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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-22417 | ||||||||||||
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タイトル | ORC-O1AAA: Human Origin Recognition Complex (ORC) with dynamic/unresolved ORC2 WH | ||||||||||||
マップデータ | combination of global and focused refinement utilizing the 'vop max' function in chimera | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | replication / AAA+ / ORC / DNA-binding | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 polar body extrusion after meiotic divisions / CDC6 association with the ORC:origin complex / origin recognition complex / E2F-enabled inhibition of pre-replication complex formation / nuclear origin of replication recognition complex / nuclear pre-replicative complex / inner kinetochore / DNA replication preinitiation complex / Activation of the pre-replicative complex / mitotic DNA replication checkpoint signaling ...polar body extrusion after meiotic divisions / CDC6 association with the ORC:origin complex / origin recognition complex / E2F-enabled inhibition of pre-replication complex formation / nuclear origin of replication recognition complex / nuclear pre-replicative complex / inner kinetochore / DNA replication preinitiation complex / Activation of the pre-replicative complex / mitotic DNA replication checkpoint signaling / neural precursor cell proliferation / Activation of ATR in response to replication stress / G1/S-Specific Transcription / regulation of DNA replication / DNA replication origin binding / protein polymerization / DNA replication initiation / glial cell proliferation / heterochromatin / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / Assembly of the pre-replicative complex / Orc1 removal from chromatin / chromosome, telomeric region / DNA replication / nuclear body / chromatin binding / centrosome / nucleotide binding / chromatin / nucleolus / negative regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / DNA binding / nucleoplasm / ATP binding / membrane / nucleus / metal ion binding / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Jaremko MJ / Joshua-Tor L | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: The dynamic nature of the human origin recognition complex revealed through five cryoEM structures. 著者: Matt J Jaremko / Kin Fan On / Dennis R Thomas / Bruce Stillman / Leemor Joshua-Tor / 要旨: Genome replication is initiated from specific origin sites established by dynamic events. The Origin Recognition Complex (ORC) is necessary for orchestrating the initiation process by binding to ...Genome replication is initiated from specific origin sites established by dynamic events. The Origin Recognition Complex (ORC) is necessary for orchestrating the initiation process by binding to origin DNA, recruiting CDC6, and assembling the MCM replicative helicase on DNA. Here we report five cryoEM structures of the human ORC (HsORC) that illustrate the native flexibility of the complex. The absence of ORC1 revealed a compact, stable complex of ORC2-5. Introduction of ORC1 opens the complex into several dynamic conformations. Two structures revealed dynamic movements of the ORC1 AAA+ and ORC2 winged-helix domains that likely impact DNA incorporation into the ORC core. Additional twist and pinch motions were observed in an open ORC conformation revealing a hinge at the ORC5·ORC3 interface that may facilitate ORC binding to DNA. Finally, a structure of ORC was determined with endogenous DNA bound in the core revealing important differences between human and yeast origin recognition. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_22417.map.gz | 115.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-22417-v30.xml emd-22417.xml | 29.2 KB 29.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_22417.png | 156.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-22417.cif.gz | 8.4 KB | ||
