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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7989 | |||||||||
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タイトル | Cytoplasmic domain of Ca2+-bound human type 3 1,4,5-inositol trisphosphate receptor | |||||||||
マップデータ | primary map | |||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.69 Å | |||||||||
データ登録者 | Hite RK / Paknejad N | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2018 タイトル: Structural basis for the regulation of inositol trisphosphate receptors by Ca and IP. 著者: Navid Paknejad / Richard K Hite / 要旨: Inositol trisphosphate receptors (IPRs) are ubiquitous Ca-permeable channels that mediate release of Ca from the endoplasmic reticulum, thereby regulating numerous processes including cell division, ...Inositol trisphosphate receptors (IPRs) are ubiquitous Ca-permeable channels that mediate release of Ca from the endoplasmic reticulum, thereby regulating numerous processes including cell division, cell death, differentiation and fertilization. IPRs are jointly activated by inositol trisphosphate (IP) and their permeant ion, Ca. At high concentrations, however, Ca inhibits activity, ensuring precise spatiotemporal control over intracellular Ca. Despite extensive characterization of IPR, the mechanisms through which these molecules control channel gating have remained elusive. Here, we present structures of full-length human type 3 IPRs in ligand-bound and ligand-free states. Multiple IP-bound structures demonstrate that the large cytoplasmic domain provides a platform for propagation of long-range conformational changes to the ion-conduction gate. Structures in the presence of Ca reveal two Ca-binding sites that induce the disruption of numerous interactions between subunits, thereby inhibiting IPR. These structures thus provide a mechanistic basis for beginning to understand the regulation of IPR. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7989.map.gz | 197.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7989-v30.xml emd-7989.xml | 12.6 KB 12.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7989.png | 101.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7989 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7989 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7989_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7989_full_validation.pdf.gz | 77.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7989_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7989 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7989 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7978C 7979C 7980C 7981C 7982C 7983C 7984C 7985C 7986C 7987C 7988C 7990C 7991C 7992C 7993C 7994C 7995C 7996C 6dqjC 6dqnC 6dqsC 6dqvC 6dqzC 6dr0C 6dr2C 6draC 6drcC C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7989.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | primary map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.088 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : human type 3 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor
全体 | 名称: human type 3 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor |
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要素 |
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-超分子 #1: human type 3 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor
超分子 | 名称: human type 3 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換株: HEK 293S GnTi / 組換プラスミド: BacMam |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 8 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 150mM Nacl 50mM Tris-HCl, pH 8.0 2mM DTT 0.06% Digitonin 2mM CaCl2 | ||||||||||||||||||
グリッド | 材質: GOLD / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot for 2 seconds prior to freezing. | ||||||||||||||||||
詳細 | human type 3 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor in detergent micelles |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 7420 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 7676 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-40 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 944 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 61.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |