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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1933 | |||||||||
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タイトル | wt Rabbit Hemorrhagic Disease Virus (RHDV)capsid | |||||||||
マップデータ | 3D structure of wt VP1 RHDV capsid | |||||||||
試料 |
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キーワード | cage design / molecular switch / protein engineering / structural polymorphism / virus assembly | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 calicivirin / host cell endoplasmic reticulum / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / nucleoside-triphosphate phosphatase / viral capsid / RNA helicase activity / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity ...calicivirin / host cell endoplasmic reticulum / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / nucleoside-triphosphate phosphatase / viral capsid / RNA helicase activity / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / proteolysis / RNA binding / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Rabbit hemorrhagic disease virus (ウサギ出血病ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 10.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Luque D / Gonzalez JM / Gomez-Blanco J / Marabini R / Chichon J / Mena I / Angulo I / Carrascosa JL / Verdaguer N / Trus BL ...Luque D / Gonzalez JM / Gomez-Blanco J / Marabini R / Chichon J / Mena I / Angulo I / Carrascosa JL / Verdaguer N / Trus BL / Barcena J / Caston JR | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2012 タイトル: Epitope insertion at the N-terminal molecular switch of the rabbit hemorrhagic disease virus T = 3 capsid protein leads to larger T = 4 capsids. 著者: Daniel Luque / José M González / Josué Gómez-Blanco / Roberto Marabini / Javier Chichón / Ignacio Mena / Iván Angulo / José L Carrascosa / Nuria Verdaguer / Benes L Trus / Juan ...著者: Daniel Luque / José M González / Josué Gómez-Blanco / Roberto Marabini / Javier Chichón / Ignacio Mena / Iván Angulo / José L Carrascosa / Nuria Verdaguer / Benes L Trus / Juan Bárcena / José R Castón / 要旨: Viruses need only one or a few structural capsid proteins to build an infectious particle. This is possible through the extensive use of symmetry and the conformational polymorphism of the structural ...Viruses need only one or a few structural capsid proteins to build an infectious particle. This is possible through the extensive use of symmetry and the conformational polymorphism of the structural proteins. Using virus-like particles (VLP) from rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) as a model, we addressed the basis of calicivirus capsid assembly and their application in vaccine design. The RHDV capsid is based on a T=3 lattice containing 180 identical subunits (VP1). We determined the structure of RHDV VLP to 8.0-Å resolution by three-dimensional cryoelectron microscopy; in addition, we used San Miguel sea lion virus (SMSV) and feline calicivirus (FCV) capsid subunit structures to establish the backbone structure of VP1 by homology modeling and flexible docking analysis. Based on the three-domain VP1 model, several insertion mutants were designed to validate the VP1 pseudoatomic model, and foreign epitopes were placed at the N- or C-terminal end, as well as in an exposed loop on the capsid surface. We selected a set of T and B cell epitopes of various lengths derived from viral and eukaryotic origins. Structural analysis of these chimeric capsids further validates the VP1 model to design new chimeras. Whereas most insertions are well tolerated, VP1 with an FCV capsid protein-neutralizing epitope at the N terminus assembled into mixtures of T=3 and larger T=4 capsids. The calicivirus capsid protein, and perhaps that of many other viruses, thus can encode polymorphism modulators that are not anticipated from the plane sequence, with important implications for understanding virus assembly and evolution. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1933.map.gz | 37.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1933-v30.xml emd-1933.xml | 9.6 KB 9.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_1933.png | 1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1933 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1933 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1933_validation.pdf.gz | 295 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1933_full_validation.pdf.gz | 294.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1933_validation.xml.gz | 6.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1933 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1933 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1933.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 39.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 3D structure of wt VP1 RHDV capsid | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : RHDV wild type VP1 Virus Like Particle
全体 | 名称: RHDV wild type VP1 Virus Like Particle |
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要素 |
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-超分子 #1000: RHDV wild type VP1 Virus Like Particle
超分子 | 名称: RHDV wild type VP1 Virus Like Particle / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: icosahedral / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 10.8 MDa |
-超分子 #1: Rabbit hemorrhagic disease virus
超分子 | 名称: Rabbit hemorrhagic disease virus / タイプ: virus / ID: 1 / NCBI-ID: 11976 / 生物種: Rabbit hemorrhagic disease virus / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes |
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宿主 | 生物種: Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / 別称: VERTEBRATES |
分子量 | 理論値: 60 KDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 直径: 400 Å / T番号(三角分割数): 3 |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6 / 詳細: 200 mM Na2PO4, 100 mM NaCl |
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染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Samples were applied to grids, blotted and plunged into liquid ethane |
グリッド | 詳細: R 2/2 Quantifoil grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: OTHER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7 µm / 実像数: 116 / 平均電子線量: 10 e/Å2 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.26 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Phase flipping & amplitude decay |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Xmipp / 使用した粒子像数: 5011 |