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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0146 | |||||||||
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タイトル | Yeast RNA polymerase I elongation complex stalled by cyclobutane pyrimidine dimer (CPD) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA