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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7nkx | |||||||||||||||
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タイトル | RNA polymerase II-Spt4/5-nucleosome-Chd1 structure | |||||||||||||||
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![]() | TRANSCRIPTION / chromatin remodelling / nucleosome / chromatin | |||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / regulation of transcription-coupled nucleotide-excision repair / nucleolar chromatin / regulation of transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / negative regulation of DNA-templated DNA replication / regulation of rRNA processing / RNA polymerase I core binding / intracellular mRNA localization / regulation of chromatin organization ...negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / regulation of transcription-coupled nucleotide-excision repair / nucleolar chromatin / regulation of transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / negative regulation of DNA-templated DNA replication / regulation of rRNA processing / RNA polymerase I core binding / intracellular mRNA localization / regulation of chromatin organization / DSIF complex / rDNA heterochromatin / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / SLIK (SAGA-like) complex / rDNA binding / DNA double-strand break processing / RPB4-RPB7 complex / nucleosome organization / ATP-dependent chromatin remodeler activity / U4 snRNA binding / snRNP binding / SAGA complex / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / sister chromatid cohesion / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / termination of RNA polymerase II transcription / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / transcription elongation-coupled chromatin remodeling / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / termination of RNA polymerase III transcription / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / RNA-templated transcription / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA Polymerase I Promoter Escape / spliceosomal complex assembly / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / termination of RNA polymerase I transcription / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / RNA polymerase II complex binding / Estrogen-dependent gene expression / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / positive regulation of translational initiation / Dual incision in TC-NER / chromosome, centromeric region / U5 snRNA binding / ATP-dependent activity, acting on DNA / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / transcription by RNA polymerase III / translesion synthesis / transcription by RNA polymerase I / RNA polymerase I complex / transcription elongation by RNA polymerase I / RNA polymerase III complex / transcription-coupled nucleotide-excision repair / U1 snRNA binding / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / : / : / translation initiation factor binding / positive regulation of autophagy / DNA-directed RNA polymerase activity / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / helicase activity / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / DNA-templated transcription initiation / transcription elongation by RNA polymerase II / P-body / double-strand break repair via homologous recombination / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / chromatin DNA binding / ribonucleoside binding / : / : / : / : / : / : / DNA-directed RNA polymerase / mRNA processing / cytoplasmic stress granule / structural constituent of chromatin / nucleosome / peroxisome / heterochromatin formation 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() synthetic construct (人工物) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||||||||
![]() | Farnung, L. / Ochmann, M. / Engeholm, M. / Cramer, P. | |||||||||||||||
資金援助 | European Union, ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis of nucleosome transcription mediated by Chd1 and FACT. 著者: Lucas Farnung / Moritz Ochmann / Maik Engeholm / Patrick Cramer / ![]() 要旨: Efficient transcription of RNA polymerase II (Pol II) through nucleosomes requires the help of various factors. Here we show biochemically that Pol II transcription through a nucleosome is ...Efficient transcription of RNA polymerase II (Pol II) through nucleosomes requires the help of various factors. Here we show biochemically that Pol II transcription through a nucleosome is facilitated by the chromatin remodeler Chd1 and the histone chaperone FACT when the elongation factors Spt4/5 and TFIIS are present. We report cryo-EM structures of transcribing Saccharomyces cerevisiae Pol II-Spt4/5-nucleosome complexes with bound Chd1 or FACT. In the first structure, Pol II transcription exposes the proximal histone H2A-H2B dimer that is bound by Spt5. Pol II has also released the inhibitory DNA-binding region of Chd1 that is poised to pump DNA toward Pol II. In the second structure, Pol II has generated a partially unraveled nucleosome that binds FACT, which excludes Chd1 and Spt5. These results suggest that Pol II progression through a nucleosome activates Chd1, enables FACT binding and eventually triggers transfer of FACT together with histones to upstream DNA. | |||||||||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 902.2 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-DNA-directed RNA polymerase II subunit ... , 7種, 7分子 ABCIKDG
#1: タンパク質 | 分子量: 191821.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#2: タンパク質 | 分子量: 138937.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 35330.457 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#7: タンパク質 | 分子量: 14308.161 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 13633.493 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#21: タンパク質 | 分子量: 25451.191 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#22: タンパク質 | 分子量: 19081.053 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 5種, 5分子 EFHJL
#4: タンパク質 | 分子量: 25117.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#5: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 16525.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#8: タンパク質 | 分子量: 8290.732 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#10: タンパク質 | 分子量: 7729.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 7種, 11分子 aebfcgdhWYZ
#11: タンパク質 | 分子量: 15435.126 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() #12: タンパク質 | 分子量: 11394.426 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() #13: タンパク質 | 分子量: 14109.436 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() #14: タンパク質 | 分子量: 13655.948 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() #17: タンパク質 | | 分子量: 168496.609 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: CHD1, YER164W, SYGP-ORF4 / 細胞株 (発現宿主): Hi5 / 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: P32657, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 #19: タンパク質 | | 分子量: 11168.772 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: BJ5464 遺伝子: PACBIOSEQ_LOCUS2707, PACBIOSEQ_LOCUS2757, SCNYR20_0003027800, SCP684_0002027900 細胞株 (発現宿主): Hi5 / 発現宿主: ![]() #20: タンパク質 | | 分子量: 116096.234 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SPT5, YML010W, YM9571.08 / 細胞株 (発現宿主): Hi5 / 発現宿主: ![]() |
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-DNA鎖 , 2種, 2分子 TN
#15: DNA鎖 | 分子量: 56835.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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#16: DNA鎖 | 分子量: 54656.711 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#18: RNA鎖 | 分子量: 21902.600 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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-非ポリマー , 4種, 11分子 






#23: 化合物 | ChemComp-ZN / #24: 化合物 | ChemComp-MG / | #25: 化合物 | ChemComp-ADP / | #26: 化合物 | ChemComp-BEF / | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: RNA polymerase II-Spt4/5-Chd1-nucleosome / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#22 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 実験値: NO |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 39 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 30876 / 対称性のタイプ: POINT |