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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-21007 | |||||||||||||||
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タイトル | Negative stain EM map of CODH/ACS in the half-extended conformation | |||||||||||||||
マップデータ | Negative stain EM map of CODH/ACS in the half-extended conformation | |||||||||||||||
試料 |
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生物種 | Moorella thermoacetica (バクテリア) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 46.7 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Cohen SE / Brignole EJ / Drennan CL | |||||||||||||||
資金援助 | 米国, 4件
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引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2021 タイトル: Negative-Stain Electron Microscopy Reveals Dramatic Structural Rearrangements in Ni-Fe-S-Dependent Carbon Monoxide Dehydrogenase/Acetyl-CoA Synthase. 著者: Steven E Cohen / Edward J Brignole / Elizabeth C Wittenborn / Mehmet Can / Samuel Thompson / Stephen W Ragsdale / Catherine L Drennan / 要旨: The Ni-Fe-S-containing A-cluster of acetyl-coenzyme A (CoA) synthase (ACS) assembles acetyl-CoA from carbon monoxide (CO), a methyl group (CH), and CoA. To accomplish this feat, ACS must bind CoA and ...The Ni-Fe-S-containing A-cluster of acetyl-coenzyme A (CoA) synthase (ACS) assembles acetyl-CoA from carbon monoxide (CO), a methyl group (CH), and CoA. To accomplish this feat, ACS must bind CoA and interact with two other proteins that contribute the CO and CH, respectively: CO dehydrogenase (CODH) and corrinoid Fe-S protein (CFeSP). Previous structural data show that, in the model acetogen Moorella thermoacetica, domain 1 of ACS binds to CODH such that a 70-Å-long internal channel is created that allows CO to travel from CODH to the A-cluster. The A-cluster is largely buried and is inaccessible to CFeSP for methylation. Here we use electron microscopy to capture multiple snapshots of ACS that reveal previously uncharacterized domain motion, forming extended and hyperextended structural states. In these structural states, the A-cluster is accessible for methylation by CFeSP. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_21007.map.gz | 937.4 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-21007-v30.xml emd-21007.xml | 15.3 KB 15.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_21007_fsc.xml | 1.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_21007.png | 29.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-21007 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-21007 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_21007_validation.pdf.gz | 77.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_21007_full_validation.pdf.gz | 76.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_21007_validation.xml.gz | 495 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-21007 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-21007 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_21007.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Negative stain EM map of CODH/ACS in the half-extended conformation | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 7.16 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : carbon monoxide dheydrogenase/acetyl-CoA synthase tetramer
全体 | 名称: carbon monoxide dheydrogenase/acetyl-CoA synthase tetramer |
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要素 |
