+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-22100 | |||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Hk97 prohead during packaging (sym6) | |||||||||||||||
マップデータ | Hk97 prohead during packaging (sym6) | |||||||||||||||
試料 |
| |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 viral procapsid maturation / T=7 icosahedral viral capsid / viral capsid / endonuclease activity / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Escherichia virus HK97 (ウイルス) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 22.0 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Fung HKH / Grimes S / Huet A / Duda RLD / Chechick M / Gault J / Robinson CV / Jardine PJ / Conway JF / Baumann CG / Antson AA | |||||||||||||||
資金援助 | 英国, 米国, 4件
| |||||||||||||||
引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2022 タイトル: Structural basis of DNA packaging by a ring-type ATPase from an archetypal viral system. 著者: Herman K H Fung / Shelley Grimes / Alexis Huet / Robert L Duda / Maria Chechik / Joseph Gault / Carol V Robinson / Roger W Hendrix / Paul J Jardine / James F Conway / Christoph G Baumann / Alfred A Antson / 要旨: Many essential cellular processes rely on substrate rotation or translocation by a multi-subunit, ring-type NTPase. A large number of double-stranded DNA viruses, including tailed bacteriophages and ...Many essential cellular processes rely on substrate rotation or translocation by a multi-subunit, ring-type NTPase. A large number of double-stranded DNA viruses, including tailed bacteriophages and herpes viruses, use a homomeric ring ATPase to processively translocate viral genomic DNA into procapsids during assembly. Our current understanding of viral DNA packaging comes from three archetypal bacteriophage systems: cos, pac and phi29. Detailed mechanistic understanding exists for pac and phi29, but not for cos. Here, we reconstituted in vitro a cos packaging system based on bacteriophage HK97 and provided a detailed biochemical and structural description. We used a photobleaching-based, single-molecule assay to determine the stoichiometry of the DNA-translocating ATPase large terminase. Crystal structures of the large terminase and DNA-recruiting small terminase, a first for a biochemically defined cos system, reveal mechanistic similarities between cos and pac systems. At the same time, mutational and biochemical analyses indicate a new regulatory mechanism for ATPase multimerization and coordination in the HK97 system. This work therefore establishes a framework for studying the evolutionary relationships between ATP-dependent DNA translocation machineries in double-stranded DNA viruses. | |||||||||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_22100.map.gz | 45.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-22100-v30.xml emd-22100.xml | 12.3 KB 12.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_22100.png | 127.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22100 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22100 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_22100_validation.pdf.gz | 450.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_22100_full_validation.pdf.gz | 450.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_22100_validation.xml.gz | 7.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_22100_validation.cif.gz | 8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-22100 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-22100 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_22100.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 48.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Hk97 prohead during packaging (sym6) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.11 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Escherichia virus HK97
全体 | 名称: Escherichia virus HK97 (ウイルス) |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Escherichia virus HK97
超分子 | 名称: Escherichia virus HK97 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / NCBI-ID: 37554 / 生物種: Escherichia virus HK97 / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
---|---|
宿主 | 生物種: escher (unknown) |
分子量 | 理論値: 13 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: capsid / 直径: 350.0 Å / T番号(三角分割数): 7 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL | ||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
緩衝液 | pH: 8 構成要素:
| ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK II / 詳細: 8 sec blot. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 971 / 平均露光時間: 1.65 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 78000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
粒子像選択 | 選択した数: 866 |
---|---|
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C6 (6回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 22.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Auto3DEM / 使用した粒子像数: 866 |
初期 角度割当 | タイプ: COMMON LINE / ソフトウェア - 名称: Auto3DEM |
最終 角度割当 | タイプ: COMMON LINE |