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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7071 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Single particle cryo-EM structure determination of the LuIII capsid protein | ||||||||||||||||||
マップデータ | The capsid structure for the oncolytic parvovirus LuIII determined by single-particle electron microscopy to 3.17 Angstrom resolution | ||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | Parvoviridae / VP2 capsid protein / VIRUS LIKE PARTICLE | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 symbiont entry into host cell via permeabilization of host membrane / microtubule-dependent intracellular transport of viral material towards nucleus / T=1 icosahedral viral capsid / viral penetration into host nucleus / host cell / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / host cell nucleus / virion attachment to host cell / structural molecule activity / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Parvovirus LuIII (ウイルス) / LuIII virus (ウイルス) | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.17 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Pittman NC / Agbandje-McKenna M | ||||||||||||||||||
資金援助 | 米国, 5件
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引用 | ジャーナル: Viruses / 年: 2017 タイトル: Atomic Resolution Structure of the Oncolytic Parvovirus LuIII by Electron Microscopy and 3D Image Reconstruction. 著者: Nikéa Pittman / Adam Misseldine / Lorena Geilen / Sujata Halder / J Kennon Smith / Justin Kurian / Paul Chipman / Mandy Janssen / Robert Mckenna / Timothy S Baker / Anthony D'Abramo / Susan ...著者: Nikéa Pittman / Adam Misseldine / Lorena Geilen / Sujata Halder / J Kennon Smith / Justin Kurian / Paul Chipman / Mandy Janssen / Robert Mckenna / Timothy S Baker / Anthony D'Abramo / Susan Cotmore / Peter Tattersall / Mavis Agbandje-McKenna / 要旨: LuIII, a protoparvovirus pathogenic to rodents, replicates in human mitotic cells, making it applicable for use to kill cancer cells. This virus group includes H-1 parvovirus (H-1PV) and minute virus ...LuIII, a protoparvovirus pathogenic to rodents, replicates in human mitotic cells, making it applicable for use to kill cancer cells. This virus group includes H-1 parvovirus (H-1PV) and minute virus of mice (MVM). However, LuIII displays enhanced oncolysis compared to H-1PV and MVM, a phenotype mapped to the major capsid viral protein 2 (VP2). This suggests that within LuIII VP2 are determinants for improved tumor lysis. To investigate this, the structure of the LuIII virus-like-particle was determined using single particle cryo-electron microscopy and image reconstruction to 3.17 Å resolution, and compared to the H-1PV and MVM structures. The LuIII VP2 structure, ordered from residue 37 to 587 (C-terminal), had the conserved VP topology and capsid morphology previously reported for other protoparvoviruses. This includes a core β-barrel and α-helix A, a depression at the icosahedral 2-fold and surrounding the 5-fold axes, and a single protrusion at the 3-fold axes. Comparative analysis identified surface loop differences among LuIII, H-1PV, and MVM at or close to the capsid 2- and 5-fold symmetry axes, and the shoulder of the 3-fold protrusions. The 2-fold differences cluster near the previously identified MVM sialic acid receptor binding pocket, and revealed potential determinants of protoparvovirus tumor tropism. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7071.map.gz | 60.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7071-v30.xml emd-7071.xml | 14.3 KB 14.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7071.png | 298.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-7071.cif.gz | 6.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7071 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7071 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7071_validation.pdf.gz | 550.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7071_full_validation.pdf.gz | 550.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7071_validation.xml.gz | 7.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_7071_validation.cif.gz | 8.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7071 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7071 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7071.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 176.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | The capsid structure for the oncolytic parvovirus LuIII determined by single-particle electron microscopy to 3.17 Angstrom resolution | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.064 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : LuIII virus
全体 | 名称: LuIII virus (ウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1: LuIII virus
超分子 | 名称: LuIII virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: Overexpression of VP2 in Sf9 cells / NCBI-ID: 35339 / 生物種: LuIII virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
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宿主 | 生物種: unidentified (未定義) |
分子量 | 理論値: 3.9 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: VP / 直径: 280.0 Å / T番号(三角分割数): 1 |
-分子 #1: Capsid protein VP2
分子 | 名称: Capsid protein VP2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 60 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Parvovirus LuIII (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 65.489953 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MSDGTDQSDS GNAVQSAARV ERAADGPGGS GGGGSGGGGV GVSTGSYDNQ THYKFLGDGW VEITAYSTRM VHLNMPKSEN YCRVRVHNT NDTGTASHMA MDDAHEQIWT PWSLVDANAW GVWFQPSDWQ YISNNMIHIN LHSLDQELFN VVIKTVTEQN T GAEAIKVY ...文字列: MSDGTDQSDS GNAVQSAARV ERAADGPGGS GGGGSGGGGV GVSTGSYDNQ THYKFLGDGW VEITAYSTRM VHLNMPKSEN YCRVRVHNT NDTGTASHMA MDDAHEQIWT PWSLVDANAW GVWFQPSDWQ YISNNMIHIN LHSLDQELFN VVIKTVTEQN T GAEAIKVY NNDLTAAMMV ALDSNNILPY TPAIDNQETL GFYPWKPTIP SPYRYYFSCD RNLSVTYKDE AGTITDTMGL AS GLNSQFF TIENTQRINL LRTGDEYATG TYYFDTEPIR LTHTWQTNRH LGQPPQITEL PSSDTANATL TARGYRSGLT QIQ GRNDVT EATRVRPAQV GFCQPHDNFE TSRAGPFKVP VVPADITQGL DHDANGSLRY TYDKQHGQSW ASQNNKDRYT WDAV NYDSG RWTNNCFIQS VPFTSEPNAN QILTNRDNLA GKTDIHFTNA FNSYGPLTAF PHPAPIYPQG QIWDKELDLE HKPRL HTQA PFVCKNNAPG QLLVRLAPNL TDQYDPNSSN LSRIVTYGTF FWKGKLTLKA KMRPNATWNP VFQISATNQG TNDYMS IER WLPTATGNIT NVPLLSRPVA RNTY UniProtKB: Capsid protein VP1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.75 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/4 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277 K | |||||||||||||||
詳細 | This sample was monodisperse. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF post-column filter |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-30 / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |