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- EMDB-25107: Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-25107
タイトルLassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction
マップデータLassa virus glycoprotein (GPCysR4) map reconstructed from GPCysR4-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction - Main Map
試料
  • 複合体: Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle
    • タンパク質・ペプチド: Josiah GPCysR4 I53-50A
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
機能・相同性
機能・相同性情報


host cell Golgi membrane / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / host cell endoplasmic reticulum membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / membrane / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Arenavirus glycoprotein, zinc binding domain / Arenavirus glycoprotein / Arenavirus glycoprotein
類似検索 - ドメイン・相同性
Pre-glycoprotein polyprotein GP complex
類似検索 - 構成要素
生物種Lassa mammarenavirus (ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.97 Å
データ登録者Antanasijevic A / Brouwer PJM / Ward AB
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
Bill & Melinda Gates FoundationOPP1170236 米国
引用ジャーナル: Cell Host Microbe / 年: 2022
タイトル: Lassa virus glycoprotein nanoparticles elicit neutralizing antibody responses and protection.
著者: Philip J M Brouwer / Aleksandar Antanasijevic / Adam J Ronk / Helena Müller-Kräuter / Yasunori Watanabe / Mathieu Claireaux / Hailee R Perrett / Tom P L Bijl / Marloes Grobben / Jeffrey C ...著者: Philip J M Brouwer / Aleksandar Antanasijevic / Adam J Ronk / Helena Müller-Kräuter / Yasunori Watanabe / Mathieu Claireaux / Hailee R Perrett / Tom P L Bijl / Marloes Grobben / Jeffrey C Umotoy / Angela I Schriek / Judith A Burger / Khadija Tejjani / Nicole M Lloyd / Thijs H Steijaert / Marlies M van Haaren / Kwinten Sliepen / Steven W de Taeye / Marit J van Gils / Max Crispin / Thomas Strecker / Alexander Bukreyev / Andrew B Ward / Rogier W Sanders /
要旨: The Lassa virus is endemic in parts of West Africa, and it causes hemorrhagic fever with high mortality. The development of a recombinant protein vaccine has been hampered by the instability of ...The Lassa virus is endemic in parts of West Africa, and it causes hemorrhagic fever with high mortality. The development of a recombinant protein vaccine has been hampered by the instability of soluble Lassa virus glycoprotein complex (GPC) trimers, which disassemble into monomeric subunits after expression. Here, we use two-component protein nanoparticles consisting of trimeric and pentameric subunits to stabilize GPC in a trimeric conformation. These GPC nanoparticles present twenty prefusion GPC trimers on the surface of an icosahedral particle. Cryo-EM studies of GPC nanoparticles demonstrated a well-ordered structure and yielded a high-resolution structure of an unliganded GPC. These nanoparticles induced potent humoral immune responses in rabbits and protective immunity against the lethal Lassa virus challenge in guinea pigs. Additionally, we isolated a neutralizing antibody that mapped to the putative receptor-binding site, revealing a previously undefined site of vulnerability. Collectively, these findings offer potential approaches to vaccine and therapeutic design for the Lassa virus.
履歴
登録2021年10月5日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年10月12日-
マップ公開2022年10月12日-
更新2022年12月28日-
現状2022年12月28日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_25107.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_25107.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 40.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Lassa virus glycoprotein (GPCysR4) map reconstructed from GPCysR4-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction - Main Map
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.03 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.02
最小 - 最大-0.031668592 - 0.086114384
平均 (標準偏差)-1.2201465e-05 (±0.0033173314)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ220220220
Spacing220220220
セルA=B=C: 226.59999 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_25107_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Lassa virus glycoprotein (GPCysR4) map reconstructed from GPCysR4-I53-50...

ファイルemd_25107_half_map_1.map
注釈Lassa virus glycoprotein (GPCysR4) map reconstructed from GPCysR4-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction - Half Map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Lassa virus glycoprotein (GPCysR4) map reconstructed from GPCysR4-I53-50...

ファイルemd_25107_half_map_2.map
注釈Lassa virus glycoprotein (GPCysR4) map reconstructed from GPCysR4-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction - Half Map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from...