その他 | emd_22417_additional_1.map.gz emd_22417_additional_2.map.gz | 117 MB 116.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22417 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22417 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_22417.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | combination of global and focused refinement utilizing the 'vop max' function in chimera | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: global refinement
ファイル | emd_22417_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | global refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: focused refinement
ファイル | emd_22417_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | focused refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : ORC-O1AAA
全体 | 名称: ORC-O1AAA |
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要素 |
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-超分子 #1: ORC-O1AAA
超分子 | 名称: ORC-O1AAA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 詳細: 5 subunit complex with the ORC2 winged-helix domain in a dynamic/unresolved state |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 296.53 KDa |
-分子 #1: Origin recognition complex subunit 1
分子 | 名称: Origin recognition complex subunit 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 44.310887 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MAPQIRSRSL AAQEPASVLE EARLRLHVSA VPESLPCREQ EFQDIYNFVE SKLLDHTGGC MYISGVPGTG KTATVHEVIR CLQQAAQAN DVPPFQYIEV NGMKLTEPHQ VYVQILQKLT GQKATANHAA ELLAKQFCTR GSPQETTVLL VDELDLLWTH K QDIMYNLF ...文字列: MAPQIRSRSL AAQEPASVLE EARLRLHVSA VPESLPCREQ EFQDIYNFVE SKLLDHTGGC MYISGVPGTG KTATVHEVIR CLQQAAQAN DVPPFQYIEV NGMKLTEPHQ VYVQILQKLT GQKATANHAA ELLAKQFCTR GSPQETTVLL VDELDLLWTH K QDIMYNLF DWPTHKEARL VVLAIANTMD LPERIMMNRV SSRLGLTRMC FQPYTYSQLQ QILRSRLKHL KAFEDDAIQL VA RKVAALS GDARRCLDIC RRATEICEFS QQKPDSPGLV TIAHSMEAVD EMFSSSYITA IKNSSVLEQS FLRAILAEFR RSG LEEATF QQIYSQHVAL CRMEGLPYPT MSETMAVCSH LGSCRLLLVE PSRNDLLLRV RLNVSQDDVL YALKDE UniProtKB: Origin recognition complex subunit 1 |
-分子 #2: Origin recognition complex subunit 2
分子 | 名称: Origin recognition complex subunit 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 66.063375 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MSKPELKEDK MLEVHFVGDD DVLNHILDRE GGAKLKKERA QLLVNPKKII KKPEYDLEED DQEVLKDQNY VEIMGRDVQE SLKNGSATG GGNKVYSFQN RKHSEKMAKL ASELAKTPQK SVSFSLKNDP EITINVPQSS KGHSASDKVQ PKNNDKSEFL S TAPRSLRK ...文字列: MSKPELKEDK MLEVHFVGDD DVLNHILDRE GGAKLKKERA QLLVNPKKII KKPEYDLEED DQEVLKDQNY VEIMGRDVQE SLKNGSATG GGNKVYSFQN RKHSEKMAKL ASELAKTPQK SVSFSLKNDP EITINVPQSS KGHSASDKVQ PKNNDKSEFL S TAPRSLRK RLIVPRSHSD SESEYSASNS EDDEGVAQEH EEDTNAVIFS QKIQAQNRVV SAPVGKETPS KRMKRDKTSD LV EEYFEAH SSSKVLTSDR TLQKLKRAKL DQQTLRNLLS KVSPSFSAEL KQLNQQYEKL FHKWMLQLHL GFNIVLYGLG SKR DLLERF RTTMLQDSIH VVINGFFPGI SVKSVLNSIT EEVLDHMGTF RSILDQLDWI VNKFKEDSSL ELFLLIHNLD SQML RGEKS QQIIGQLSSL HNIYLIASID HLNAPLMWDH AKQSLFNWLW YETTTYSPYT EETSYENSLL VKQSGSLPLS SLTHV LRSL TPNARGIFRL LIKYQLDNQD NPSYIGLSFQ DFYQQCREAF LVNSDLTLRA QLTEFRDHKL IRTKKGTDGV EYLLIP VDN GTLTDFLEKE EEEA UniProtKB: Origin recognition complex subunit 2 |
-分子 #3: Origin recognition complex subunit 3
