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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20986 | |||||||||
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タイトル | Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs. | |||||||||
マップデータ | Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs | |||||||||
試料 |
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キーワード | Pentameric Ligand-gated Ion Channels / POPC / Nanodisc / Cys-loop receptors / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 extracellular ligand-gated monoatomic ion channel activity / regulation of membrane potential / transmembrane signaling receptor activity / neuron projection / signal transduction / identical protein binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Dickeya dadantii 3937 (バクテリア) / Dickeya dadantii (strain 3937) (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Grosman C / Kumar P | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2020 タイトル: Cryo-EM structures of a lipid-sensitive pentameric ligand-gated ion channel embedded in a phosphatidylcholine-only bilayer. 著者: Pramod Kumar / Yuhang Wang / Zhening Zhang / Zhiyu Zhao / Gisela D Cymes / Emad Tajkhorshid / Claudio Grosman / 要旨: The lipid dependence of the nicotinic acetylcholine receptor from the electric organ has long been recognized, and one of the most consistent experimental observations is that, when reconstituted in ...The lipid dependence of the nicotinic acetylcholine receptor from the electric organ has long been recognized, and one of the most consistent experimental observations is that, when reconstituted in membranes formed by zwitterionic phospholipids alone, exposure to agonist fails to elicit ion-flux activity. More recently, it has been suggested that the bacterial homolog ELIC ( ligand-gated ion channel) has a similar lipid sensitivity. As a first step toward the elucidation of the structural basis of this phenomenon, we solved the structures of ELIC embedded in palmitoyl-oleoyl-phosphatidylcholine- (POPC-) only nanodiscs in both the unliganded (4.1-Å resolution) and agonist-bound (3.3 Å) states using single-particle cryoelectron microscopy. Comparison of the two structural models revealed that the largest differences occur at the level of loop C-at the agonist-binding sites-and the loops at the interface between the extracellular and transmembrane domains (ECD and TMD, respectively). On the other hand, the transmembrane pore is occluded in a remarkably similar manner in both structures. A straightforward interpretation of these findings is that POPC-only membranes frustrate the ECD-TMD coupling in such a way that the "conformational wave" of liganded-receptor gating takes place in the ECD and the interfacial M2-M3 linker but fails to penetrate the membrane and propagate into the TMD. Furthermore, analysis of the structural models and molecular simulations suggested that the higher affinity for agonists characteristic of the open- and desensitized-channel conformations results, at least in part, from the tighter confinement of the ligand to its binding site; this limits the ligand's fluctuations, and thus delays its escape into bulk solvent. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_20986.map.gz | 2.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-20986-v30.xml emd-20986.xml | 15.4 KB 15.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_20986.png | 45.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-20986.cif.gz | 5.5 KB | ||
その他 | emd_20986_half_map_1.map.gz emd_20986_half_map_2.map.gz | 23.4 MB 23.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20986 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20986 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_20986_validation.pdf.gz | 673.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_20986_full_validation.pdf.gz | 673 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_20986_validation.xml.gz | 10.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_20986_validation.cif.gz | 12.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20986 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20986 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20986.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.0961 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs.
ファイル | emd_20986_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs
ファイル | emd_20986_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs.
全体 | 名称: Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs. |
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要素 |
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-超分子 #1: Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs.
超分子 | 名称: Unliganded ELIC in POPC-only nanodiscs. / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Dickeya dadantii 3937 (バクテリア) |
-分子 #1: Gamma-aminobutyric-acid receptor subunit beta-1
分子 | 名称: Gamma-aminobutyric-acid receptor subunit beta-1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Dickeya dadantii (strain 3937) (バクテリア) / 株: 3937 |
分子量 | 理論値: 36.879 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌) |
配列 | 文字列: APADNAADAR PVDVSVSIFI NKIYGVNTLE QTYKVDGYIV AQWTGKPRKT PGDKPLIVEN TQIERWINNG LWVPALEFIN VVGSPDTGN KRLMLFPDGR VIYNARFLGS FSNDMDFRLF PFDRQQFVLE LEPFSYNNQQ LRFSDIQVYT ENIDNEEIDE W WIRGKAST ...文字列: APADNAADAR PVDVSVSIFI NKIYGVNTLE QTYKVDGYIV AQWTGKPRKT PGDKPLIVEN TQIERWINNG LWVPALEFIN VVGSPDTGN KRLMLFPDGR VIYNARFLGS FSNDMDFRLF PFDRQQFVLE LEPFSYNNQQ LRFSDIQVYT ENIDNEEIDE W WIRGKAST HISDIRYDHL SSVQPNQNEF SRITVRIDAV RNPSYYLWSF ILPLGLIIAA SWSVFWLESF SERLQTSFTL ML TVVAYAF YTSNILPRLP YTTVIDQMII AGYGSIFAAI LLIIFAHHRQ ANGVEDDLLI QRCRLAFPLG FLAIGCVLVI RGI TL UniProtKB: Gamma-aminobutyric-acid receptor subunit beta-1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 150 mM NaCl and 10 mM sodium phosphate, pH 8.0. | ||||||||||||
グリッド | モデル: Homemade / 材質: GOLD | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: SPOTITON |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: DIRECT ELECTRON DE-16 (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 63.56 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-6v0b: |