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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7n31 | ||||||
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タイトル | Elongating 70S ribosome complex in a post-translocation (POST) conformation | ||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / 70S ribosome / post-translocation / tRNA / mRNA | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of cytoplasmic translational initiation / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex ...negative regulation of cytoplasmic translational initiation / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of translational initiation / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / translational initiation / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) Escherichia coli BL21 (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.69 Å | ||||||
データ登録者 | Rundlet, E.J. / Holm, M. / Schacherl, M. / Natchiar, K.S. / Altman, R.B. / Spahn, C.M.T. / Myasnikov, A.G. / Blanchard, S.C. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2021 タイトル: Structural basis of early translocation events on the ribosome. 著者: Emily J Rundlet / Mikael Holm / Magdalena Schacherl / S Kundhavai Natchiar / Roger B Altman / Christian M T Spahn / Alexander G Myasnikov / Scott C Blanchard / 要旨: Peptide-chain elongation during protein synthesis entails sequential aminoacyl-tRNA selection and translocation reactions that proceed rapidly (2-20 per second) and with a low error rate (around ...Peptide-chain elongation during protein synthesis entails sequential aminoacyl-tRNA selection and translocation reactions that proceed rapidly (2-20 per second) and with a low error rate (around 10 to 10 at each step) over thousands of cycles. The cadence and fidelity of ribosome transit through mRNA templates in discrete codon increments is a paradigm for movement in biological systems that must hold for diverse mRNA and tRNA substrates across domains of life. Here we use single-molecule fluorescence methods to guide the capture of structures of early translocation events on the bacterial ribosome. Our findings reveal that the bacterial GTPase elongation factor G specifically engages spontaneously achieved ribosome conformations while in an active, GTP-bound conformation to unlock and initiate peptidyl-tRNA translocation. These findings suggest that processes intrinsic to the pre-translocation ribosome complex can regulate the rate of protein synthesis, and that energy expenditure is used later in the translocation mechanism than previously proposed. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7n31.cif.gz | 3.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7n31.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7n31.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7n31_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7n31_full_validation.pdf.gz | 1.9 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7n31_validation.xml.gz | 226.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7n31_validation.cif.gz | 386.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/n3/7n31 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/n3/7n31 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 6種, 6分子 16mR235PtDt
#1: RNA鎖 | 分子量: 497405.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: 16S rRNA / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1789840096 |
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#22: RNA鎖 | 分子量: 19128.443 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: Chains: mR / 由来: (合成) Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
#23: RNA鎖 | 分子量: 941812.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: 23S rRNA / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 |
#24: RNA鎖 | 分子量: 38790.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Chains: 5 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 991970073 |
#55: RNA鎖 | 分子量: 24717.859 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株 (発現宿主): MRE600 |
#56: RNA鎖 | 分子量: 24734.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: tRNA / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株 (発現宿主): MRE600 |
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 SBSCSDSESFSGSHSISJSKSLSMSNSOSPSQSRSSSTSU
#2: タンパク質 | 分子量: 26781.670 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S2 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V0 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 26031.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S3 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V3 |
#4: タンパク質 | 分子量: 23514.199 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S4 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V8 |
#5: タンパク質 | 分子量: 17629.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S5 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7W1 |
#6: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S6 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P02358 |
#7: タンパク質 | 分子量: 20055.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S7 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P02359 |
#8: タンパク質 | 分子量: 14146.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S8 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14886.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S9 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7X3 |
#10: タンパク質 | 分子量: 11755.597 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S10 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7R5 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13870.975 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S11 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#12: タンパク質 | 分子量: 13814.249 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S12 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: A0A4S5B3M5 |
#13: タンパク質 | 分子量: 13128.467 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S13 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#14: タンパク質 | 分子量: 11606.560 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S14 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0AG59 |
#15: タンパク質 | 分子量: 10290.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S15 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0ADZ4 |
#16: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S16 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7T3 |
#17: タンパク質 | 分子量: 9724.491 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S17 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0AG63 |
#18: タンパク質 | 分子量: 9005.472 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S18 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#19: タンパク質 | 分子量: 10455.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S19 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#20: タンパク質 | 分子量: 9708.464 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S20 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7U7 |
#21: タンパク質 | 分子量: 8524.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Ribosomal Protein S21 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P68679 |
+50S ribosomal protein ... , 29種, 29分子 LBLCLDLELFLILMLNLOLPLQLRLSLTLULVLWLXLYLaLbLcLdLeLfLgLhLiLj
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 Pp
#54: タンパク質・ペプチド | 分子量: 425.565 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Polypeptide / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 |
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-非ポリマー , 5種, 226分子
#57: 化合物 | ChemComp-MG / #58: 化合物 | #59: 化合物 | ChemComp-PUT / #60: 化合物 | ChemComp-SPD / #61: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Elongating 70S ribosome complex in a post-translocation (POST) conformation タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#53, #55, #54, #56 / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 濃度: 5.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 283 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 87 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
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3次元再構成 | 解像度: 2.69 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 34170 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL |