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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-26075 | ||||||||||||
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タイトル | CaKip3[2-482] - ADP-AlFx in complex with a microtubule | ||||||||||||
マップデータ | Primary map, locally refined on the central asymmetric unit | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | Kip3 / kinesin / motility / microtubule / tubulin / MOTOR PROTEIN | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of mitotic spindle elongation / tubulin-dependent ATPase activity / plus-end specific microtubule depolymerization / meiotic sister chromatid segregation / mitotic spindle astral microtubule / nuclear microtubule / mitotic spindle midzone / nuclear migration along microtubule / microtubule plus-end / Microtubule-dependent trafficking of connexons from Golgi to the plasma membrane ...regulation of mitotic spindle elongation / tubulin-dependent ATPase activity / plus-end specific microtubule depolymerization / meiotic sister chromatid segregation / mitotic spindle astral microtubule / nuclear microtubule / mitotic spindle midzone / nuclear migration along microtubule / microtubule plus-end / Microtubule-dependent trafficking of connexons from Golgi to the plasma membrane / Hedgehog 'off' state / Cilium Assembly / Intraflagellar transport / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / Carboxyterminal post-translational modifications of tubulin / RHOH GTPase cycle / Sealing of the nuclear envelope (NE) by ESCRT-III / Kinesins / PKR-mediated signaling / The role of GTSE1 in G2/M progression after G2 checkpoint / Aggrephagy / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / Mitotic Prometaphase / EML4 and NUDC in mitotic spindle formation / Separation of Sister Chromatids / plus-end-directed microtubule motor activity / mitotic spindle disassembly / RHO GTPases activate IQGAPs / RHO GTPases Activate Formins / HSP90 chaperone cycle for steroid hormone receptors (SHR) in the presence of ligand / MHC class II antigen presentation / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / microtubule depolymerization / COPI-mediated anterograde transport / kinesin complex / negative regulation of microtubule polymerization / microtubule-based movement / establishment of mitotic spindle orientation / mitotic sister chromatid segregation / mitotic spindle assembly / mitotic spindle organization / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / microtubule cytoskeleton / mitotic cell cycle / microtubule binding / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / microtubule / GTPase activity / GTP binding / ATP hydrolysis activity / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Candida albicans (酵母) / Sus scrofa (ブタ) | ||||||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.6 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Benoit MPMH / Asenjo AB / Hunter B / Allingham J / Sosa H | ||||||||||||
資金援助 | 米国, カナダ, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Kinesin-8-specific loop-2 controls the dual activities of the motor domain according to tubulin protofilament shape. 著者: Byron Hunter / Matthieu P M H Benoit / Ana B Asenjo / Caitlin Doubleday / Daria Trofimova / Corey Frazer / Irsa Shoukat / Hernando Sosa / John S Allingham / 要旨: Kinesin-8s are dual-activity motor proteins that can move processively on microtubules and depolymerize microtubule plus-ends, but their mechanism of combining these distinct activities remains ...Kinesin-8s are dual-activity motor proteins that can move processively on microtubules and depolymerize microtubule plus-ends, but their mechanism of combining these distinct activities remains unclear. We addressed this by obtaining cryo-EM structures (2.6-3.9 Å) of Candida albicans Kip3 in different catalytic states on the microtubule lattice and on a curved microtubule end mimic. We also determined a crystal structure of microtubule-unbound CaKip3-ADP (2.0 Å) and analyzed the biochemical activity of CaKip3 and kinesin-1 mutants. These data reveal that the microtubule depolymerization activity of kinesin-8 originates from conformational changes of its motor core that are amplified by dynamic contacts between its extended loop-2 and tubulin. On curved microtubule ends, loop-1 inserts into preceding motor domains, forming head-to-tail arrays of kinesin-8s that complement loop-2 contacts with curved tubulin and assist depolymerization. On straight tubulin protofilaments in the microtubule lattice, loop-2-tubulin contacts inhibit conformational changes in the motor core, but in the ADP-Pi state these contacts are relaxed, allowing neck-linker docking for motility. We propose that these tubulin shape-induced alternations between pro-microtubule-depolymerization and pro-motility kinesin states, regulated by loop-2, are the key to the dual activity of kinesin-8 motors. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_26075.map.gz | 31.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-26075-v30.xml emd-26075.xml | 24.6 KB 24.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_26075_fsc.xml | 14.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_26075.png | 150.3 KB | ||
マスクデータ | emd_26075_msk_1.map emd_26075_msk_2.map emd_26075_msk_3.map emd_26075_msk_4.map | 274.6 MB 274.6 MB 274.6 MB 274.6 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-26075.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_26075_half_map_1.map.gz emd_26075_half_map_2.map.gz | 219.7 MB 219.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26075 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26075 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_26075_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_26075_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_26075_validation.xml.gz | 22.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_26075_validation.cif.gz | 29.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26075 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26075 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7tqyMC 7lffC 7tqxC 7tqzC 7tr0C 7tr1C 7tr2C 7tr3C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_26075.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 274.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Primary map, locally refined on the central asymmetric unit | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.849 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_26075_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_26075_msk_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #3
ファイル | emd_26075_msk_3.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #4
ファイル | emd_26075_msk_4.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map from the gold Standard refinement
ファイル | emd_26075_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map from the gold Standard refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map from the gold Standard refinement
ファイル | emd_26075_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map from the gold Standard refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : CaKip3[2-482] - ADP-AlFx in complex with a microtubule
+超分子 #1: CaKip3[2-482] - ADP-AlFx in complex with a microtubule
+超分子 #2: CaKip3[2-482] - ADP-AlFx
+超分子 #3: 15R Microtubule
+分子 #1: Kinesin-like protein
+分子 #2: Tubulin alpha-1B chain
+分子 #3: Tubulin beta-2B chain
+分子 #4: ALUMINUM FLUORIDE
+分子 #5: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #6: MAGNESIUM ION
+分子 #7: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #8: GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #9: TAXOL
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6.8 構成要素:
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グリッド | モデル: UltrAuFoil R2/2 / 材質: GOLD / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING | ||||||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-40 / 平均電子線量: 63.28 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.75 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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得られたモデル | PDB-7tqy: |