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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7782 | |||||||||||||||||||||
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タイトル | Calcarisporiella thermophila Hsp104 | |||||||||||||||||||||
マップデータ | Map was masked with model and equalized to bring out some of the more flexible domains. | |||||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | Spiral hexamer / antagonize toxin / ADP-binding state / CHAPERONE | |||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||||||||||||||
生物種 | Calcarisporiella thermophila (菌類) | |||||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.0 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Zhang K / Pintilie G | |||||||||||||||||||||
資金援助 | 米国, 6件
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引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2019 タイトル: Structure of Calcarisporiella thermophila Hsp104 Disaggregase that Antagonizes Diverse Proteotoxic Misfolding Events. 著者: Karolina Michalska / Kaiming Zhang / Zachary M March / Catherine Hatzos-Skintges / Grigore Pintilie / Lance Bigelow / Laura M Castellano / Leann J Miles / Meredith E Jackrel / Edward Chuang / ...著者: Karolina Michalska / Kaiming Zhang / Zachary M March / Catherine Hatzos-Skintges / Grigore Pintilie / Lance Bigelow / Laura M Castellano / Leann J Miles / Meredith E Jackrel / Edward Chuang / Robert Jedrzejczak / James Shorter / Wah Chiu / Andrzej Joachimiak / 要旨: Hsp104 is an AAA+ protein disaggregase with powerful amyloid-remodeling activity. All nonmetazoan eukaryotes express Hsp104 while eubacteria express an Hsp104 ortholog, ClpB. However, most studies ...Hsp104 is an AAA+ protein disaggregase with powerful amyloid-remodeling activity. All nonmetazoan eukaryotes express Hsp104 while eubacteria express an Hsp104 ortholog, ClpB. However, most studies have focused on Hsp104 from Saccharomyces cerevisiae and ClpB orthologs from two eubacterial species. Thus, the natural spectrum of Hsp104/ClpB molecular architectures and protein-remodeling activities remains largely unexplored. Here, we report two structures of Hsp104 from the thermophilic fungus Calcarisporiella thermophila (CtHsp104), a 2.70Å crystal structure and 4.0Å cryo-electron microscopy structure. Both structures reveal left-handed, helical assemblies with all domains clearly resolved. We thus provide the highest resolution and most complete view of Hsp104 hexamers to date. We also establish that CtHsp104 antagonizes several toxic protein-misfolding events in vivo where S. cerevisiae Hsp104 is ineffective, including rescue of TDP-43, polyglutamine, and α-synuclein toxicity. We suggest that natural Hsp104 variation is an invaluable, untapped resource for illuminating therapeutic disaggregases for fatal neurodegenerative diseases. | |||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7782.map.gz | 8.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7782-v30.xml emd-7782.xml | 16.9 KB 16.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7782.png | 214.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-7782.cif.gz | 6.6 KB | ||
その他 | emd_7782_additional.map.gz | 59.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7782 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7782 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7782_validation.pdf.gz | 420.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7782_full_validation.pdf.gz | 420.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7782_validation.xml.gz | 5.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_7782_validation.cif.gz | 6.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7782 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7782 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7782.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map was masked with model and equalized to bring out some of the more flexible domains. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: Original reconstructed map.
ファイル | emd_7782_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | Original reconstructed map. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Calcarisporiella thermophila Hsp104 with ADP
全体 | 名称: Calcarisporiella thermophila Hsp104 with ADP |
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要素 |
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-超分子 #1: Calcarisporiella thermophila Hsp104 with ADP
超分子 | 名称: Calcarisporiella thermophila Hsp104 with ADP / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Calcarisporiella thermophila (菌類) |
分子量 | 理論値: 600 KDa |
-分子 #1: Calcarisporiella thermophila Hsp104
分子 | 名称: Calcarisporiella thermophila Hsp104 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Calcarisporiella thermophila (菌類) |
分子量 | 理論値: 98.911109 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌) |
配列 | 文字列: AMSSMQFTDK ATETLNAAAK YAAENSHVQL HPSHVAVVML DEENSLFRSI LEKAGGDVVS IERGFKKIMV RQPSQDPPPT EMGHSPELA KLLHYAHEHM KKQRDLYIAQ DHLILALADL PSMAQVLKEG GVTKKSLENA VTHVRGNRRV ESKSAEEAYE A LSKYCIDL ...文字列: AMSSMQFTDK ATETLNAAAK YAAENSHVQL HPSHVAVVML DEENSLFRSI LEKAGGDVVS IERGFKKIMV RQPSQDPPPT EMGHSPELA KLLHYAHEHM KKQRDLYIAQ DHLILALADL PSMAQVLKEG GVTKKSLENA VTHVRGNRRV ESKSAEEAYE A LSKYCIDL TELAASGKLD PVIGRDEIIS RVIRVLSRRT KNNPCLVGEP GVGKTAIAEG LANRIVKGDI PSSLQKKVYS LD IGSLLAG AKYRGEFEER LKAVLKELKE AQAIVFIDEI HTVLGAGKSE GAIDAANLLK PMLARGELRC IGATTLTEYR QYV EKDPAF ERRFQLVMVE EPSVTDTISI LRGLKERYET HHGVRIADAA IVAAAQLAAR YITQRFMPDK AIDLIDEACA NTRV QLDSQ PEAIDKLERR HLQLEVEATA LEKEKDAASK QRLQEVRAEM ARIQEELRPL KMKYESEKGR LDEIRNLSQR LDELK AKAE DAERRYDLAR AADIRYYAIP DLEKRLAQLQ AEKSQADAER ADGLLAEVVG PDQIMEVVSR WTGIPVSNLQ RSEKEK LLH MEEYMKQHVV GQDEAIKAIC DAIRLSRTGL QNRNRPLASF LFLGPTGCGK TLCVKELAAF LFNDPGAIVR IDMSEYM EK HAVSRLVGAP PGYIGHDEGG QLTEAVRRRP YTVVLFDEME KAHKDVSNLL LQILDDGHCT DSKGRRVDFK NTIIVMTS N LGADLFELDE GDKVSQATKN AVLATARRHF ANEFINRIDE LIVFNRLTPS NIRKIVDVRL KEVQERLDEK QITLDVDDK AKDLLAQQGF DPVYGARPLN RLIQHALLTQ LSRLLLDGGV RPGEIAKVTV DQEGEIIVIR NHGIESPAPW ADEDMVEDED MEI |
-分子 #2: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 12 / 式: ADP |
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分子量 | 理論値: 427.201 Da |
Chemical component information | ChemComp-ADP: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 詳細: 20 mM HEPES-KOH, 100 mM KCl, 2 mM MgCl2, 2 mM ADP and 4 mM DTT |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 25 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 3-30 / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 3786 / 平均露光時間: 6.0 sec. / 平均電子線量: 31.8 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.8 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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得られたモデル | PDB-6d00: |