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-超分子 #1: carbon monoxide dheydrogenase/acetyl-CoA synthase tetramer
超分子 | 名称: carbon monoxide dheydrogenase/acetyl-CoA synthase tetramer タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Moorella thermoacetica (バクテリア) |
-分子 #1: Carbon monoxide dehydrogenase
分子 | 名称: Carbon monoxide dehydrogenase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: anaerobic carbon monoxide dehydrogenase |
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由来(天然) | 生物種: Moorella thermoacetica (バクテリア) |
配列 | 文字列: MPRFRDLSHN CRPSEAPRVM EPKNRDRTVD PAVLEMLVKS KDDKVITAFD RFVAQQPQCK IGYEGICCRF CMAGPCRIKA TDGPGSRGIC GASAWTIVAR NVGLMILTGA AAHCEHGNHI AHALVEMAEG KAPDYSVKDE AKLKEVCRRV GIEVEGKSVL ELAQEVGEKA ...文字列: MPRFRDLSHN CRPSEAPRVM EPKNRDRTVD PAVLEMLVKS KDDKVITAFD RFVAQQPQCK IGYEGICCRF CMAGPCRIKA TDGPGSRGIC GASAWTIVAR NVGLMILTGA AAHCEHGNHI AHALVEMAEG KAPDYSVKDE AKLKEVCRRV GIEVEGKSVL ELAQEVGEKA LEDFRRLKGE GEATWLMTTI NEGRKEKFRT HNVVPFGIHA SISELVNQAH MGMDNDPVNL VFSAIRVALA DYTGEHIATD FSDILFGTPQ PVVSEANMGV LDPDQVNFVL HGHNPLLSEI IVQAAREMEG EAKAAGAKGI NLVGICCTGN EVLMRQGIPL VTSFASQELA ICTGAIDAMC VDVQCIMPSI SAVAECYHTR IITTADNAKI PGAYHIDYQT ATAIESAKTA IRMAIEAFKE RKESNRPVYI PQIKNRVVAG WSLEALTKLL ATQNAQNPIR VLNQAILDGE LAGVALICGC NNLKGFQDNS HLTVMKELLK NNVFVVATGC SAQAAGKLGL LDPANVETYC GDGLKGFLKR LGEGANIEIG LPPVFHMGSC VDNSRAVDLL MAMANDLGVD TPKVPFVASA PEAMSGKAAA IGTWWVSLGV PTHVGTMPPV EGSDLIYSIL TQIASDVYGG YFIFEMDPQV AARKILDALE YRTWKLGVHK EVAERYETKL CQGY |
-分子 #2: Acetyl-CoA synthase
分子 | 名称: Acetyl-CoA synthase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: CO-methylating acetyl-CoA synthase |
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由来(天然) | 生物種: Moorella thermoacetica (バクテリア) |
配列 | 文字列: MTDFDKIFEG AIPEGKEPVA LFREVYHGAI TATSYAEILL NQAIRTYGPD HPVGYPDTAY YLPVIRCFSG EEVKKLGDLP PILNRKRAQV SPVLNFENAR LAGEATWYAA EIIEALRYLK YKPDEPLLPP PWTGFIGDPV VRRFGIKMVD WTIPGEAIIL GRAKDSKALA ...文字列: MTDFDKIFEG AIPEGKEPVA LFREVYHGAI TATSYAEILL NQAIRTYGPD HPVGYPDTAY YLPVIRCFSG EEVKKLGDLP PILNRKRAQV SPVLNFENAR LAGEATWYAA EIIEALRYLK YKPDEPLLPP PWTGFIGDPV VRRFGIKMVD WTIPGEAIIL GRAKDSKALA KIVKELMGMG FMLFICDEAV EQLLEENVKL GIDYIAYPLG NFTQIVHAAN YALRAGMMFG GVTPGAREEQ RDYQRRRIRA FVLYLGEHDM VKTAAAFGAI FTGFPVITDQ PLPEDKQIPD WFFSVEDYDK IVQIAMETRG IKLTKIKLDL PINFGPAFEG ESIRKGDMYV EMGGNRTPAF ELVRTVSESE ITDGKIEVIG PDIDQIPEGS KLPLGILVDI YGRKMQADFE GVLERRIHDF INYGEGLWHT GQRNINWLRV SKDAVAKGFR FKNYGEILVA KMKEEFPAIV DRVQVTIFTD EAKVKEYMEV AREKYKERDD RMRGLTDETV DTFYSCVLCQ SFAPNHVCIV TPERVGLCGA VSWLDAKASY EINHAGPNQP IPKEGEIDPI KGIWKSVNDY LYTASNRNLE QVCLYTLMEN PMTSCGCFEA IMAILPECNG IMITTRDHAG MTPSGMTFST LAGMIGGGTQ TPGFMGIGRT YIVSKKFISA DGGIARIVWM PKSLKDFLHD EFVRRSVEEG LGEDFIDKIA DETIGTTVDE ILPYLEEKGH PALTMDPIM |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | .017 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.6 構成要素:
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: uranyl acetate 詳細: Samples were prepared by blotting protein from EM grid using filter paper, followed by multiple rounds of staining and blotting. | |||||||||
グリッド | 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 詳細: unspecified | |||||||||
詳細 | The sample was predominantly monodisperse, as seen by negative-stain TEM. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 23.0 e/Å2 詳細: Images were collected as tilt pairs at 0 and 55 degrees |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 倍率(公称値): 62000 |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |