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- EMDB-20115: CryoEM structure of PilT4 from Geobacter metallireducens without ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-20115
タイトルCryoEM structure of PilT4 from Geobacter metallireducens without adding nucleotide: C3ocococ conformation
マップデータPilT4 from Geobacter metallireducens
試料
  • 複合体: PilT Hexamer
    • タンパク質・ペプチド: Twitching motility pilus retraction ATPase
キーワードATPase / T4P / type iv pilus / motor / MOTOR PROTEIN
機能・相同性Pilus retraction protein PilT/PilU / Bacterial type II secretion system protein E signature. / Type II/IV secretion system protein / Type II/IV secretion system protein / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase / ATP binding / metal ion binding / Twitching motility pilus retraction ATPase
機能・相同性情報
生物種Geobacter metallireducens (バクテリア) / Geobacter metallireducens (strain GS-15 / ATCC 53774 / DSM 7210) (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.0 Å
データ登録者McCallum M / Howell PL
資金援助 カナダ, 1件
OrganizationGrant number国
Canadian Institutes of Health Research (CIHR) カナダ
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019
タイトル: Multiple conformations facilitate PilT function in the type IV pilus.
著者: Matthew McCallum / Samir Benlekbir / Sheryl Nguyen / Stephanie Tammam / John L Rubinstein / Lori L Burrows / P Lynne Howell /
要旨: Type IV pilus-like systems are protein complexes that polymerize pilin fibres. They are critical for virulence in many bacterial pathogens. Pilin polymerization and depolymerization are powered by ...Type IV pilus-like systems are protein complexes that polymerize pilin fibres. They are critical for virulence in many bacterial pathogens. Pilin polymerization and depolymerization are powered by motor ATPases of the PilT/VirB11-like family. This family is thought to operate with C symmetry; however, most of these ATPases crystallize with either C or C symmetric conformations. The relevance of these conformations is unclear. Here, we determine the X-ray structures of PilT in four unique conformations and use these structures to classify the conformation of available PilT/VirB11-like family member structures. Single particle electron cryomicroscopy (cryoEM) structures of PilT reveal condition-dependent preferences for C C, and C conformations. The physiologic importance of these conformations is validated by coevolution analysis and functional studies of point mutants, identifying a rare gain-of-function mutation that favours the C conformation. With these data, we propose a comprehensive model of PilT function with broad implications for PilT/VirB11-like family members.
履歴
登録2019年4月16日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年6月5日-
マップ公開2019年11月20日-
更新2024年3月20日-
現状2024年3月20日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.26
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.26
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6olk
  • 表面レベル: 0.26
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_20115.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_20115.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈PilT4 from Geobacter metallireducens
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.06 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.26 / ムービー #1: 0.26
最小 - 最大-3.74159 - 4.3546906
平均 (標準偏差)0.004553602 (±0.104572654)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 271.36 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.061.061.06
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z271.360271.360271.360
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-3.7424.3550.005

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添付データ

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追加マップ: PilT4 from Geobacter metallireducens

ファイルemd_20115_additional.map
注釈PilT4 from Geobacter metallireducens
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : PilT Hexamer

全体名称: PilT Hexamer
要素
  • 複合体: PilT Hexamer
    • タンパク質・ペプチド: Twitching motility pilus retraction ATPase

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超分子 #1: PilT Hexamer

超分子名称: PilT Hexamer / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Geobacter metallireducens (バクテリア)

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分子 #1: Twitching motility pilus retraction ATPase

分子名称: Twitching motility pilus retraction ATPase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Geobacter metallireducens (strain GS-15 / ATCC 53774 / DSM 7210) (バクテリア)
株: GS-15 / ATCC 53774 / DSM 7210
分子量理論値: 42.883379 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MANMHQLLTE LVNRGGSDLH LTTNSPPQIR IDGKLLPLDM PPLNAVDTKQ LCYSILTEQQ KHKFEENNE LDLSFGIKGL SRFRGNVFVQ RGAVAGVFRV IPYKILSFEE LGLPPVVREL AEKPRGLVLV TGPTGSGKST T LAAIIDKI ...文字列:
MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MANMHQLLTE LVNRGGSDLH LTTNSPPQIR IDGKLLPLDM PPLNAVDTKQ LCYSILTEQQ KHKFEENNE LDLSFGIKGL SRFRGNVFVQ RGAVAGVFRV IPYKILSFEE LGLPPVVREL AEKPRGLVLV TGPTGSGKST T LAAIIDKI NTDRHEHIVT VEDPIEYLHP HKSCVVNQRE VGADTKSFKN ALKYILRQDP DVVLVGELRD LETIEAALTL AE TGHLCFA TLHTNSAVQT INRIVDVFPS YQQPQVRAQL SFVLEGVLSQ TLLPKASGTG RVLAIEVMVP NPAIRNLIRE DKI HQIYSQ MQVGQEKFGM MTMNQCLYGL LQKRHITMDV GMGRSPDPDE LKQMLTSGVR PQAPRPPMR

UniProtKB: Twitching motility pilus retraction ATPase

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.5 mg/mL
緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Homemade / 材質: GOLD
凍結凍結剤: ETHANE-PROPANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
平均電子線量: 42.7 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細Falcon 3EC
初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
PDBモデル - PDB ID:

60jy

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C3 (3回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2) / 使用した粒子像数: 94151
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

60jy


Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
詳細Initial fitting in chimera, flexible fitting in Phenix-refine
精密化プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 16.5
得られたモデル

PDB-6olk:
CryoEM structure of PilT4 from Geobacter metallireducens without adding nucleotide: C3ocococ conformation

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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