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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6.0E+15 | ||||||
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タイトル | Handover mechanism of the growing pilus by the bacterial outer membrane usher FimD | ||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / pili / chaperone / usher | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 fimbrial usher porin activity / pilus assembly / pilus tip / mechanosensory behavior / cell adhesion involved in single-species biofilm formation / pilus / cell-substrate adhesion / D-mannose binding / host cell membrane / chaperone-mediated protein folding ...fimbrial usher porin activity / pilus assembly / pilus tip / mechanosensory behavior / cell adhesion involved in single-species biofilm formation / pilus / cell-substrate adhesion / D-mannose binding / host cell membrane / chaperone-mediated protein folding / protein folding chaperone / cell outer membrane / cell wall organization / outer membrane-bounded periplasmic space / cell adhesion 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.1 Å | ||||||
データ登録者 | Du, M. / Yuan, Z. / Yu, H. / Henderson, N. / Sarowar, S. / Zhao, G. / Werneburg, G.T. / Thanassi, D.G. / Li, H. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2018 タイトル: Handover mechanism of the growing pilus by the bacterial outer-membrane usher FimD. 著者: Minge Du / Zuanning Yuan / Hongjun Yu / Nadine Henderson / Samema Sarowar / Gongpu Zhao / Glenn T Werneburg / David G Thanassi / Huilin Li / 要旨: Pathogenic bacteria such as Escherichia coli assemble surface structures termed pili, or fimbriae, to mediate binding to host-cell receptors. Type 1 pili are assembled via the conserved chaperone- ...Pathogenic bacteria such as Escherichia coli assemble surface structures termed pili, or fimbriae, to mediate binding to host-cell receptors. Type 1 pili are assembled via the conserved chaperone-usher pathway. The outer-membrane usher FimD recruits pilus subunits bound by the chaperone FimC via the periplasmic N-terminal domain of the usher. Subunit translocation through the β-barrel channel of the usher occurs at the two C-terminal domains (which we label CTD1 and CTD2) of this protein. How the chaperone-subunit complex bound to the N-terminal domain is handed over to the C-terminal domains, as well as the timing of subunit polymerization into the growing pilus, have previously been unclear. Here we use cryo-electron microscopy to capture a pilus assembly intermediate (FimD-FimC-FimF-FimG-FimH) in a conformation in which FimD is in the process of handing over the chaperone-bound end of the growing pilus to the C-terminal domains. In this structure, FimF has already polymerized with FimG, and the N-terminal domain of FimD swings over to bind CTD2; the N-terminal domain maintains contact with FimC-FimF, while at the same time permitting access to the C-terminal domains. FimD has an intrinsically disordered N-terminal tail that precedes the N-terminal domain. This N-terminal tail folds into a helical motif upon recruiting the FimC-subunit complex, but reorganizes into a loop to bind CTD2 during handover. Because both the N-terminal and C-terminal domains of FimD are bound to the end of the growing pilus, the structure further suggests a mechanism for stabilizing the assembly intermediate to prevent the pilus fibre diffusing away during the incorporation of thousands of subunits. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6e15.cif.gz | 275.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6e15.ent.gz | 222 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6e15.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6e15_validation.pdf.gz | 695.8 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6e15_full_validation.pdf.gz | 734.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6e15_validation.xml.gz | 49.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6e15_validation.cif.gz | 75.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/e1/6e15 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/e1/6e15 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 26716.869 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: fimC, b4316, JW4279 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P31697 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 96705.109 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) 遺伝子: fimD_3, APZ14_00735, AW106_26365, COD30_02575, CXB56_24500, ERS085374_04437, ERS150876_04614, FORC28_5312 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0F3W955, UniProt: P30130*PLUS |
#3: タンパク質 | 分子量: 16379.371 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: fimF, b4318, JW4281 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P08189 |
#4: タンパク質 | 分子量: 16190.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: fimG, b4319, JW4282 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P08190 |
#5: タンパク質 | 分子量: 31488.260 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: fimH, b4320, JW4283 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P08191 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: FimDCFGH tip complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.18 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.12_2829: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 5.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 166913 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 6.2 Å | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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