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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 6tm5 | ||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of the Anaphase-promoting complex/Cyclosome, in complex with the Nek2A substrate at 3.9 angstrom resolution | ||||||
要素 |
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キーワード | CELL CYCLE / E3 ubiquitin Ligase / Complex | ||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報negative regulation of centriole-centriole cohesion / centrosome separation / positive regulation of synapse maturation / Conversion from APC/C:Cdc20 to APC/C:Cdh1 in late anaphase / regulation of mitotic cell cycle spindle assembly checkpoint / Inactivation of APC/C via direct inhibition of the APC/C complex / APC/C:Cdc20 mediated degradation of mitotic proteins / regulation of attachment of spindle microtubules to kinetochore / anaphase-promoting complex / Aberrant regulation of mitotic exit in cancer due to RB1 defects ...negative regulation of centriole-centriole cohesion / centrosome separation / positive regulation of synapse maturation / Conversion from APC/C:Cdc20 to APC/C:Cdh1 in late anaphase / regulation of mitotic cell cycle spindle assembly checkpoint / Inactivation of APC/C via direct inhibition of the APC/C complex / APC/C:Cdc20 mediated degradation of mitotic proteins / regulation of attachment of spindle microtubules to kinetochore / anaphase-promoting complex / Aberrant regulation of mitotic exit in cancer due to RB1 defects / regulation of meiotic cell cycle / anaphase-promoting complex-dependent catabolic process / protein branched polyubiquitination / metaphase/anaphase transition of mitotic cell cycle / Phosphorylation of the APC/C / regulation of exit from mitosis / positive regulation of synaptic plasticity / regulation of mitotic centrosome separation / positive regulation of dendrite morphogenesis / positive regulation of mitotic metaphase/anaphase transition / protein K11-linked ubiquitination / regulation of mitotic metaphase/anaphase transition / ubiquitin-ubiquitin ligase activity / mitotic metaphase chromosome alignment / regulation of mitotic nuclear division / Regulation of APC/C activators between G1/S and early anaphase / positive regulation of telomere maintenance / Transcriptional Regulation by VENTX / blastocyst development / mitotic spindle assembly / cullin family protein binding / enzyme-substrate adaptor activity / positive regulation of axon extension / intercellular bridge / spindle assembly / heterochromatin / protein K48-linked ubiquitination / Loss of Nlp from mitotic centrosomes / Loss of proteins required for interphase microtubule organization from the centrosome / Recruitment of mitotic centrosome proteins and complexes / nuclear periphery / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / Anchoring of the basal body to the plasma membrane / APC/C:Cdc20 mediated degradation of Cyclin B / APC-Cdc20 mediated degradation of Nek2A / regulation of mitotic cell cycle / AURKA Activation by TPX2 / condensed nuclear chromosome / Autodegradation of Cdh1 by Cdh1:APC/C / meiotic cell cycle / APC/C:Cdc20 mediated degradation of Securin / Assembly of the pre-replicative complex / chromosome segregation / Cdc20:Phospho-APC/C mediated degradation of Cyclin A / APC/C:Cdh1 mediated degradation of Cdc20 and other APC/C:Cdh1 targeted proteins in late mitosis/early G1 / brain development / G protein-coupled receptor binding / kinetochore / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 / spindle / spindle pole / neuron projection development / ubiquitin-protein transferase activity / mitotic spindle / Separation of Sister Chromatids / Regulation of PLK1 Activity at G2/M Transition / ubiquitin protein ligase activity / nervous system development / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / mitotic cell cycle / microtubule cytoskeleton / Senescence-Associated Secretory Phenotype (SASP) / midbody / protein phosphatase binding / molecular adaptor activity / ubiquitin-dependent protein catabolic process / microtubule / cell differentiation / protein kinase activity / non-specific serine/threonine protein kinase / cilium / ciliary basal body / protein ubiquitination / negative regulation of gene expression / cell division / protein serine kinase activity / protein serine/threonine kinase activity / ubiquitin protein ligase binding / centrosome / nucleolus / protein-containing complex / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / metal ion binding / nucleus / plasma membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||
データ登録者 | Alfieri, C. / Barford, D. | ||||||