全体名称: Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle
要素
  • 複合体: Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle
    • タンパク質・ペプチド: Josiah GPCysR4 I53-50A
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

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超分子 #1: Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from...

超分子名称: Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
詳細: Josiah GPCysR4 is a trimeric complex consisting of 3 copies of the head domain and 3 copies of the stem domain. Nanoparticle was assembled by combining equimolar amounts of GPC-I53-50A and I53-50B.
由来(天然)生物種: Lassa mammarenavirus (ウイルス)

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分子 #1: Josiah GPCysR4 I53-50A

分子名称: Josiah GPCysR4 I53-50A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Lassa mammarenavirus (ウイルス)
分子量理論値: 73.84557 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MGQIVTFFQE VPHVIEEVMN IVLIALSVLA VLKGLYNFAT CGLVGLVTFL LLCGRSCTTS LYKGVYELQT LELNMETLNM TMPLSCTKN NSHHYIMVGN ETGLELTLTN TSIINHKFCN LSDAHKKNLY DHALMSIIST FHLSIPNFNQ YEAMSCDFNG G KISVQYNL ...文字列:
MGQIVTFFQE VPHVIEEVMN IVLIALSVLA VLKGLYNFAT CGLVGLVTFL LLCGRSCTTS LYKGVYELQT LELNMETLNM TMPLSCTKN NSHHYIMVGN ETGLELTLTN TSIINHKFCN LSDAHKKNLY DHALMSIIST FHLSIPNFNQ YEAMSCDFNG G KISVQYNL SHSYAGDAAN HCGTVANGVL QTFMRMAWGG SYIALDSGCG NWDCIMTSYQ YLIIQNTTWE DHCQFSRPSP IG YLGLLSQ RTRDIYISRR RRGTFTWTLS DSEGKDTPGG YCLTRWMLIE AELKCFGNTA VAKCNEKHDE EFCDMLRLFD FNK QAIQRL KAPAQMSIQL INKAVNALIN DQLIMKNHLR DIMCIPYCNY SKYWYLNHTT TGRTSLPKCW LVSNGSYLNE THFS DDIEQ QADNMITEML QKEYMERQGG SGGSGGSGGS GGSEKAAKAE EAARKMEELF KKHKIVAVLR ANSVEEAIEK AVAVF AGGV HLIEITFTVP DADTVIKALS VLKEKGAIIG AGTVTSVEQC RKAVESGAEF IVSPHLDEEI SQFCKEKGVF YMPGVM TPT ELVKAMKLGH DILKLFPGEV VGPEFVKAMK GPFPNVKFVP TGGVDLDNVC EWFDAGVLAV GVGDALVEGD PDEVREK AK EFVEKIRGCT EGSLEWSHPQ FEK

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分子 #6: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

分子名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 6 / 式: NAG
分子量理論値: 221.208 Da
Chemical component information

ChemComp-NAG:
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-アセチル-β-D-グルコサミン

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2 mg/mL
緩衝液pH: 7
構成要素:
濃度式名称
10.0 mMTris-HClTris
150.0 mMNaClSodium chloride

詳細: TBS
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 7 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot time 4s, Wait time 10s, Blot force 0.
詳細Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction. Nanoparticle was assembled by combining equimolar amounts of GPC-I53-50A and I53-50B.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 2 / 平均露光時間: 10.5 sec. / 平均電子線量: 50.4 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.6 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.6 µm / 倍率（公称値）: 29000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 1728229
詳細: This is the number of GPCysR4 trimer subparticles extracted from the GPC-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction: 86,411 nanoparticles X 20 = 1728229.
初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: Map reconstructed from negative stain EM
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C3 (3回回転対称) / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.97 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
詳細: C3 symmetry used for refinement. Solvent mask applied.
使用した粒子像数: 124891
初期 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / 詳細: Regularized likelihood
最終 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / 詳細: Regularized likelihood
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

5vk2

精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-7sgd:
Lassa virus glycoprotein construct(Josiah GPCysR4) recovered from GPC-I53-50 nanoparticle by localized reconstruction

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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