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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6nog | ||||||
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タイトル | Poised-state Dot1L bound to the H2B-Ubiquitinated nucleosome | ||||||
要素 |
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キーワード | STRUCTURAL PROTEIN/TRANSFERASE/DNA / Ubiquitin / Nucleosome / Methyltransferase / STRUCTURAL PROTEIN-TRANSFERASE-DNA complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 histone H3K79 trimethyltransferase activity / [histone H3]-lysine79 N-trimethyltransferase / histone H3K79 methyltransferase activity / regulation of transcription regulatory region DNA binding / histone H3 methyltransferase activity / regulation of receptor signaling pathway via JAK-STAT / histone methyltransferase activity / heterochromatin formation / telomere organization / DNA damage checkpoint signaling ...histone H3K79 trimethyltransferase activity / [histone H3]-lysine79 N-trimethyltransferase / histone H3K79 methyltransferase activity / regulation of transcription regulatory region DNA binding / histone H3 methyltransferase activity / regulation of receptor signaling pathway via JAK-STAT / histone methyltransferase activity / heterochromatin formation / telomere organization / DNA damage checkpoint signaling / PKMTs methylate histone lysines / modification-dependent protein catabolic process / structural constituent of chromatin / protein tag activity / nucleosome / nucleosome assembly / gene expression / methylation / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / nucleic acid binding / transcription coactivator activity / protein ubiquitination / protein heterodimerization activity / intracellular membrane-bounded organelle / DNA repair / ubiquitin protein ligase binding / positive regulation of cell population proliferation / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / protein-containing complex / DNA binding / nucleoplasm / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Xenopus laevis (アフリカツメガエル) Homo sapiens (ヒト) synthetic construct (人工物) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||
データ登録者 | Worden, E.J. / Hoffmann, N.A. / Wolberger, C. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2019 タイトル: Mechanism of Cross-talk between H2B Ubiquitination and H3 Methylation by Dot1L. 著者: Evan J Worden / Niklas A Hoffmann / Chad W Hicks / Cynthia Wolberger / 要旨: Methylation of histone H3 K79 by Dot1L is a hallmark of actively transcribed genes that depends on monoubiquitination of H2B K120 (H2B-Ub) and is an example of histone modification cross-talk that is ...Methylation of histone H3 K79 by Dot1L is a hallmark of actively transcribed genes that depends on monoubiquitination of H2B K120 (H2B-Ub) and is an example of histone modification cross-talk that is conserved from yeast to humans. We report here cryo-EM structures of Dot1L bound to ubiquitinated nucleosome that show how H2B-Ub stimulates Dot1L activity and reveal a role for the histone H4 tail in positioning Dot1L. We find that contacts mediated by Dot1L and the H4 tail induce a conformational change in the globular core of histone H3 that reorients K79 from an inaccessible position, thus enabling this side chain to insert into the active site in a position primed for catalysis. Our study provides a comprehensive mechanism of cross-talk between histone ubiquitination and methylation and reveals structural plasticity in histones that makes it possible for histone-modifying enzymes to access residues within the nucleosome core. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6nog.cif.gz | 396.5 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6nog.ent.gz | 299.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6nog.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6nog_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6nog_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6nog_validation.xml.gz | 48.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6nog_validation.cif.gz | 76.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/no/6nog ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/no/6nog | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 6種, 10分子 AEBFCGDHLK
#1: タンパク質 | 分子量: 15303.930 Da / 分子数: 2 / 変異: G102A / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) プラスミド: pET3a / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P84233 #2: タンパク質 | 分子量: 11263.231 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) プラスミド: pET3a / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P62799 #3: タンパク質 | 分子量: 13978.241 Da / 分子数: 2 / 変異: G99R, A123S / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) プラスミド: pET3a / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P06897 #4: タンパク質 | 分子量: 13498.715 Da / 分子数: 2 / 変異: S32T, K120C / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) プラスミド: pET3a / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02281 #5: タンパク質 | | 分子量: 9036.393 Da / 分子数: 1 / 変異: G76C / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: UBB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: J3QS39 #6: タンパク質 | | 分子量: 47432.012 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: DOT1L, KIAA1814, KMT4 / プラスミド: pET32a / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8TEK3, histone-lysine N-methyltransferase |
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-601 DNA Strand ... , 2種, 2分子 IJ
#7: DNA鎖 | 分子量: 44825.559 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / プラスミド: pST55-16x601 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) |
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#8: DNA鎖 | 分子量: 45305.852 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / プラスミド: pST55-16x601 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 | 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 詳細: Solutions were prepared on the day of freezing and filtered though a 0.2 um filter prior to use. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.75 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Crosslinked with glutaraldehyde | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-2/2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: Blot once for 3.5 seconds before freezing |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 9 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2267 / 詳細: 3 exposures per hole |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 578660 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 108658 / クラス平均像の数: 2 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
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