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- EMDB-32258: Human MCM double hexamer bound to natural DNA duplex (polyAT/polyTA) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-32258
タイトルHuman MCM double hexamer bound to natural DNA duplex (polyAT/polyTA)
マップデータ
試料
  • 複合体: human Mini-chromosome maintenance complex
    • 複合体: DNA replication licensing factor MCM 2/3/4/5/6/7
      • タンパク質・ペプチド: x 6種
    • 複合体: DNA
      • DNA: x 2種
  • リガンド: x 4種
キーワードreplication / CELL CYCLE-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


Switching of origins to a post-replicative state / Unwinding of DNA / nuclear origin of replication recognition complex / alpha DNA polymerase:primase complex / mitotic DNA replication / CMG complex / single-stranded 3'-5' DNA helicase activity / regulation of phosphorylation / MCM complex / mitotic DNA replication initiation ...Switching of origins to a post-replicative state / Unwinding of DNA / nuclear origin of replication recognition complex / alpha DNA polymerase:primase complex / mitotic DNA replication / CMG complex / single-stranded 3'-5' DNA helicase activity / regulation of phosphorylation / MCM complex / mitotic DNA replication initiation / double-strand break repair via break-induced replication / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / single-stranded DNA helicase activity / DNA strand elongation involved in DNA replication / cochlea development / DNA unwinding involved in DNA replication / 3'-5' DNA helicase activity / DNA replication origin binding / Activation of the pre-replicative complex / DNA replication initiation / cellular response to interleukin-4 / Activation of ATR in response to replication stress / Assembly of the pre-replicative complex / Orc1 removal from chromatin / nucleosome assembly / cellular response to xenobiotic stimulus / single-stranded DNA binding / histone binding / DNA helicase / DNA replication / cell population proliferation / cell cycle / chromosome, telomeric region / centrosome / apoptotic process / DNA damage response / chromatin / perinuclear region of cytoplasm / enzyme binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / membrane / nucleus / metal ion binding / cytoplasm / cytosol
類似検索 - 分子機能
MCM4, winged helix domain / DNA replication licensing factor Mcm5 / DNA replication licensing factor Mcm3 / Mini-chromosome maintenance complex protein 4 / DNA replication licensing factor Mcm6 / DNA replication licensing factor Mcm7 / Mcm6, C-terminal winged-helix domain / MCM6 C-terminal winged-helix domain / DNA replication licensing factor Mcm2 / Mini-chromosome maintenance protein 2 ...MCM4, winged helix domain / DNA replication licensing factor Mcm5 / DNA replication licensing factor Mcm3 / Mini-chromosome maintenance complex protein 4 / DNA replication licensing factor Mcm6 / DNA replication licensing factor Mcm7 / Mcm6, C-terminal winged-helix domain / MCM6 C-terminal winged-helix domain / DNA replication licensing factor Mcm2 / Mini-chromosome maintenance protein 2 / Mini-chromosome maintenance, conserved site / MCM family signature. / MCM N-terminal domain / MCM N-terminal domain / MCM OB domain / MCM OB domain / Mini-chromosome maintenance protein / MCM, AAA-lid domain / MCM P-loop domain / MCM AAA-lid domain / MCM family domain profile. / minichromosome maintenance proteins / MCM domain / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / Nucleic acid-binding, OB-fold / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
DNA replication licensing factor MCM3 / DNA replication licensing factor MCM4 / DNA replication licensing factor MCM5 / DNA replication licensing factor MCM7 / DNA replication licensing factor MCM2 / DNA replication licensing factor MCM6
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.59 Å
データ登録者Li J / Dong J / Dang S / Zhai Y
資金援助 香港, 1件
OrganizationGrant number国
The University Grants Committee, Research Grants Council (RGC) 香港
引用ジャーナル: Cell / 年: 2023
タイトル: The human pre-replication complex is an open complex.
著者: Jian Li / Jiangqing Dong / Weitao Wang / Daqi Yu / Xinyu Fan / Yan Chit Hui / Clare S K Lee / Wai Hei Lam / Nathan Alary / Yang Yang / Yingyi Zhang / Qian Zhao / Chun-Long Chen / Bik-Kwoon ...著者: Jian Li / Jiangqing Dong / Weitao Wang / Daqi Yu / Xinyu Fan / Yan Chit Hui / Clare S K Lee / Wai Hei Lam / Nathan Alary / Yang Yang / Yingyi Zhang / Qian Zhao / Chun-Long Chen / Bik-Kwoon Tye / Shangyu Dang / Yuanliang Zhai /
要旨: In eukaryotes, DNA replication initiation requires assembly and activation of the minichromosome maintenance (MCM) 2-7 double hexamer (DH) to melt origin DNA strands. However, the mechanism for this ...In eukaryotes, DNA replication initiation requires assembly and activation of the minichromosome maintenance (MCM) 2-7 double hexamer (DH) to melt origin DNA strands. However, the mechanism for this initial melting is unknown. Here, we report a 2.59-Å cryo-electron microscopy structure of the human MCM-DH (hMCM-DH), also known as the pre-replication complex. In this structure, the hMCM-DH with a constricted central channel untwists and stretches the DNA strands such that almost a half turn of the bound duplex DNA is distorted with 1 base pair completely separated, generating an initial open structure (IOS) at the hexamer junction. Disturbing the IOS inhibits DH formation and replication initiation. Mapping of hMCM-DH footprints indicates that IOSs are distributed across the genome in large clusters aligning well with initiation zones designed for stochastic origin firing. This work unravels an intrinsic mechanism that couples DH formation with initial DNA melting to license replication initiation in human cells.
履歴
登録2021年11月21日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年2月8日-
マップ公開2023年2月8日-
更新2024年6月26日-
現状2024年6月26日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_32258.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_32258.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.06 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.5
最小 - 最大-2.1412559 - 4.637665
平均 (標準偏差)-0.00016733941 (±0.11543764)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ400400400
Spacing400400400
セルA=B=C: 423.99997 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : human Mini-chromosome maintenance complex

