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万見
- EMDB-22277: CryoEM structure of Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with F... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-22277
タイトルCryoEM structure of Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with Fab EEEV-143.
マップデータEastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP
試料
  • ウイルス: Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Togavirin
    • タンパク質・ペプチド: Togavirin
    • タンパク質・ペプチド: Togavirin
    • タンパク質・ペプチド: EEEV-143 Fab heavy chain
    • タンパク質・ペプチド: EEEV-143 Fab light chain
キーワードVLP / Fab / EEEV / VIRAL PROTEIN / Virus-Immune System complex
機能・相同性
機能・相同性情報


togavirin / T=4 icosahedral viral capsid / symbiont-mediated suppression of host gene expression / symbiont-mediated suppression of host toll-like receptor signaling pathway / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / serine-type endopeptidase activity / fusion of virus membrane with host endosome membrane / host cell nucleus / virion attachment to host cell ...togavirin / T=4 icosahedral viral capsid / symbiont-mediated suppression of host gene expression / symbiont-mediated suppression of host toll-like receptor signaling pathway / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / serine-type endopeptidase activity / fusion of virus membrane with host endosome membrane / host cell nucleus / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / structural molecule activity / virion membrane / proteolysis / RNA binding / membrane / plasma membrane / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Alphavirus E2 glycoprotein, domain B / Peptidase S3, togavirin / Alphavirus E2 glycoprotein / Alphavirus E3 spike glycoprotein / Alphavirus E1 glycoprotein / Alphavirus E2 glycoprotein, domain A / Alphavirus E2 glycoprotein, domain C / Alphavirus E2 glycoprotein / Alphavirus core protein / Alphavirus E3 glycoprotein ...Alphavirus E2 glycoprotein, domain B / Peptidase S3, togavirin / Alphavirus E2 glycoprotein / Alphavirus E3 spike glycoprotein / Alphavirus E1 glycoprotein / Alphavirus E2 glycoprotein, domain A / Alphavirus E2 glycoprotein, domain C / Alphavirus E2 glycoprotein / Alphavirus core protein / Alphavirus E3 glycoprotein / Alphavirus E1 glycoprotein / Alphavirus core protein (CP) domain profile. / Flavivirus/Alphavirus glycoprotein, immunoglobulin-like domain superfamily / Flavivirus glycoprotein, central and dimerisation domain superfamily / Flaviviral glycoprotein E, dimerisation domain / Immunoglobulin E-set / Peptidase S1, PA clan, chymotrypsin-like fold / Peptidase S1, PA clan
類似検索 - ドメイン・相同性
Structural polyprotein / Structural polyprotein
類似検索 - 構成要素
生物種Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス) / Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.5 Å
データ登録者Binshtein E / Crowe JE
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)U19 AI142790 米国
Defense Threat Reduction Agency (DTRA)HDTRA1-13-1-0034 米国
引用ジャーナル: Cell / 年: 2020
タイトル: Human Antibodies Protect against Aerosolized Eastern Equine Encephalitis Virus Infection.
著者: Lauren E Williamson / Theron Gilliland / Pramod K Yadav / Elad Binshtein / Robin Bombardi / Nurgun Kose / Rachel S Nargi / Rachel E Sutton / Clarissa L Durie / Erica Armstrong / Robert H ...著者: Lauren E Williamson / Theron Gilliland / Pramod K Yadav / Elad Binshtein / Robin Bombardi / Nurgun Kose / Rachel S Nargi / Rachel E Sutton / Clarissa L Durie / Erica Armstrong / Robert H Carnahan / Lauren M Walker / Arthur S Kim / Julie M Fox / Michael S Diamond / Melanie D Ohi / William B Klimstra / James E Crowe /
要旨: Eastern equine encephalitis virus (EEEV) is one of the most virulent viruses endemic to North America. No licensed vaccines or antiviral therapeutics are available to combat this infection, which has ...Eastern equine encephalitis virus (EEEV) is one of the most virulent viruses endemic to North America. No licensed vaccines or antiviral therapeutics are available to combat this infection, which has recently shown an increase in human cases. Here, we characterize human monoclonal antibodies (mAbs) isolated from a survivor of natural EEEV infection with potent (<20 pM) inhibitory activity of EEEV. Cryo-electron microscopy reconstructions of two highly neutralizing mAbs, EEEV-33 and EEEV-143, were solved in complex with chimeric Sindbis/EEEV virions to 7.2 Å and 8.3 Å, respectively. The mAbs recognize two distinct antigenic sites that are critical for inhibiting viral entry into cells. EEEV-33 and EEEV-143 protect against disease following stringent lethal aerosol challenge of mice with highly pathogenic EEEV. These studies provide insight into the molecular basis for the neutralizing human antibody response against EEEV and can facilitate development of vaccines and candidate antibody therapeutics.
履歴
登録2020年7月6日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年12月23日-
マップ公開2020年12月23日-
更新2024年10月30日-
現状2024年10月30日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.025
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.025
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6xob
  • 表面レベル: 0.025
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-6xob
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_22277.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_22277.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
2.22 Å/pix.
x 420 pix.
= 932.484 Å		2.22 Å/pix.
x 420 pix.
= 932.484 Å		2.22 Å/pix.
x 420 pix.
= 932.484 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.2202 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.025 / ムービー #1: 0.025
最小 - 最大-0.11853836 - 0.20142071
平均 (標準偏差)0.0011135965 (±0.011013775)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ420420420
Spacing420420420
セルA=B=C: 932.484 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.22022.22022.2202
M x/y/z420420420
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z932.484932.484932.484
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS420420420
D min/max/mean-0.1190.2010.001

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添付データ

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ハーフマップ: Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with Fab EEEV-143

ファイルemd_22277_half_map_1.map
注釈Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with Fab EEEV-143
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with Fab EEEV-143

ファイルemd_22277_half_map_2.map
注釈Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with Fab EEEV-143
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Eastern equine encephalitis virus

全体名称: Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス)
要素
  • ウイルス: Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Togavirin
    • タンパク質・ペプチド: Togavirin
    • タンパク質・ペプチド: Togavirin
    • タンパク質・ペプチド: EEEV-143 Fab heavy chain
    • タンパク質・ペプチド: EEEV-143 Fab light chain

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超分子 #1: Eastern equine encephalitis virus

超分子名称: Eastern equine encephalitis virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / NCBI-ID: 11021 / 生物種: Eastern equine encephalitis virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: Yes

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分子 #1: Togavirin

分子名称: Togavirin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: togavirin
由来(天然)生物種: Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス)
分子量理論値: 47.961215 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: YEHTAVMPNK VGIPYKALVE RPGYAPVHLQ IQLVNTRIIP STNLEYITCK YKTKVPSPVV KCCGATQCTS KPHPDYQCQV FSGVYPFMY GGAYCFCDTE NTQMSEAYVE RSEECSIDHA KAYKVHTGTV QAMVNITYGS VSWRSADVYV NGETPAKIGD A KLIIGPLS ...文字列:
YEHTAVMPNK VGIPYKALVE RPGYAPVHLQ IQLVNTRIIP STNLEYITCK YKTKVPSPVV KCCGATQCTS KPHPDYQCQV FSGVYPFMY GGAYCFCDTE NTQMSEAYVE RSEECSIDHA KAYKVHTGTV QAMVNITYGS VSWRSADVYV NGETPAKIGD A KLIIGPLS SAWSPFDNKV VVYGHEVYNY DFPEYGTGKA GSFGDLQSRT STSNDLYANT NLKLQRPQAG IVHTPFTQVP SG FERWKKD KGAPLNDVAP FGCSIALEPL RAENCAVGSI PISIDIPDAA FTRISETPTV SDLECKITEC TYAFDFGGIA TVA YKSSKA GNCPIHSPSG VAVIKENDVT LAESGSFTFH FSTANIHPAF KLQVCTSAVT CKGDCKPPKD HIVDYPAQHT ESFT SAISA TAWSWIKVLV GGTSAFIVLG LIATAVVALV LFFHRH

UniProtKB: Structural polyprotein

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分子 #2: Togavirin

分子名称: Togavirin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: togavirin
由来(天然)生物種: Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス)
分子量理論値: 47.04702 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: DLDTHFTQYK LARPYIADCP NCGHSRCDSP IAIEEVRGDA HAGVIRIQTS AMFGLKTDGV DLAYMSFMNG KTQKSIKIDN LHVRTSAPC SLVSHHGYYI LAQCPPGDTV TVGFHDGPNR HTCTVAHKVE FRPVGREKYR HPPEHGVELP CNRYTHKRAD Q GHYVEMHQ ...文字列:
DLDTHFTQYK LARPYIADCP NCGHSRCDSP IAIEEVRGDA HAGVIRIQTS AMFGLKTDGV DLAYMSFMNG KTQKSIKIDN LHVRTSAPC SLVSHHGYYI LAQCPPGDTV TVGFHDGPNR HTCTVAHKVE FRPVGREKYR HPPEHGVELP CNRYTHKRAD Q GHYVEMHQ PGLVADHSLL SIHSAKVKIT VPSGAQVKYY CKCPDVRKGI TSSDHTTTCT DVKQCRAYLI DNKKWVYNSG RL PRGEGDT FKGKLHVPFV PVKAKCIATL APEPLVEHKH RTLILHLHPD HPTLLTTRSL GSDANPTRQW IERPTTVNFT VTG EGLEYT WGNHPPKRVW AQESGEGNPH GWPHEVVVYY YNRYPLTTII GLCTCVAIIM VSCVTSVWLL CRTRNLCITP YKLA PNAQV PILLALLCCI KPTRA

UniProtKB: Structural polyprotein

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分子 #3: Togavirin

分子名称: Togavirin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: togavirin
由来(天然)生物種: Eastern equine encephalitis virus (東部ウマ脳炎ウイルス)
分子量理論値: 29.193924 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MFPYPTLNYP PMAPINPMAY RDPNPPRRRW RPFRPPLAAQ IEDLRRSIAS LTLKQRAPNP PAGPPAKRKK PAPKPKPAQA KKKRPPPPA KKQKRKPKPG KRQRMCMKLE SDKTFPIMLN GQVNGYACVV GGRVFKPLHV EGRIDNEQLA AIKLKKASIY D LEYGDVPQ ...文字列:
MFPYPTLNYP PMAPINPMAY RDPNPPRRRW RPFRPPLAAQ IEDLRRSIAS LTLKQRAPNP PAGPPAKRKK PAPKPKPAQA KKKRPPPPA KKQKRKPKPG KRQRMCMKLE SDKTFPIMLN GQVNGYACVV GGRVFKPLHV EGRIDNEQLA AIKLKKASIY D LEYGDVPQ CMKSDTLQYT SDKPPGFYNW HHGAVQYENN RFTVPRGVGG KGDSGRPILD NKGRVVAIVL GGVNEGSRTA LS VVTWNQK GVTVKDTPEG SEPW

UniProtKB: Structural polyprotein

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分子 #4: EEEV-143 Fab heavy chain

分子名称: EEEV-143 Fab heavy chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 23.251002 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS NYGIHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGRHKYI ADPVKGRFTI SRDNSKNMLY LQMNSLRTE DTAVYYCAKD TSGWYEFFDS WGQGIPVTVS SASPTSPKVF PLSLCSTQPD GNVVIACLVQ GFFPQEPLSV T WSESGQGV ...文字列:
QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS NYGIHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGRHKYI ADPVKGRFTI SRDNSKNMLY LQMNSLRTE DTAVYYCAKD TSGWYEFFDS WGQGIPVTVS SASPTSPKVF PLSLCSTQPD GNVVIACLVQ GFFPQEPLSV T WSESGQGV TARNFPPSQD ASGDLYTTSS QLTLPATQCL AGKSVTCHVK HYTNPS

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分子 #5: EEEV-143 Fab light chain

分子名称: EEEV-143 Fab light chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 23.169734 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: EIVMTQSPAT LSVSPGERAT LSCRASQSVA TNVAWYQQKP GQAPRLLIYG ASTRATGIPA RFSGSGSGTE FTLTISSLQS EDFAVYYCQ QCNDWLTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ E SVTEQDSK ...文字列:
EIVMTQSPAT LSVSPGERAT LSCRASQSVA TNVAWYQQKP GQAPRLLIYG ASTRATGIPA RFSGSGSGTE FTLTISSLQS EDFAVYYCQ QCNDWLTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ E SVTEQDSK DSTYSLSSTL TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot time 2.5s blot force 9.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4800 / 平均電子線量: 30.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm / 倍率（公称値）: 75000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 3600
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 8.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: FREALIX / 使用した粒子像数: 1300
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-6xob:
CryoEM structure of Eastern Equine Encephalitis (EEEV) VLP with Fab EEEV-143.

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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