.600249.600249.600
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ929262
NX/NY/NZ290290360
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS240240240
D min/max/mean-0.3500.9660.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-bet...

全体名称: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
要素
  • 複合体: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
    • 複合体: Nanobody 32
      • タンパク質・ペプチド: Nanobody 32
    • 複合体: Beta-arrestin-1
      • タンパク質・ペプチド: Beta-arrestin-1
    • 複合体: Fab30
      • タンパク質・ペプチド: Fab30 Heavy Chain
      • タンパク質・ペプチド: Fab30 Light Chain
    • 複合体: Vasopressin 2 Tail
      • タンパク質・ペプチド: Vasopressin V2 receptor

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超分子 #1: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-bet...

超分子名称: Stabilized beta-arrestin 1-V2T subcomplex of a GPCR-G protein-beta-arrestin mega-complex
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all

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超分子 #2: Nanobody 32

超分子名称: Nanobody 32 / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Lama glama (ラマ)
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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超分子 #3: Beta-arrestin-1

超分子名称: Beta-arrestin-1 / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2
由来(天然)生物種: Bos taurus (ウシ)
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)

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超分子 #4: Fab30

超分子名称: Fab30 / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3-#4
由来(天然)生物種: synthetic construct (人工物)

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超分子 #5: Vasopressin 2 Tail

超分子名称: Vasopressin 2 Tail / タイプ: complex / ID: 5 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #5
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)

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分子 #1: Nanobody 32

分子名称: Nanobody 32 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Lama glama (ラマ)
分子量理論値: 13.665136 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
QVQLQESGGG LVQAGGSLRL SCVVSGFFFD TVTMAWYRRA PGKHRELVAS ATAGGTTTYA DSVKDRFTIS RDNAKNTVYL QMNSLKPED TAVYYCNTFV RSLSWGQGTQ VTVSSHHHHH HEPEA

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分子 #2: Beta-arrestin-1

分子名称: Beta-arrestin-1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Bos taurus (ウシ)
分子量理論値: 44.309578 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MGDKGTRVFK KASPNGKLTV YLGKRDFVDH IDLVEPVDGV VLVDPEYLKE RRVYVTLTCA FRYGREDLDV LGLTFRKDLF VANVQSFPP APEDKKPLTR LQERLIKKLG EHAYPFTFEI PPNLPCSVTL QPGPEDTGKA CGVDYEVKAF CAENLEEKIH K RNSVRLVI ...文字列:
MGDKGTRVFK KASPNGKLTV YLGKRDFVDH IDLVEPVDGV VLVDPEYLKE RRVYVTLTCA FRYGREDLDV LGLTFRKDLF VANVQSFPP APEDKKPLTR LQERLIKKLG EHAYPFTFEI PPNLPCSVTL QPGPEDTGKA CGVDYEVKAF CAENLEEKIH K RNSVRLVI RKVQYAPERP GPQPTAETTR QFLMSDKPLH LEASLDKEIY YHGEPISVNV HVTNNTNKTV KKIKISVRQY AD ICLFNTA QYKCPVAMEE ADDTVAPSST FCKVYTLTPF LANNREKRGL ALDGKLKHED TNLASSTLLR EGANREILGI IVS YKVKVK LVVSRGGLLG DLASSDVAVE LPFTLMHPKP KEEPPHREVP EHETPVDTNL IELDTNDDDI VFEDFAR

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分子 #3: Fab30 Heavy Chain

分子名称: Fab30 Heavy Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: synthetic construct (人工物)
分子量理論値: 25.512354 KDa
配列文字列: EISEVQLVES GGGLVQPGGS LRLSCAASGF NVYSSSIHWV RQAPGKGLEW VASISSYYGY TYYADSVKGR FTISADTSKN TAYLQMNSL RAEDTAVYYC ARSRQFWYSG LDYWGQGTLV TVSSASTKGP SVFPLAPSSK STSGGTAALG CLVKDYFPEP V TVSWNSGA ...文字列:
EISEVQLVES GGGLVQPGGS LRLSCAASGF NVYSSSIHWV RQAPGKGLEW VASISSYYGY TYYADSVKGR FTISADTSKN TAYLQMNSL RAEDTAVYYC ARSRQFWYSG LDYWGQGTLV TVSSASTKGP SVFPLAPSSK STSGGTAALG CLVKDYFPEP V TVSWNSGA LTSGVHTFPA VLQSSGLYSL SSVVTVPSSS LGTQTYICNV NHKPSNTKVD KKVEPKSCDK THHHHHHHH

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分子 #4: Fab30 Light Chain

分子名称: Fab30 Light Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: synthetic construct (人工物)
分子量理論値: 23.435064 KDa
配列文字列: SDIQMTQSPS SLSASVGDRV TITCRASQSV SSAVAWYQQK PGKAPKLLIY SASSLYSGVP SRFSGSRSGT DFTLTISSLQ PEDFATYYC QQYKYVPVTF GQGTKVEIKR TVAAPSVFIF PPSDSQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN S QESVTEQD ...文字列:
SDIQMTQSPS SLSASVGDRV TITCRASQSV SSAVAWYQQK PGKAPKLLIY SASSLYSGVP SRFSGSRSGT DFTLTISSLQ PEDFATYYC QQYKYVPVTF GQGTKVEIKR TVAAPSVFIF PPSDSQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN S QESVTEQD SKDSTYSLSS TLTLSKADYE KHKVYACEVT HQGLSSPVTK SFNRGEC

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分子 #5: Vasopressin V2 receptor

分子名称: Vasopressin V2 receptor / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 3.115718 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列:
ARGRTPPSLG PQDE(SEP)C(TPO)(TPO)A(SEP) (SEP)(SEP)LAKD

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
グリッド詳細: unidentified
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 104.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 230021
初期 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlc1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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