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- EMDB-4610: CryoEM reconstructuion of Cowpea Mosaic Virus (CPMV) bound to an ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-4610
タイトルCryoEM reconstructuion of Cowpea Mosaic Virus (CPMV) bound to an Affimer reagent
マップデータpostprocessed map of cryoEM map of Cowpea Mosaic virus bound to an Affimer protein
試料
  • 複合体: Cowpea mosaic virus
    • 複合体: Affimer
      • タンパク質・ペプチド: Affimer binding protein
    • ウイルス: Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)
      • タンパク質・ペプチド: RNA2 polyprotein
      • タンパク質・ペプチド: Cowpea mosaic virus large subunit
キーワードVIRUS (ウイルス) / CPMV / COMOVIRIDAE / PICORNAVIRALES (ピコルナウイルス目) / AFFIMEr REAGENT / antibody-like (抗体)
機能・相同性
機能・相同性情報


transport of virus in host, cell to cell / host cell plasmodesma / T=3 icosahedral viral capsid / virus-mediated perturbation of host defense response / host cell nucleus / GTP binding / structural molecule activity / DNA binding / RNA binding
類似検索 - 分子機能
Large coat protein / RNA2 polyprotein / Large coat protein / Small coat protein / Viral coat protein subunit
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種synthetic construct (人工物) / Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å
データ登録者Hesketh EL / Tiede C
資金援助 英国, 3件
OrganizationGrant number国
Biotechnology and Biological Sciences Research CouncilBB/L021250/1 英国
Biotechnology and Biological Sciences Research CouncilBB/R00160X/1 英国
Wellcome Trust090932/Z/09/Z 英国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2015
タイトル: Mechanisms of assembly and genome packaging in an RNA virus revealed by high-resolution cryo-EM.
著者: Emma L Hesketh / Yulia Meshcheriakova / Kyle C Dent / Pooja Saxena / Rebecca F Thompson / Joseph J Cockburn / George P Lomonossoff / Neil A Ranson /
要旨: Cowpea mosaic virus is a plant-infecting member of the Picornavirales and is of major interest in the development of biotechnology applications. Despite the availability of >100 crystal structures of ...Cowpea mosaic virus is a plant-infecting member of the Picornavirales and is of major interest in the development of biotechnology applications. Despite the availability of >100 crystal structures of Picornavirales capsids, relatively little is known about the mechanisms of capsid assembly and genome encapsidation. Here we have determined cryo-electron microscopy reconstructions for the wild-type virus and an empty virus-like particle, to 3.4 Å and 3.0 Å resolution, respectively, and built de novo atomic models of their capsids. These new structures reveal the C-terminal region of the small coat protein subunit, which is essential for virus assembly and which was missing from previously determined crystal structures, as well as residues that bind to the viral genome. These observations allow us to develop a new model for genome encapsidation and capsid assembly.
履歴
登録2019年2月13日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年10月2日-
マップ公開2019年12月18日-
更新2024年5月15日-
現状2024年5月15日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0481
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0481
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6qoz
  • 表面レベル: 0.0481
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-6qoz
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_4610.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_4610.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈postprocessed map of cryoEM map of Cowpea Mosaic virus bound to an Affimer protein
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.4 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0481 / ムービー #1: 0.0481
最小 - 最大-0.109593965 - 0.27533975
平均 (標準偏差)0.0020623095 (±0.013281776)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ384384384
Spacing384384384
セルA=B=C: 537.6 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.41.41.4
M x/y/z384384384
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z537.600537.600537.600
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS384384384
D min/max/mean-0.1100.2750.002

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添付データ

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ハーフマップ: Unfiltered half map of cryoEM map of Cowpea...

ファイルemd_4610_half_map_1.map
注釈Unfiltered half map of cryoEM map of Cowpea Mosaic virus bound to an Affimer protein
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Unfiltered half map of cryoEM map of Cowpea...

