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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7oi0 | ||||||
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タイトル | E.coli delta rbfA pre-30S ribosomal subunit class D | ||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / 30S subunit / RNA / RBFA | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mRNA 5'-UTR binding / small ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation ...mRNA 5'-UTR binding / small ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli BW25113 (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.76 Å | ||||||
データ登録者 | Maksimova, E. / Korepanov, A. / Baymukhametov, T. / Kravchenko, O. / Stolboushkina, E. | ||||||
資金援助 | ロシア, 1件
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引用 | ジャーナル: Int J Mol Sci / 年: 2021 タイトル: RbfA Is Involved in Two Important Stages of 30S Subunit Assembly: Formation of the Central Pseudoknot and Docking of Helix 44 to the Decoding Center. 著者: Elena M Maksimova / Alexey P Korepanov / Olesya V Kravchenko / Timur N Baymukhametov / Alexander G Myasnikov / Konstantin S Vassilenko / Zhanna A Afonina / Elena A Stolboushkina / 要旨: Ribosome biogenesis is a highly coordinated and complex process that requires numerous assembly factors that ensure prompt and flawless maturation of ribosomal subunits. Despite the increasing amount ...Ribosome biogenesis is a highly coordinated and complex process that requires numerous assembly factors that ensure prompt and flawless maturation of ribosomal subunits. Despite the increasing amount of data collected, the exact role of most assembly factors and mechanistic details of their operation remain unclear, mainly due to the shortage of high-resolution structural information. Here, using cryo-electron microscopy, we characterized 30S ribosomal particles isolated from an strain with a deleted gene for the RbfA factor. The cryo-EM maps for pre-30S subunits were divided into six classes corresponding to consecutive assembly intermediates: from the particles with a completely unresolved head domain and unfolded central pseudoknot to almost mature 30S subunits with well-resolved body, platform, and head domains and partially distorted helix 44. The structures of two predominant 30S intermediates belonging to most populated classes obtained at 2.7 Å resolutions indicate that RbfA acts at two distinctive 30S assembly stages: early formation of the central pseudoknot including folding of the head, and positioning of helix 44 in the decoding center at a later stage. Additionally, it was shown that the formation of the central pseudoknot may promote stabilization of the head domain, likely through the RbfA-dependent maturation of the neck helix 28. An update to the model of factor-dependent 30S maturation is proposed, suggesting that RfbA is involved in most of the subunit assembly process. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7oi0.cif.gz | 676.5 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7oi0.ent.gz | 505.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7oi0.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7oi0_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7oi0_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7oi0_validation.xml.gz | 74.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7oi0_validation.cif.gz | 118.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/oi/7oi0 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/oi/7oi0 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-30S ribosomal protein ... , 10種, 10分子 DFHKLOPQRT
#1: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A6D2XM56 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: P02358 |
#3: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A6D2XYQ3 |
#4: タンパク質 | 分子量: 13739.778 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A6D2X4T2 |
#5: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4S5B3M5 |
#6: タンパク質 | 分子量: 10319.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4S5B232 |
#7: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A6D2XXS6 |
#8: タンパク質 | 分子量: 9593.296 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4S5APA8 |
#9: タンパク質 | 分子量: 8874.276 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A6D2XHZ3 |
#10: タンパク質 | 分子量: 9577.268 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4S5B3X7 |
-RNA鎖 / 非ポリマー , 2種, 375分子 A
#11: RNA鎖 | 分子量: 499690.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli BW25113 (大腸菌) |
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#12: 水 | ChemComp-HOH / |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: E. coli pre-30S delta rbfA ribosomal subunit / タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#11 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 値: 0.85 MDa |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli BW25113 (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 2.5 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | |||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.76 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 106319 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | |||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1 / Accession code: 4V4Q / Initial refinement model-ID: 1 / PDB-ID: 4V4Q / Source name: PDB / タイプ: experimental model
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