全体名称: human Mini-chromosome maintenance complex
要素
  • 複合体: human Mini-chromosome maintenance complex
    • 複合体: DNA replication licensing factor MCM 2/3/4/5/6/7
      • タンパク質・ペプチド: DNA replication licensing factor MCM2
      • タンパク質・ペプチド: Isoform 2 of DNA replication licensing factor MCM3
      • タンパク質・ペプチド: DNA replication licensing factor MCM4
      • タンパク質・ペプチド: DNA replication licensing factor MCM5
      • タンパク質・ペプチド: DNA replication licensing factor MCM6
      • タンパク質・ペプチド: DNA replication licensing factor MCM7
    • 複合体: DNA
      • DNA: DNA (49-MER)
      • DNA: DNA (49-MER)
  • リガンド: ZINC ION
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
  • リガンド: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE

+
超分子 #1: human Mini-chromosome maintenance complex

超分子名称: human Mini-chromosome maintenance complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#8
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 1.09 MDa

+
超分子 #2: DNA replication licensing factor MCM 2/3/4/5/6/7

超分子名称: DNA replication licensing factor MCM 2/3/4/5/6/7 / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#6
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

+
超分子 #3: DNA

超分子名称: DNA / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #7-#8

+
分子 #1: DNA replication licensing factor MCM2

分子名称: DNA replication licensing factor MCM2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 102.034102 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MAESSESFTM ASSPAQRRRG NDPLTSSPGR SSRRTDALTS SPGRDLPPFE DESEGLLGTE GPLEEEEDGE ELIGDGMERD YRAIPELDA YEAEGLALDD EDVEELTASQ REAAERAMRQ RDREAGRGLG RMRRGLLYDS DEEDEERPAR KRRQVERATE D GEEDEEMI ...文字列:
MAESSESFTM ASSPAQRRRG NDPLTSSPGR SSRRTDALTS SPGRDLPPFE DESEGLLGTE GPLEEEEDGE ELIGDGMERD YRAIPELDA YEAEGLALDD EDVEELTASQ REAAERAMRQ RDREAGRGLG RMRRGLLYDS DEEDEERPAR KRRQVERATE D GEEDEEMI ESIENLEDLK GHSVREWVSM AGPRLEIHHR FKNFLRTHVD SHGHNVFKER ISDMCKENRE SLVVNYEDLA AR EHVLAYF LPEAPAELLQ IFDEAALEVV LAMYPKYDRI TNHIHVRISH LPLVEELRSL RQLHLNQLIR TSGVVTSCTG VLP QLSMVK YNCNKCNFVL GPFCQSQNQE VKPGSCPECQ SAGPFEVNME ETIYQNYQRI RIQESPGKVA AGRLPRSKDA ILLA DLVDS CKPGDEIELT GIYHNNYDGS LNTANGFPVF ATVILANHVA KKDNKVAVGE LTDEDVKMIT SLSKDQQIGE KIFAS IAPS IYGHEDIKRG LALALFGGEP KNPGGKHKVR GDINVLLCGD PGTAKSQFLK YIEKVSSRAI FTTGQGASAV GLTAYV QRH PVSREWTLEA GALVLADRGV CLIDEFDKMN DQDRTSIHEA MEQQSISISK AGIVTSLQAR CTVIAAANPI GGRYDPS LT FSENVDLTEP IISRFDILCV VRDTVDPVQD EMLARFVVGS HVRHHPSNKE EEGLANGSAA EPAMPNTYGV EPLPQEVL K KYIIYAKERV HPKLNQMDQD KVAKMYSDLR KESMATGSIP ITVRHIESMI RMAEAHARIH LRDYVIEDDV NMAIRVMLE SFIDTQKFSV MRSMRKTFAR YLSFRRDNNE LLLFILKQLV AEQVTYQRNR FGAQQDTIEV PEKDLVDKAR QINIHNLSAF YDSELFRMN KFSHDLKRKM ILQQF

UniProtKB: DNA replication licensing factor MCM2

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分子 #2: Isoform 2 of DNA replication licensing factor MCM3

分子名称: Isoform 2 of DNA replication licensing factor MCM3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 96.04332 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MLPRSPPLPR GNLWWREEFG SFRAGVESSW EPPRDFGGGS SLAAGMAGTV VLDDVELREA QRDYLDFLDD EEDQGIYQSK VRELISDNQ YRLIVNVNDL RRKNEKRANR LLNNAFEELV AFQRALKDFV ASIDATYAKQ YEEFYVGLEG SFGSKHVSPR T LTSCFLSC ...文字列:
MLPRSPPLPR GNLWWREEFG SFRAGVESSW EPPRDFGGGS SLAAGMAGTV VLDDVELREA QRDYLDFLDD EEDQGIYQSK VRELISDNQ YRLIVNVNDL RRKNEKRANR LLNNAFEELV AFQRALKDFV ASIDATYAKQ YEEFYVGLEG SFGSKHVSPR T LTSCFLSC VVCVEGIVTK CSLVRPKVVR SVHYCPATKK TIERRYSDLT TLVAFPSSSV YPTKDEENNP LETEYGLSVY KD HQTITIQ EMPEKAPAGQ LPRSVDVILD DDLVDKAKPG DRVQVVGTYR CLPGKKGGYT SGTFRTVLIA CNVKQMSKDA QPS FSAEDI AKIKKFSKTR SKDIFDQLAK SLAPSIHGHD YVKKAILCLL LGGVERDLEN GSHIRGDINI LLIGDPSVAK SQLL RYVLC TAPRAIPTTG RGSSGVGLTA AVTTDQETGE RRLEAGAMVL ADRGVVCIDE FDKMSDMDRT AIHEVMEQGR VTIAK AGIH ARLNARCSVL AAANPVYGRY DQYKTPMENI GLQDSLLSRF DLLFIMLDQM DPEQDREISD HVLRMHRYRA PGEQDG DAM PLGSAVDILA TDDPNFSQED QQDTQIYEKH DNLLHGTKKK KEKMVSAAFM KKYIHVAKII KPVLTQESAT YIAEEYS RL RSQDSMSSDT ARTSPVTART LETLIRLATA HAKARMSKTV DLQDAEEAVE LVQYAYFKKV LEKEKKRKKR SEDESETE D EEEKSQEDQE QKRKRRKTRQ PDAKDGDSYD PYDFSDTEEE MPQVHTPKTA DSQETKESQK VELSESRLKA FKVALLDVF REAHAQSIGM NRLTESINRD SEEPFSSVEI QAALSKMQDD NQVMVSEGII FLI