| 資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: EMBO Rep / 年: 2020タイトル: A unique binding mode of Nek2A to the APC/C allows its ubiquitination during prometaphase. 著者: Claudio Alfieri / Thomas Tischer / David Barford / ![]() 要旨: The anaphase-promoting complex (APC/C) is the key E3 ubiquitin ligase which directs mitotic progression and exit by catalysing the sequential ubiquitination of specific substrates. The activity of ...The anaphase-promoting complex (APC/C) is the key E3 ubiquitin ligase which directs mitotic progression and exit by catalysing the sequential ubiquitination of specific substrates. The activity of the APC/C in mitosis is restrained by the spindle assembly checkpoint (SAC), which coordinates chromosome segregation with the assembly of the mitotic spindle. The SAC effector is the mitotic checkpoint complex (MCC), which binds and inhibits the APC/C. It is incompletely understood how the APC/C switches substrate specificity in a cell cycle-specific manner. For instance, it is unclear how in prometaphase, when APC/C activity towards cyclin B and securin is repressed by the MCC, the kinase Nek2A is ubiquitinated. Here, we combine biochemical and structural analysis with functional studies in cells to show that Nek2A is a conformational-specific binder of the APC/C-MCC complex (APC/C ) and that, in contrast to cyclin A, Nek2A can be ubiquitinated efficiently by the APC/C in conjunction with both the E2 enzymes UbcH10 and UbcH5. We propose that these special features of Nek2A allow its prometaphase-specific ubiquitination. | ||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 6tm5.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb6tm5.ent.gz | 1.1 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 6tm5.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/tm/6tm5 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/tm/6tm5 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-Anaphase-promoting complex subunit ... , 11種, 13分子 ABDEGWILMNOXY
| #1: タンパク質 | 分子量: 216775.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC1, TSG24 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9H1A4 | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 9854.647 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC11, HSPC214 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9NYG5 | ||||||||||||
| #4: タンパク質 | 分子量: 14286.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC15, C11orf51, HSPC020 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P60006 | ||||||||||||
| #5: タンパク質 | 分子量: 11677.995 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC16, C10orf104, CENP-27 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q96DE5 | ||||||||||||
| #7: タンパク質 | 分子量: 9793.999 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CDC26, ANAPC12, C9orf17 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q8NHZ8#8: タンパク質 | | 分子量: 92219.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC4, APC4 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9UJX5#10: タンパク質 | | 分子量: 21282.143 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC10, APC10 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9UM13#11: タンパク質 | | 分子量: 8528.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC13 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9BS18#12: タンパク質 | | 分子量: 93938.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC2, APC2, KIAA1406 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9UJX6#13: タンパク質 | | 分子量: 85179.766 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC5, APC5 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9UJX4#15: タンパク質 | 分子量: 66929.367 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ANAPC7, APC7 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9UJX3 |
-Cell division cycle protein ... , 3種, 6分子 CPFHJK
| #3: タンパク質 | 分子量: 68921.031 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CDC23, ANAPC8 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9UJX2#6: タンパク質 | 分子量: 91973.125 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CDC27, ANAPC3, D0S1430E, D17S978E / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P30260#9: タンパク質 | 分子量: 71747.516 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CDC16, ANAPC6 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q13042 |
|---|
-Serine/threonine-protein kinase ... , 2種, 2分子 SQ
| #16: タンパク質 | 分子量: 51788.434 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: NEK2, NEK2A, NLK1 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)参照: UniProt: P51955, non-specific serine/threonine protein kinase |
|---|---|
| #17: タンパク質 | 分子量: 51848.551 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: NEK2, NEK2A, NLK1 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)参照: UniProt: P51955, non-specific serine/threonine protein kinase |
-タンパク質・ペプチド / 非ポリマー , 2種, 4分子 T

| #14: タンパク質・ペプチド | 分子量: 1183.313 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
|---|---|
| #18: 化合物 |
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
|---|---|
| Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Cryo-EM structure of the Anaphase-promoting complex/Cyclosome, in complex with the Nek2A substrate at 3.9 angstrom resolution タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#17 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 由来(組換発現) | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
| 緩衝液 | pH: 8 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
| 撮影 | 電子線照射量: 29 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
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解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 233840 / 対称性のタイプ: POINT |
| 精密化 | 最高解像度: 3.9 Å |
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
引用
UCSF Chimera












PDBj















Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
