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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7572 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of human enterovirus D68 emptied particle (pH 7.2 and 4 degrees Celsius) | |||||||||
マップデータ | sharpened map in which the inner density is masked out | |||||||||
試料 |
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キーワード | virus / genome release / acid | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase / channel activity ...picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase / channel activity / monoatomic ion transmembrane transport / RNA helicase activity / symbiont-mediated suppression of host innate immune response / induction by virus of host autophagy / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / virus-mediated perturbation of host defense response / DNA-templated transcription / host cell nucleus / virion attachment to host cell / structural molecule activity / ATP hydrolysis activity / proteolysis / RNA binding / ATP binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Enterovirus D68 (エンテロウイルス) / enterovirus D68 (エンテロウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.32 Å | |||||||||
データ登録者 | Liu Y / Rossmann MG | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2018 タイトル: Molecular basis for the acid-initiated uncoating of human enterovirus D68. 著者: Yue Liu / Ju Sheng / Arno L W van Vliet / Geeta Buda / Frank J M van Kuppeveld / Michael G Rossmann / 要旨: Enterovirus D68 (EV-D68) belongs to a group of enteroviruses that contain a single positive-sense RNA genome surrounded by an icosahedral capsid. Like common cold viruses, EV-D68 mainly causes ...Enterovirus D68 (EV-D68) belongs to a group of enteroviruses that contain a single positive-sense RNA genome surrounded by an icosahedral capsid. Like common cold viruses, EV-D68 mainly causes respiratory infections and is acid-labile. The molecular mechanism by which the acid-sensitive EV-D68 virions uncoat and deliver their genome into a host cell is unknown. Using cryoelectron microscopy (cryo-EM), we have determined the structures of the full native virion and an uncoating intermediate [the A (altered) particle] of EV-D68 at 2.2- and 2.7-Å resolution, respectively. These structures showed that acid treatment of EV-D68 leads to particle expansion, externalization of the viral protein VP1 N termini from the capsid interior, and formation of pores around the icosahedral twofold axes through which the viral RNA can exit. Moreover, because of the low stability of EV-D68, cryo-EM analyses of a mixed population of particles at neutral pH and following acid treatment demonstrated the involvement of multiple structural intermediates during virus uncoating. Among these, a previously undescribed state, the expanded 1 ("E1") particle, shows a majority of internal regions (e.g., the VP1 N termini) to be ordered as in the full native virion. Thus, the E1 particle acts as an intermediate in the transition from full native virions to A particles. Together, the present work delineates the pathway of EV-D68 uncoating and provides the molecular basis for the acid lability of EV-D68 and of the related common cold viruses. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7572.map.gz | 85.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7572-v30.xml emd-7572.xml | 22.4 KB 22.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_7572_fsc.xml | 11.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_7572.png | 250.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-7572.cif.gz | 6.4 KB | ||
その他 | emd_7572_half_map_1.map.gz emd_7572_half_map_2.map.gz | 28 MB 28 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7572 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7572 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7572_validation.pdf.gz | 946.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7572_full_validation.pdf.gz | 946.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7572_validation.xml.gz | 17.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_7572_validation.cif.gz | 23.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7572 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7572 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6cruMC 7567C 7569C 7571C 7583C 7589C 7592C 7593C 7598C 7599C 7600C 9053C 9054C 9055C 9056C 9057C 9058C 9059C 9060C 6crpC 6crrC 6crsC 6cs3C 6cs4C 6cs5C 6cs6C 6csaC 6csgC 6cshC 6mziC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7572.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | sharpened map in which the inner density is masked out | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.62 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: unsharpened half map in which the inner density is retained
ファイル | emd_7572_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | unsharpened half map in which the inner density is retained | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: unsharpened half map in which the inner density is retained
ファイル | emd_7572_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | unsharpened half map in which the inner density is retained | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Enterovirus D68
全体 | 名称: Enterovirus D68 (エンテロウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1: Enterovirus D68
超分子 | 名称: Enterovirus D68 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: Viruses were grown in RD cells. / NCBI-ID: 42789 / 生物種: Enterovirus D68 / Sci species strain: US/MO/14-18947 / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
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-分子 #1: viral protein 1
分子 | 名称: viral protein 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Enterovirus D68 (エンテロウイルス) / 株: US/MO/14-18947 |
分子量 | 理論値: 32.920309 KDa |
配列 | 文字列: IESIIKTATD TVKSEINAEL GVVPSLNAVE TGATSNTEPE EAIQTRTVIN QHGVSETLVE NFLSRAALVS KRSFEYKDHT SSTARADKN FFKWTINTRS FVQLRRKLEL FTYLRFDAEI TILTTVAVNG SGNNTYVGLP DLTLQAMFVP TGALTPEKQD S FHWQSGSN ...文字列: IESIIKTATD TVKSEINAEL GVVPSLNAVE TGATSNTEPE EAIQTRTVIN QHGVSETLVE NFLSRAALVS KRSFEYKDHT SSTARADKN FFKWTINTRS FVQLRRKLEL FTYLRFDAEI TILTTVAVNG SGNNTYVGLP DLTLQAMFVP TGALTPEKQD S FHWQSGSN ASVFFKISDP PARITIPFMC INSAYSVFYD GFAGFEKNGL YGINPADTIG NLCVRIVNEH QPVGFTVTVR VY MKPKHIK AWAPRPPRTL PYMSIANANY KGKERAPNAL SAIIGNRDSV KTMPHNIVNT UniProtKB: Genome polyprotein |
-分子 #2: viral protein 3
分子 | 名称: viral protein 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: enterovirus D68 (エンテロウイルス) / 株: US/MO/14-18947 |
分子量 | 理論値: 27.112814 KDa |
配列 | 文字列: GVPTYLLPGS GQFLTTDDHS SAPALPCFNP TPEMHIPGQV RNMLEVVQVE SMMEINNTES AVGMERLKVD ISALTDVDQL LFNIPLDIQ LDGPLRNTLV GNISRYYTHW SGSLEMTFMF CGSFMAAGKL ILCYTPPGGS CPTTRETAML GTHIVWDFGL Q SSVTLIIP ...文字列: GVPTYLLPGS GQFLTTDDHS SAPALPCFNP TPEMHIPGQV RNMLEVVQVE SMMEINNTES AVGMERLKVD ISALTDVDQL LFNIPLDIQ LDGPLRNTLV GNISRYYTHW SGSLEMTFMF CGSFMAAGKL ILCYTPPGGS CPTTRETAML GTHIVWDFGL Q SSVTLIIP WISGSHYRMF NNDAKSTNAN VGYVTCFMQT NLIVPSESSD TCSLIGFIAA KDDFSLRLMR DSPDIGQLDH LH AAEAAYQ UniProtKB: Genome polyprotein |
-分子 #3: viral protein 2
分子 | 名称: viral protein 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: enterovirus D68 (エンテロウイルス) / 株: US/MO/14-18947 |
分子量 | 理論値: 27.567135 KDa |
配列 | 文字列: SPSAEACGYS DRVLQLKLGN SAIVTQEAAN YCCAYGEWPN YLPDHEAVAI DKPTQPETAT DRFYTLKSVK WETGSTGWWW KLPDALNNI GMFGQNVQHH YLYRSGFLIH VQCNATKFHQ GALLVVAIPE HQRGAHNTNT SPGFDDIMKG EEGGTFNHPY V LDDGTSLA ...文字列: SPSAEACGYS DRVLQLKLGN SAIVTQEAAN YCCAYGEWPN YLPDHEAVAI DKPTQPETAT DRFYTLKSVK WETGSTGWWW KLPDALNNI GMFGQNVQHH YLYRSGFLIH VQCNATKFHQ GALLVVAIPE HQRGAHNTNT SPGFDDIMKG EEGGTFNHPY V LDDGTSLA CATIFPHQWI NLRTNNSATI VLPWMNAAPM DFPLRHNQWT LAIIPVVPLG TRTTSSMVPI TVSIAPMCCE FN GLRHAIT Q UniProtKB: Genome polyprotein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.2 / 詳細: phosphate buffer |
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グリッド | モデル: Homemade / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 120 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.02 kPa |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3710 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3838 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 3-20 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1767 / 平均露光時間: 15.0 sec. / 平均電子線量: 45.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.9 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 18000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
詳細 | A combination of the following approaches was used: (1) model rebuilding using Coot, (2) real space refinement using Phenix, (3) reciprocal space refinment using REFMAC5 (as in standard crystallographic refinement). |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient |
得られたモデル | PDB-6cru: |