UniProtKB: DNA replication licensing factor MCM3

+
分子 #3: DNA replication licensing factor MCM4

分子名称: DNA replication licensing factor MCM4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 96.684852 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MSSPASTPSR RGSRRGRATP AQTPRSEDAR SSPSQRRRGE DSTSTGELQP MPTSPGVDLQ SPAAQDVLFS SPPQMHSSAI PLDFDVSSP LTYGTPSSRV EGTPRSGVRG TPVRQRPDLG SAQKGLQVDL QSDGAAAEDI VASEQSLGQK LVIWGTDVNV A ACKENFQR ...文字列:
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UniProtKB: DNA replication licensing factor MCM4

+
分子 #4: DNA replication licensing factor MCM5

分子名称: DNA replication licensing factor MCM5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 82.406633 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MSGFDDPGIF YSDSFGGDAQ ADEGQARKSQ LQRRFKEFLR QYRVGTDRTG FTFKYRDELK RHYNLGEYWI EVEMEDLASF DEDLADYLY KQPAEHLQLL EEAAKEVADE VTRPRPSGEE VLQDIQVMLK SDASPSSIRS LKSDMMSHLV KIPGIIIAAS A VRAKATRI ...文字列:
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UniProtKB: DNA replication licensing factor MCM5

+
分子 #5: DNA replication licensing factor MCM6

分子名称: DNA replication licensing factor MCM6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 93.010273 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MDLAAAAEPG AGSQHLEVRD EVAEKCQKLF LDFLEEFQSS DGEIKYLQLA EELIRPERNT LVVSFVDLEQ FNQQLSTTIQ EEFYRVYPY LCRALKTFVK DRKEIPLAKD FYVAFQDLPT RHKIRELTSS RIGLLTRISG QVVRTHPVHP ELVSGTFLCL D CQTVIRDV ...文字列:
MDLAAAAEPG AGSQHLEVRD EVAEKCQKLF LDFLEEFQSS DGEIKYLQLA EELIRPERNT LVVSFVDLEQ FNQQLSTTIQ EEFYRVYPY LCRALKTFVK DRKEIPLAKD FYVAFQDLPT RHKIRELTSS RIGLLTRISG QVVRTHPVHP ELVSGTFLCL D CQTVIRDV EQQFKYTQPN ICRNPVCANR RRFLLDTNKS RFVDFQKVRI QETQAELPRG SIPRSLEVIL RAEAVESAQA GD KCDFTGT LIVVPDVSKL STPGARAETN SRVSGVDGYE TEGIRGLRAL GVRDLSYRLV FLACCVAPTN PRFGGKELRD EEQ TAESIK NQMTVKEWEK VFEMSQDKNL YHNLCTSLFP TIHGNDEVKR GVLLMLFGGV PKTTGEGTSL RGDINVCIVG DPST AKSQF LKHVEEFSPR AVYTSGKASS AAGLTAAVVR DEESHEFVIE AGALMLADNG VCCIDEFDKM DVRDQVAIHE AMEQQ TISI TKAGVKATLN ARTSILAAAN PISGHYDRSK SLKQNINLSA PIMSRFDLFF ILVDECNEVT DYAIARRIVD LHSRIE ESI DRVYSLDDIR RYLLFARQFK PKISKESEDF IVEQYKHLRQ RDGSGVTKSS WRITVRQLES MIRLSEAMAR MHCCDEV QP KHVKEAFRLL NKSIIRVETP DVNLDQEEEI QMEVDEGAGG INGHADSPAP VNGINGYNED INQESAPKAS LRLGFSEY C RISNLIVLHL RKVEEEEDES ALKRSELVNW YLKEIESEID SEEELINKKR IIEKVIHRLT HYDHVLIELT QAGLKGSTE GSESYEEDPY LVVNPNYLLE D

