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- EMDB-31386: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-31386
タイトルHolo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme
マップデータ
試料
  • 複合体: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme with substrates S1 and S2, and metal ions.
    • RNA: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S1
    • RNA: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S2
    • RNA: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme
  • リガンド: MAGNESIUM ION
キーワードRNA structure (核酸構造) / Tetrahymena ribozyme / RNA (リボ核酸)
生物種Tetrahymena thermophila (真核生物)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.05 Å
データ登録者Su Z / Zhang K
資金援助 中国, 米国, 6件
OrganizationGrant number国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)32070049 中国
National Science Foundation (NSF, China)82041016 中国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)P41GM103832 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM079429 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)P01AI120943 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)S10OD021600 米国
引用ジャーナル: Nature / 年: 2021
タイトル: Cryo-EM structures of full-length Tetrahymena ribozyme at 3.1 Å resolution.
著者: Zhaoming Su / Kaiming Zhang / Kalli Kappel / Shanshan Li / Michael Z Palo / Grigore D Pintilie / Ramya Rangan / Bingnan Luo / Yuquan Wei / Rhiju Das / Wah Chiu /
要旨: Single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) has become a standard technique for determining protein structures at atomic resolution. However, cryo-EM studies of protein-free RNA are in ...Single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) has become a standard technique for determining protein structures at atomic resolution. However, cryo-EM studies of protein-free RNA are in their early days. The Tetrahymena thermophila group I self-splicing intron was the first ribozyme to be discovered and has been a prominent model system for the study of RNA catalysis and structure-function relationships, but its full structure remains unknown. Here we report cryo-EM structures of the full-length Tetrahymena ribozyme in substrate-free and bound states at a resolution of 3.1 Å. Newly resolved peripheral regions form two coaxially stacked helices; these are interconnected by two kissing loop pseudoknots that wrap around the catalytic core and include two previously unforeseen (to our knowledge) tertiary interactions. The global architecture is nearly identical in both states; only the internal guide sequence and guanosine binding site undergo a large conformational change and a localized shift, respectively, upon binding of RNA substrates. These results provide a long-sought structural view of a paradigmatic RNA enzyme and signal a new era for the cryo-EM-based study of structure-function relationships in ribozymes.
履歴
登録2021年6月1日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年8月25日-
マップ公開2021年8月25日-
更新2024年6月12日-
現状2024年6月12日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.02
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.02
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7ez2
  • 表面レベル: 0.02
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_31386.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_31386.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.86 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.023 / ムービー #1: 0.02
最小 - 最大-0.079133704 - 0.1844443
平均 (標準偏差)0.00017411028 (±0.0044977837)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 220.16 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.860.860.86
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z220.160220.160220.160
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ384384384
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0790.1840.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme with substrates S1 and S2, an...

全体名称: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme with substrates S1 and S2, and metal ions.
要素
  • 複合体: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme with substrates S1 and S2, and metal ions.
    • RNA: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S1
    • RNA: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S2
    • RNA: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme
  • リガンド: MAGNESIUM ION

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超分子 #1: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme with substrates S1 and S2, an...

超分子名称: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme with substrates S1 and S2, and metal ions.
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3
由来(天然)生物種: Tetrahymena thermophila (真核生物)

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分子 #1: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S1

分子名称: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S1 / タイプ: rna / ID: 1 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Tetrahymena thermophila (真核生物)
分子量理論値: 2.502603 KDa
配列文字列:
UCG(SSU)AACC

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分子 #2: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S2

分子名称: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme S2 / タイプ: rna / ID: 2 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Tetrahymena thermophila (真核生物)
分子量理論値: 1.788101 KDa
配列文字列:
CCCUCU

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分子 #3: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme

分子名称: Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Tetrahymena thermophila (真核生物)
分子量理論値: 126.705711 KDa
配列文字列: GGUUUGGAGG GAAAAGUUAU CAGGCAUGCA CCUGGUAGCU AGUCUUUAAA CCAAUAGAUU GCAUCGGUUU AAAAGGCAAG ACCGUCAAA UUGCGGGAAA GGGGUCAACA GCCGUUCAGU ACCAAGUCUC AGGGGAAACU UUGAGAUGGC CUUGCAAAGG G UAUGGUAA ...文字列:
GGUUUGGAGG GAAAAGUUAU CAGGCAUGCA CCUGGUAGCU AGUCUUUAAA CCAAUAGAUU GCAUCGGUUU AAAAGGCAAG ACCGUCAAA UUGCGGGAAA GGGGUCAACA GCCGUUCAGU ACCAAGUCUC AGGGGAAACU UUGAGAUGGC CUUGCAAAGG G UAUGGUAA UAAGCUGACG GACAUGGUCC UAACCACGCA GCCAAGUCCU AAGUCAACAG AUCUUCUGUU GAUAUGGAUG CA GUUCACA GACUAAAUGU CGGUCGGGGA AGAUGUAUUC UUCUCAUAAG AUAUAGUCGG ACCUCUCCUU AAUGGGAGCU AGC GGAUGA AGUGAUGCAA CACUGGAGCC GCUGGGAACU AAUUUGUAUG CGAAAGUAUA UUGAUUAGUU UUGGAG

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分子 #4: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 31 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度3 mg/mL
緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 40 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.36 kPa
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 278 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm / 倍率（公称値）: 105000
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
温度最低: 78.2 K
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 5559 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 854763
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.05 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / 使用した粒子像数: 230386

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-7ez2:
Holo L-16 ScaI Tetrahymena ribozyme

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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