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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6avb | ||||||
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タイトル | CryoEM structure of Mical Oxidized Actin (Class 1) | ||||||
要素 | Actin, alpha skeletal muscle | ||||||
キーワード | STRUCTURAL PROTEIN / F-Actin / Mical / cytoskeleton / helix | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 cytoskeletal motor activator activity / tropomyosin binding / mesenchyme migration / troponin I binding / myosin heavy chain binding / filamentous actin / actin filament bundle / skeletal muscle thin filament assembly / striated muscle thin filament / actin filament bundle assembly ...cytoskeletal motor activator activity / tropomyosin binding / mesenchyme migration / troponin I binding / myosin heavy chain binding / filamentous actin / actin filament bundle / skeletal muscle thin filament assembly / striated muscle thin filament / actin filament bundle assembly / skeletal muscle myofibril / actin monomer binding / skeletal muscle fiber development / stress fiber / titin binding / actin filament polymerization / filopodium / actin filament / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / calcium-dependent protein binding / lamellipodium / cell body / hydrolase activity / protein domain specific binding / calcium ion binding / positive regulation of gene expression / magnesium ion binding / ATP binding / identical protein binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Oryctolagus cuniculus (ウサギ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||
データ登録者 | Grintsevich, E.E. / Ge, P. / Sawaya, M.R. / Yesilyurt, H.G. / Terman, J.R. / Zhou, Z.H. / Reisler, E. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2017 タイトル: Catastrophic disassembly of actin filaments via Mical-mediated oxidation. 著者: Elena E Grintsevich / Peng Ge / Michael R Sawaya / Hunkar Gizem Yesilyurt / Jonathan R Terman / Z Hong Zhou / Emil Reisler / 要旨: Actin filament assembly and disassembly are vital for cell functions. MICAL Redox enzymes are important post-translational effectors of actin that stereo-specifically oxidize actin's M44 and M47 ...Actin filament assembly and disassembly are vital for cell functions. MICAL Redox enzymes are important post-translational effectors of actin that stereo-specifically oxidize actin's M44 and M47 residues to induce cellular F-actin disassembly. Here we show that Mical-oxidized (Mox) actin can undergo extremely fast (84 subunits/s) disassembly, which depends on F-actin's nucleotide-bound state. Using near-atomic resolution cryoEM reconstruction and single filament TIRF microscopy we identify two dynamic and structural states of Mox-actin. Modeling actin's D-loop region based on our 3.9 Å cryoEM reconstruction suggests that oxidation by Mical reorients the side chain of M44 and induces a new intermolecular interaction of actin residue M47 (M47-O-T351). Site-directed mutagenesis reveals that this interaction promotes Mox-actin instability. Moreover, we find that Mical oxidation of actin allows for cofilin-mediated severing even in the presence of inorganic phosphate. Thus, in conjunction with cofilin, Mical oxidation of actin promotes F-actin disassembly independent of the nucleotide-bound state. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6avb.cif.gz | 220.4 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6avb.ent.gz | 181.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6avb.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6avb_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6avb_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6avb_validation.xml.gz | 48.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6avb_validation.cif.gz | 68.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/av/6avb ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/av/6avb | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 42141.973 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / 参照: UniProt: P68135 #2: 化合物 | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: HELICAL ARRAY / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Filamentous Actin Oxidized by Mical at M44 and M47 / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Oryctolagus cuniculus (ウサギ) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 295 K / 詳細: Blot Force 1, Blot time 4s |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: Gatan Bio Quantum |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 50 / 利用したフレーム数/画像: 4-20 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.10.1_2155: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
らせん対称 | 回転角度/サブユニット: -166.66 ° / 軸方向距離/サブユニット: 28.029 Å / らせん対称軸の対称性: C1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 102700 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: HELICAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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