UniProtKB: DNA replication licensing factor MCM6

+
分子 #6: DNA replication licensing factor MCM7

分子名称: DNA replication licensing factor MCM7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA helicase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 81.411875 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MALKDYALEK EKVKKFLQEF YQDDELGKKQ FKYGNQLVRL AHREQVALYV DLDDVAEDDP ELVDSICENA RRYAKLFADA VQELLPQYK EREVVNKDVL DVYIEHRLMM EQRSRDPGMV RSPQNQYPAE LMRRFELYFQ GPSSNKPRVI REVRADSVGK L VTVRGIVT ...文字列:
MALKDYALEK EKVKKFLQEF YQDDELGKKQ FKYGNQLVRL AHREQVALYV DLDDVAEDDP ELVDSICENA RRYAKLFADA VQELLPQYK EREVVNKDVL DVYIEHRLMM EQRSRDPGMV RSPQNQYPAE LMRRFELYFQ GPSSNKPRVI REVRADSVGK L VTVRGIVT RVSEVKPKMV VATYTCDQCG AETYQPIQSP TFMPLIMCPS QECQTNRSGG RLYLQTRGSR FIKFQEMKMQ EH SDQVPVG NIPRSITVLV EGENTRIAQP GDHVSVTGIF LPILRTGFRQ VVQGLLSETY LEAHRIVKMN KSEDDESGAG ELT REELRQ IAEEDFYEKL AASIAPEIYG HEDVKKALLL LLVGGVDQSP RGMKIRGNIN ICLMGDPGVA KSQLLSYIDR LAPR SQYTT GRGSSGVGLT AAVLRDSVSG ELTLEGGALV LADQGVCCID EFDKMAEADR TAIHEVMEQQ TISIAKAGIL TTLNA RCSI LAAANPAYGR YNPRRSLEQN IQLPAALLSR FDLLWLIQDR PDRDNDLRLA QHITYVHQHS RQPPSQFEPL DMKLMR RYI AMCREKQPMV PESLADYITA AYVEMRREAW ASKDATYTSA RTLLAILRLS TALARLRMVD VVEKEDVNEA IRLMEMS KD SLLGDKGQTA RTQRPADVIF ATVRELVSGG RSVRFSEAEQ RCVSRGFTPA QFQAALDEYE ELNVWQVNAS RTRITFV

UniProtKB: DNA replication licensing factor MCM7

+
分子 #7: DNA (49-MER)

分子名称: DNA (49-MER) / タイプ: dna / ID: 7
詳細: Since the register of origin DNA engaged with endogenous hMCM-DHs is heterogenous, it is likely that there is a mix of purines and pyrimidines at each nucleotide position. For this reason we ...詳細: Since the register of origin DNA engaged with endogenous hMCM-DHs is heterogenous, it is likely that there is a mix of purines and pyrimidines at each nucleotide position. For this reason we could not build the origin DNA sequence with certainty. Instead, two superposed polyA:polyT and polyT:polyA duplexes, in which all atoms is set at 50 % occupancy, were modelled to surrogate for the heterogenous sequences.
コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 15.30217 KDa
配列文字列:
(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA) (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA) (DA)

+
分子 #8: DNA (49-MER)

分子名称: DNA (49-MER) / タイプ: dna / ID: 8 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 14.86049 KDa
配列文字列:
(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)

+
分子 #9: ZINC ION

分子名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 9 / コピー数: 10 / 式: ZN
分子量理論値: 65.409 Da

+
分子 #10: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 10 / コピー数: 12 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

+
分子 #11: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE

分子名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 11 / コピー数: 8 / 式: ATP
分子量理論値: 507.181 Da
Chemical component information

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM

+
分子 #12: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE

分子名称: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 12 / コピー数: 4 / 式: ADP
分子量理論値: 427.201 Da
Chemical component information

ChemComp-ADP:
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP / ADP, エネルギー貯蔵分子*YM

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実験情報

-
構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

-
試料調製

緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度式名称
100.0 mML-GluL-Glutamate
50.0 mMHEPES/KOHHEPES
8.0 mMMgCl2Magnesium chloride
1.0 mMEDTAEthylene Diamine Tetraacetic Acid
0.02 %NP-40NP-40
3.0 mMATPAdenosine Triphosphate
2.0 mMNaFSodium fluoride
1.0 mMNa3VO4Sodium vanadate
1.0 mMPMSFPhenylmethanesulfonyl fluoride
1.0 *PICProtein inhibitor cocktail

詳細: Solutions were made fresh from concentrated to avoid microbial contamination
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec.
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細This sample was monodisperse

-
電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3710 / 平均電子線量: 51.78 e/Å2
詳細: Movies are collected in movie-mode containing 40 frames.
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm / 倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

+
画像解析

粒子像選択選択した数: 808142
初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: EXACT BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.59 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v3.0.1) / 使用した粒子像数: 329847
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v3.0.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v3.0.1)
最終 3次元分類クラス数: 1

-
原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3ja8


Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-7w1y:
Human MCM double hexamer bound to natural DNA duplex (polyAT/polyTA)

+
万見について

-
お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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