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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4uok | ||||||
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タイトル | Electron Cryo-microscopy of Venezuelan Equine Encephalitis Virus TC-83 in complex with neutralizing antibody Fab 3B4C-4 | ||||||
要素 |
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キーワード | IMMUNE SYSTEM / VIRAL PROTEIN / ALPHAVIRUS / VENEZUELAN / ANTIBODY NEUTRALIZATION / FAB | ||||||
生物種 | HOMO SAPIENS (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 18 Å | ||||||
データ登録者 | Porta, J. / Jose, J. / Roehrig, J.T. / Blair, C.D. / Kuhn, R.J. / Rossmann, M.G. | ||||||
引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2014 タイトル: Locking and blocking the viral landscape of an alphavirus with neutralizing antibodies. 著者: Jason Porta / Joyce Jose / John T Roehrig / Carol D Blair / Richard J Kuhn / Michael G Rossmann / 要旨: Alphaviruses are serious, sometimes lethal human pathogens that belong to the family Togaviridae. The structures of human Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV), an alphavirus, in complex with ...Alphaviruses are serious, sometimes lethal human pathogens that belong to the family Togaviridae. The structures of human Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV), an alphavirus, in complex with two strongly neutralizing antibody Fab fragments (F5 and 3B4C-4) have been determined using a combination of cryo-electron microscopy and homology modeling. We characterize these monoclonal antibody Fab fragments, which are known to abrogate VEEV infectivity by binding to the E2 (envelope) surface glycoprotein. Both of these antibody Fab fragments cross-link the surface E2 glycoproteins and therefore probably inhibit infectivity by blocking the conformational changes that are required for making the virus fusogenic. The F5 Fab fragment cross-links E2 proteins within one trimeric spike, whereas the 3B4C-4 Fab fragment cross-links E2 proteins from neighboring spikes. Furthermore, F5 probably blocks the receptor-binding site, whereas 3B4C-4 sterically hinders the exposure of the fusion loop at the end of the E2 B-domain. IMPORTANCE: Alphaviral infections are transmitted mainly by mosquitoes. Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV) is an alphavirus with a wide distribution across the globe. No effective vaccines ...IMPORTANCE: Alphaviral infections are transmitted mainly by mosquitoes. Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV) is an alphavirus with a wide distribution across the globe. No effective vaccines exist for alphaviral infections. Therefore, a better understanding of VEEV and its associated neutralizing antibodies will help with the development of effective drugs and vaccines. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 4uok.cif.gz | 82.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4uok.ent.gz | 64.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 4uok.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 4uok_validation.pdf.gz | 824.5 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4uok_full_validation.pdf.gz | 843.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | 4uok_validation.xml.gz | 22.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4uok_validation.cif.gz | 31.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/uo/4uok ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/uo/4uok | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: 抗体 | 分子量: 23406.305 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) HOMO SAPIENS (ヒト) 解説: HUMANIZED FABS USING COMBINATORIAL ANTIBODY LIBRARIES AND PHAGE DISPLAY TECHNOLOGY 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): TOP10F |
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#2: 抗体 | 分子量: 23650.797 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) HOMO SAPIENS (ヒト) 解説: HUMANIZED FABS USING COMBINATORIAL ANTIBODY LIBRARIES AND PHAGE DISPLAY TECHNOLOGY 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): TOP10F |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: VENEZUELAN EQUINE ENCEPHALITIS VIRUS STRAIN TC-83 / タイプ: VIRUS |
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緩衝液 | 名称: 0.5 M NACL, 10 MM TRIS PH 7.6, 5 MM EDTA / pH: 7.6 / 詳細: 0.5 M NACL, 10 MM TRIS PH 7.6, 5 MM EDTA |
試料 | 濃度: 1.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 詳細: LIQUID ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2012年10月14日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 59000 X / 倍率(補正後): 60521 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 温度: 100 K |
撮影 | 電子線照射量: 24 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
画像スキャン | デジタル画像の数: 104 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: EACH IMAGE | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: COMMON LINES / 解像度: 18 Å / 粒子像の数: 1120 / ピクセルサイズ(公称値): 1.07 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.11 Å 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-2655. (DEPOSITION ID: 12522). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL / 詳細: REFINEMENT PROTOCOL--HOMOLOGY | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 18 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 18 Å
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