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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5673 | |||||||||
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タイトル | Electron cryo-microscopy of enterovirus 71 complexed with a Fab fragment | |||||||||
マップデータ | Asymmetric reconstruction of ev71-Fab complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | EV71 / enterovirus / HFMD / neutralizing antibody / Fab / cryoEM / strain-specific eptitope / VP1-145 | |||||||||
生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) / Human enterovirus 71 (エンテロウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 23.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Lee H / Cifuente JO / Ashley RE / Conway JF / Makhov AM / Tano Y / Shimizu H / Nishimura Y / Hafenstein S | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2013 タイトル: A strain-specific epitope of enterovirus 71 identified by cryo-electron microscopy of the complex with fab from neutralizing antibody. 著者: Hyunwook Lee / Javier O Cifuente / Robert E Ashley / James F Conway / Alexander M Makhov / Yoshio Tano / Hiroyuki Shimizu / Yorihiro Nishimura / Susan Hafenstein / 要旨: Enterovirus 71 (EV71) is a picornavirus that causes outbreaks of hand, foot, and mouth disease (HFMD), primarily in the Asia-Pacific area. Unlike coxsackievirus A16, which also causes HFMD, EV71 ...Enterovirus 71 (EV71) is a picornavirus that causes outbreaks of hand, foot, and mouth disease (HFMD), primarily in the Asia-Pacific area. Unlike coxsackievirus A16, which also causes HFMD, EV71 induces severe neuropathology leading to high fatalities, especially among children under the age of 6 years. Currently, no established vaccines or treatments are available against EV71 infection. The monoclonal antibody MA28-7 neutralizes only specific strains of EV71 that have a conserved glycine at amino acid VP1-145, a surface-exposed residue that maps to the 5-fold vertex and that has been implicated in receptor binding. The cryo-electron microscopy structure of a complex between EV71 and the Fab fragment of MA28-7 shows that only one Fab fragment occupies each 5-fold vertex. A positively charged patch, which has also been implicated in receptor binding, lies within the Fab footprint. We identify the strain-specific epitope of EV71 and discuss the possible neutralization mechanisms of the antibody. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5673.map.gz | 78.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5673-v30.xml emd-5673.xml | 12.2 KB 12.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5673_1.jpg | 96.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5673 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5673 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5673_validation.pdf.gz | 317.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5673_full_validation.pdf.gz | 317.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5673_validation.xml.gz | 8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5673 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5673 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5673.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 412 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Asymmetric reconstruction of ev71-Fab complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.23 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Enterovirus 71 complexed with Fab Fragment of MA28-7 neutralizing...
全体 | 名称: Enterovirus 71 complexed with Fab Fragment of MA28-7 neutralizing antibody |
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要素 |
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-超分子 #1000: Enterovirus 71 complexed with Fab Fragment of MA28-7 neutralizing...
超分子 | 名称: Enterovirus 71 complexed with Fab Fragment of MA28-7 neutralizing antibody タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 8.05 MDa |
-超分子 #1: Human enterovirus 71
超分子 | 名称: Human enterovirus 71 / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: EV71 / 詳細: Fab fragment is bound on the virus surface / NCBI-ID: 39054 / 生物種: Human enterovirus 71 / Sci species strain: 1095/Shiga / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No / Syn species name: EV71 |
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宿主 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: VERTEBRATES |
分子量 | 理論値: 8 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: VP1-4 / 直径: 300 Å / T番号(三角分割数): 1 |
-分子 #1: MA28-7 neutralizing antibody Fab fragment
分子 | 名称: MA28-7 neutralizing antibody Fab fragment / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) / 株: BALB/c / 別称: mouse / 細胞: hybridomas fused with myeloma cells |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.0 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 10 mM Tris, 200 mM NaCl, 50 mM MgCl2 |
グリッド | 詳細: glow-discharged holey carbon Quantifoil electron microscopy grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE MIXTURE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 76 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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温度 | 平均: 95 K |
日付 | 2011年2月2日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM デジタル化 - スキャナー: NIKON SUPER COOLSCAN 9000 実像数: 45 / 平均電子線量: 15 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 48425 / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 6.12 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.9 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Selected particles were low-pass filtered at 10 Angstrom. Asymmetric reconstruction was performed with breaksym option in EMAN2. |
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CTF補正 | 詳細: Each image |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 23.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2 詳細: The breaksym option in EMAN2 was used to search for the icosahedrally-related orientations. 使用した粒子像数: 27026 |
最終 2次元分類 | クラス数: 2300 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - #0 - Chain ID: H / Chain - #1 - Chain ID: L |
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ソフトウェア | 名称: Chimera |
詳細 | The Fab structure was fitted manually, then refined in Chimera. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: correlation coefficient |
得られたモデル | PDB-3j3z: |