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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3602 | |||||||||
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タイトル | KaiCBA circadian clock backbone model based on a Cryo-EM density | |||||||||
マップデータ | KaiCBA circadian clock complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | AAA+-ATPase / Kinase / Circadian Clock Complex / Cyanobacteria / Fold-switch / Transferase | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 detection of redox state / : / regulation of phosphorelay signal transduction system / negative regulation of circadian rhythm / negative regulation of phosphorylation / entrainment of circadian clock / positive regulation of circadian rhythm / protein serine/threonine/tyrosine kinase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / regulation of circadian rhythm ...detection of redox state / : / regulation of phosphorelay signal transduction system / negative regulation of circadian rhythm / negative regulation of phosphorylation / entrainment of circadian clock / positive regulation of circadian rhythm / protein serine/threonine/tyrosine kinase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / regulation of circadian rhythm / circadian rhythm / non-specific serine/threonine protein kinase / protein serine kinase activity / protein serine/threonine kinase activity / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Synechococcus elongatus (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Schuller JM / Snijder J | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2017 タイトル: Structures of the cyanobacterial circadian oscillator frozen in a fully assembled state. 著者: Joost Snijder / Jan M Schuller / Anika Wiegard / Philip Lössl / Nicolas Schmelling / Ilka M Axmann / Jürgen M Plitzko / Friedrich Förster / Albert J R Heck / 要旨: Cyanobacteria have a robust circadian oscillator, known as the Kai system. Reconstituted from the purified protein components KaiC, KaiB, and KaiA, it can tick autonomously in the presence of ...Cyanobacteria have a robust circadian oscillator, known as the Kai system. Reconstituted from the purified protein components KaiC, KaiB, and KaiA, it can tick autonomously in the presence of adenosine 5'-triphosphate (ATP). The KaiC hexamers enter a natural 24-hour reaction cycle of autophosphorylation and assembly with KaiB and KaiA in numerous diverse forms. We describe the preparation of stoichiometrically well-defined assemblies of KaiCB and KaiCBA, as monitored by native mass spectrometry, allowing for a structural characterization by single-particle cryo-electron microscopy and mass spectrometry. Our data reveal details of the interactions between the Kai proteins and provide a structural basis to understand periodic assembly of the protein oscillator. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3602.map.gz | 4.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3602-v30.xml emd-3602.xml | 13.2 KB 13.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3602.png | 74.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-3602.cif.gz | 5.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3602 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3602 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3602_validation.pdf.gz | 244.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3602_full_validation.pdf.gz | 243.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3602_validation.xml.gz | 5.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3602 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3602 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3602.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 28.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | KaiCBA circadian clock complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.35 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : KaiCBA circadian clock complex
全体 | 名称: KaiCBA circadian clock complex |
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要素 |
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-超分子 #1: KaiCBA circadian clock complex
超分子 | 名称: KaiCBA circadian clock complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Synechococcus elongatus (バクテリア) |
-分子 #1: Circadian clock protein kinase KaiC
分子 | 名称: Circadian clock protein kinase KaiC / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO / EC番号: non-specific serine/threonine protein kinase |
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由来(天然) | 生物種: Synechococcus elongatus (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 58.072773 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MTSAEMTSPN NNSEHQAIAK MRTMIEGFDD ISHGGLPIGR STLVSGTSGT GKTLFSIQFL YNGIIEFDEP GVFVTFEETP QDIIKNARS FGWDLAKLVD EGKLFILDAS PDPEGQEVVG GFDLSALIER INYAIQKYRA RRVSIDSVTS VFQQYDASSV V RRELFRLV ...文字列: MTSAEMTSPN NNSEHQAIAK MRTMIEGFDD ISHGGLPIGR STLVSGTSGT GKTLFSIQFL YNGIIEFDEP GVFVTFEETP QDIIKNARS FGWDLAKLVD EGKLFILDAS PDPEGQEVVG GFDLSALIER INYAIQKYRA RRVSIDSVTS VFQQYDASSV V RRELFRLV ARLKQIGATT VMTTERIEEY GPIARYGVEE FVSDNVVILR NVLEGERRRR TLEILKLRGT SHMKGEYPFT IT DHGINIF PLGAMRLTQR SSNVRVSSGV VRLDEMCGGG FFKDSIILAT GATGTGKTLL VSRFVENACA NKERAILFAY EES RAQLLR NAYSWGMDFE EMERQNLLKI VCAYPESAGL EDHLQIIKSE INDFKPARIA IDSLSALARG VSNNAFRQFV IGVT GYAKQ EEITGLFTNT SDQFMGAHSI TDSHISTITD TIILLQYVEI RGEMSRAINV FKMRGSWHDK AIREFMISDK GPDIK DSFR NFERIISGSP TRITVDEKSE LSRIVRGVQE KGPES UniProtKB: Circadian clock oscillator protein KaiC |
-分子 #2: Circadian clock protein KaiB
分子 | 名称: Circadian clock protein KaiB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Synechococcus elongatus (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 11.450387 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSPRKTYILK LYVAGNTPNS VRALKTLKNI LEVEFQGVYA LKVIDVLKNP QLAEEDKILA TPTLAKVLPL PVRRIIGDLS DREKVLIGL DLLYGELQDS DDF UniProtKB: Circadian clock oscillator protein KaiB |
-分子 #3: Circadian clock protein KaiA
分子 | 名称: Circadian clock protein KaiA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 12 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Synechococcus elongatus (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 32.666199 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLSQIAICIW VESTAILQDC QRALSADRYQ LQVCESGEML LEYAQTHRDQ IDCLILVAAN PSFRAVVQQL CFEGVVVPAI VVGDRDSED PDEPAKEQLY HSAELHLGIH QLEQLPYQVD AALAEFLRLA PVETMADHIM LMGANHDPEL SSQQRDLAQR L QERLGYLG ...文字列: MLSQIAICIW VESTAILQDC QRALSADRYQ LQVCESGEML LEYAQTHRDQ IDCLILVAAN PSFRAVVQQL CFEGVVVPAI VVGDRDSED PDEPAKEQLY HSAELHLGIH QLEQLPYQVD AALAEFLRLA PVETMADHIM LMGANHDPEL SSQQRDLAQR L QERLGYLG VYYKRDPDRF LRNLPAYESQ KLHQAMQTSY REIVLSYFSP NSNLNQSIDN FVNMAFFADV PVTKVVEIHM EL MDEFAKK LRVEGRSEDI LLDYRLTLID VIAHLCEMYR RSIPRET UniProtKB: Circadian clock oscillator protein KaiA |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | 材質: COPPER / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均露光時間: 15.2 sec. / 平均電子線量: 45.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL In silico モデル: 3D Shape with the approximate demensions of the 2D Classes |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 32498 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-5n8y: |