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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3979 | |||||||||
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| タイトル | Post-catalytic P complex spliceosome with 3' splice site docked | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Spliceosome / P-complex / Exon ligation / SPLICING | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報U2-type post-spliceosomal complex / mRNA branch site recognition / spliceosomal complex disassembly / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / cellular bud site selection / pre-mRNA 3'-splice site binding / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / nuclear mRNA surveillance ...U2-type post-spliceosomal complex / mRNA branch site recognition / spliceosomal complex disassembly / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / cellular bud site selection / pre-mRNA 3'-splice site binding / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / nuclear mRNA surveillance / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pre-mRNA binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pICln-Sm protein complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / splicing factor binding / snRNP binding / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U2-type spliceosomal complex / U1 snRNP / U2 snRNP / U4 snRNP / U2-type prespliceosome / poly(U) RNA binding / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / precatalytic spliceosome / mRNA 5'-splice site recognition / mRNA 3'-splice site recognition / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / spliceosomal complex assembly / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / Prp19 complex / DNA replication origin binding / U5 snRNP / U5 snRNA binding / Dual incision in TC-NER / pre-mRNA intronic binding / DNA replication initiation / spliceosomal snRNP assembly / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / protein K63-linked ubiquitination / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / positive regulation of cell cycle / nuclear periphery / RNA splicing / positive regulation of RNA splicing / spliceosomal complex / mRNA splicing, via spliceosome / RING-type E3 ubiquitin transferase / metallopeptidase activity / ubiquitin-protein transferase activity / ubiquitin protein ligase activity / RNA helicase activity / RNA helicase / DNA repair / mRNA binding / GTPase activity / chromatin binding / chromatin / GTP binding / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / metal ion binding / identical protein binding / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Wilkinson ME / Fica SM | |||||||||
| 資金援助 | 英国, 2件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2017タイトル: Postcatalytic spliceosome structure reveals mechanism of 3'-splice site selection. 著者: Max E Wilkinson / Sebastian M Fica / Wojciech P Galej / Christine M Norman / Andrew J Newman / Kiyoshi Nagai / ![]() 要旨: Introns are removed from eukaryotic messenger RNA precursors by the spliceosome in two transesterification reactions-branching and exon ligation. The mechanism of 3'-splice site recognition during ...Introns are removed from eukaryotic messenger RNA precursors by the spliceosome in two transesterification reactions-branching and exon ligation. The mechanism of 3'-splice site recognition during exon ligation has remained unclear. Here we present the 3.7-angstrom cryo-electron microscopy structure of the yeast P-complex spliceosome immediately after exon ligation. The 3'-splice site AG dinucleotide is recognized through non-Watson-Crick pairing with the 5' splice site and the branch-point adenosine. After the branching reaction, protein factors work together to remodel the spliceosome and stabilize a conformation competent for 3'-splice site docking, thereby promoting exon ligation. The structure accounts for the strict conservation of the GU and AG dinucleotides at the 5' and 3' ends of introns and provides insight into the catalytic mechanism of exon ligation. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_3979.map.gz | 390.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-3979-v30.xml emd-3979.xml | 74.9 KB 74.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_3979_fsc.xml | 17 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_3979.png | 71 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-3979.cif.gz | 18.6 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3979 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3979 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3979.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.12 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : P complex spliceosome with 3' exon docked
+超分子 #1: P complex spliceosome with 3' exon docked
+超分子 #2: P complex spliceosome
+超分子 #3: 3' exon
+分子 #1: U2 snRNA
+分子 #2: U5 snRNA
+分子 #3: U6 snRNA
+分子 #7: Ligated exons: UBC4 mRNA
+分子 #9: Intron lariat: UBC4 RNA
+分子 #4: Pre-mRNA-splicing factor Prp8
+分子 #5: Pre-mRNA-splicing factor SNU114
+分子 #6: Pre-mRNA-splicing factor CWC16
+分子 #8: Pre-mRNA-splicing factor CWC22
+分子 #10: Pre-mRNA-splicing factor PRP46
+分子 #11: Pre-mRNA-processing protein 45
+分子 #12: Pre-mRNA-splicing factor BUD31
+分子 #13: Pre-mRNA-splicing factor CWC2
+分子 #14: Pre-mRNA-splicing factor SLT11
+分子 #15: Pre-mRNA-splicing factor CEF1
+分子 #16: Pre-mRNA-splicing factor CWC15
+分子 #17: Pre-mRNA-splicing factor CWC21
+分子 #18: Pre-mRNA-splicing factor CLF1
+分子 #19: Pre-mRNA-splicing factor SYF1
+分子 #20: Pre-mRNA-splicing factor ATP-dependent RNA helicase PRP22
+分子 #21: U2 small nuclear ribonucleoprotein A'
+分子 #22: Unassigned structure
+分子 #23: U2 small nuclear ribonucleoprotein B''
+分子 #24: Pre-mRNA-splicing factor Prp18
+分子 #25: Small nuclear ribonucleoprotein-associated protein B
+分子 #26: Pre-mRNA-splicing factor SLU7
+分子 #27: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #28: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #29: Small nuclear ribonucleoprotein F
+分子 #30: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #31: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1
+分子 #32: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2
+分子 #33: Pre-mRNA-processing factor Prp17
+分子 #34: Pre-mRNA-splicing factor SNT309
+分子 #35: Pre-mRNA-processing factor Prp19
+分子 #36: Pre-mRNA-splicing factor SYF2
+分子 #37: MAGNESIUM ION
+分子 #38: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #39: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #40: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 1.4 mg/mL | ||||||||||||
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| 緩衝液 | pH: 7.9 構成要素:
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| グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 7 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 15 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III 詳細: 3 uL sample was applied to the grid, left for 30s, then blotted for 3s and immediately plunged into liquid ethane.. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-20 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2295 / 平均露光時間: 12.0 sec. / 平均電子線量: 47.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.2 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 105000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
ムービー
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万見について



キーワード
データ登録者
英国, 2件
引用
UCSF Chimera


























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解析