分子 | 名称: Origin recognition complex subunit 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 82.436133 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MATSSMSKGC FVFKPNSKKR KISLPIEDYF NKGKNEPEDS KLRFETYQLI WQQMKSENER LQEELNKNLF DNLIEFLQKS HSGFQKNSR DLGGQIKLRE IPTAALVLGV NVTDHDLTFG SLTEALQNNV TPYVVSLQAK DCPDMKHFLQ KLISQLMDCC V DIKSKEEE ...文字列: MATSSMSKGC FVFKPNSKKR KISLPIEDYF NKGKNEPEDS KLRFETYQLI WQQMKSENER LQEELNKNLF DNLIEFLQKS HSGFQKNSR DLGGQIKLRE IPTAALVLGV NVTDHDLTFG SLTEALQNNV TPYVVSLQAK DCPDMKHFLQ KLISQLMDCC V DIKSKEEE SVHVTQRKTH YSMDSLSSWY MTVTQKTDPK MLSKKRTTSS QWQSPPVVVI LKDMESFATK VLQDFIIISS QH LHEFPLI LIFGIATSPI IIHRLLPHAV SSLLCIELFQ SLSCKEHLTT VLDKLLLTTQ FPFKINEKVL QVLTNIFLYH DFS VQNFIK GLQLSLLEHF YSQPLSVLCC NLPEAKRRIN FLSNNQCENI RRLPSFRRYV EKQASEKQVA LLTNERYLKE ETQL LLENL HVYHMNYFLV LRCLHKFTSS LPKYPLGRQI RELYCTCLEK NIWDSEEYAS VLQLLRMLAK DELMTILEKC FKVFK SYCE NHLGSTAKRI EEFLAQFQSL DAETKEEEDA SGSQPKGLQK TDLYHLQKSL LEMKELRRSK KQTKFEVLRE NVVNFI DCL VREYLLPPET QPLHEVVYFS AAHALREHLN AAPRIALHTA LNNPYYYLKN EALKSEEGCI PNIAPDICIA YKLHLEC SR LINLVDWSEA FATVVTAAEK MDANSATSEE MNEIIHARFI RAVSELELLG FIKPTKQKTD HVARLTWGGC UniProtKB: Origin recognition complex subunit 3 |
-分子 #4: Origin recognition complex subunit 4
分子 | 名称: Origin recognition complex subunit 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 50.443266 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MSSRKSKSNS LIHTECLSQV QRILRERFCR QSPHSNLFGV QVQYKHLSEL LKRTALHGES NSVLIIGPRG SGKTMLINHA LKELMEIEE VSENVLQVHL NGLLQINDKI ALKEITRQLN LENVVGDKVF GSFAENLSFL LEALKKGDRT SSCPVIFILD E FDLFAHHK ...文字列: MSSRKSKSNS LIHTECLSQV QRILRERFCR QSPHSNLFGV QVQYKHLSEL LKRTALHGES NSVLIIGPRG SGKTMLINHA LKELMEIEE VSENVLQVHL NGLLQINDKI ALKEITRQLN LENVVGDKVF GSFAENLSFL LEALKKGDRT SSCPVIFILD E FDLFAHHK NQTLLYNLFD ISQSAQTPIA VIGLTCRLDI LELLEKRVKS RFSHRQIHLM NSFGFPQYVK IFKEQLSLPA EF PDKVFAE KWNENVQYLS EDRSVQEVLQ KHFNISKNLR SLHMLLMLAL NRVTASHPFM TAVDLMEASQ LCSMDSKANI VHG LSVLEI CLIIAMKHLN DIYEEEPFNF QMVYNEFQKF VQRKAHSVYN FEKPVVMKAF EHLQQLELIK PMERTSGNSQ REYQ LMKLL LDNTQIMNAL QKYPNCPTDV RQWATSSLSW L UniProtKB: Origin recognition complex subunit 4 |
-分子 #5: Origin recognition complex subunit 5
分子 | 名称: Origin recognition complex subunit 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 50.298867 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MPHLENVVLC RESQVSILQS LFGERHHFSF PSIFIYGHTA SGKTYVTQTL LKTLELPHVF VNCVECFTLR LLLEQILNKL NHLSSSEDG CSTEITCETF NDFVRLFKQV TTAENLKDQT VYIVLDKAEY LRDMEANLLP GFLRLQELAD RNVTVLFLSE I VWEKFRPN ...文字列: MPHLENVVLC RESQVSILQS LFGERHHFSF PSIFIYGHTA SGKTYVTQTL LKTLELPHVF VNCVECFTLR LLLEQILNKL NHLSSSEDG CSTEITCETF NDFVRLFKQV TTAENLKDQT VYIVLDKAEY LRDMEANLLP GFLRLQELAD RNVTVLFLSE I VWEKFRPN TGCFEPFVLY FPDYSIGNLQ KILSHDHPPE YSADFYAAYI NILLGVFYTV CRDLKELRHL AVLNFPKYCE PV VKGEASE RDTRKLWRNI EPHLKKAMQT VYLREISSSQ WEKLQKDDTD PGQLKGLSAH THVELPYYSK FILIAAYLAS YNP ARTDKR FFLKHHGKIK KTNFLKKHEK TSNSLLGPKP FPLDRLLAIL YSIVDSRVAP TANIFSQITS LVTLQLLTLV GHDD QLDGP KYKCTVSLDF IRAIARTVNF DIIKYLYDFL UniProtKB: Origin recognition complex subunit 5 |
-分子 #6: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 3 / 式: ATP |
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分子量 | 理論値: 507.181 Da |
Chemical component information | ChemComp-ATP: |
-分子 #7: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 3 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #8: POTASSIUM ION
分子 | 名称: POTASSIUM ION / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 1 / 式: K |
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分子量 | 理論値: 39.098 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.8 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: LEICA EM GP |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 9068 / 平均露光時間: 6.0 sec. / 平均電子線量: 66.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Correlation Coefficient | ||||||||||||
得られたモデル | PDB-7jpo: |
-原子モデル構築 2
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: BACKBONE TRACE | ||||||||||||
得られたモデル | PDB-7jpo: |