ファイルemd_4610_half_map_2.map
注釈Unfiltered half map of cryoEM map of Cowpea Mosaic virus bound to an Affimer protein
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Cowpea mosaic virus

全体名称: Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)
要素
  • 複合体: Cowpea mosaic virus
    • 複合体: Affimer
      • タンパク質・ペプチド: Affimer binding protein
    • ウイルス: Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)
      • タンパク質・ペプチド: RNA2 polyprotein
      • タンパク質・ペプチド: Cowpea mosaic virus large subunit

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超分子 #1: Cowpea mosaic virus

超分子名称: Cowpea mosaic virus / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all

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超分子 #3: Affimer

超分子名称: Affimer / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3
由来(天然)生物種: synthetic construct (人工物)

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超分子 #2: Cowpea mosaic virus

超分子名称: Cowpea mosaic virus / タイプ: virus / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2 / NCBI-ID: 12264 / 生物種: Cowpea mosaic virus / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No
宿主生物種: Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)

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分子 #1: RNA2 polyprotein

分子名称: RNA2 polyprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)
株: SB
分子量理論値: 20.961564 KDa
組換発現生物種: Nicotiana benthamiana (ベンサミアナタバコ)
配列文字列: GPVCAEASDV YSPCMIASTP PAPFSDVTAV TFDLINGKIT PVGDDNWNTH IYNPPIMNVL RTAAWKSGTI HVQLNVRGAG VKRADWDGQ VFVYLRQSMN PESYDARTFV ISQPGSAMLN FSFDIIGPNS GFEFAESPWA NQTTWYLECV ATNPRQIQQF E VNMRFDPN ...文字列:
GPVCAEASDV YSPCMIASTP PAPFSDVTAV TFDLINGKIT PVGDDNWNTH IYNPPIMNVL RTAAWKSGTI HVQLNVRGAG VKRADWDGQ VFVYLRQSMN PESYDARTFV ISQPGSAMLN FSFDIIGPNS GFEFAESPWA NQTTWYLECV ATNPRQIQQF E VNMRFDPN FRVAGNILMP PFPLSTETPP L

UniProtKB: RNA2 polyprotein

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分子 #2: Cowpea mosaic virus large subunit

分子名称: Cowpea mosaic virus large subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Cowpea mosaic virus (ササゲモザイクウイルス)
株: SB
分子量理論値: 40.858434 KDa
組換発現生物種: Nicotiana benthamiana (ベンサミアナタバコ)
配列文字列: MEQNLFALSL DDTSSVRGSL LDTKFAQTRV LLSKAMAGGD VLLDEYLYDV VNGQDFRATV AFLRTHVITG KIKVTATTNI SDNSGCCLM LAINSGVRGK YSTDVYTICS QDSMTWNPGC KKNFSFTFNP NPCGDSWSAE MISRSRVRMT VICVSGWTLS P TTDVIAKL ...文字列:
MEQNLFALSL DDTSSVRGSL LDTKFAQTRV LLSKAMAGGD VLLDEYLYDV VNGQDFRATV AFLRTHVITG KIKVTATTNI SDNSGCCLM LAINSGVRGK YSTDVYTICS QDSMTWNPGC KKNFSFTFNP NPCGDSWSAE MISRSRVRMT VICVSGWTLS P TTDVIAKL DWSIVNEKCE PTIYHLADCQ NWLPLNRWMG KLTFPQGVTS EVRRMPLSIG GGAGATQAFL ANMPNSWISM WR YFRGELH FEVTKMSSPY IKATVTFLIA FGNLSDAFGF YESFPHRIVQ FAEVEEKCTL VFSQQEFVTA WSTQVNPRTT LEA DGCPYL YAIIHDSTTG TISGDFNLGV KLVGIKDFCG IGSNPGIDGS RLL

UniProtKB: RNA2 polyprotein

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分子 #3: Affimer binding protein

分子名称: Affimer binding protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: synthetic construct (人工物)
分子量理論値: 9.286674 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
ENSLEIEELA RFAVDEHNKK ENALLEFVRV VKAKEQVVAG TMYYLTLEAK DGGKKKLYEA KVWVKPWENF KELQEFKPV

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7
グリッド材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: LACEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 281 K / 装置: LEICA EM GP

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2980 / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 45.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 144258
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

3013

初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 3次元分類クラス数: 2 / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 再構成想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 15441
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain

4n6u

source_name: PDB, initial_model_type: experimental model

5a32

source_name: PDB, initial_model_type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-6qoz:
CryoEM reconstruction of Cowpea Mosaic Virus (CPMV) bound to an Affimer reagent

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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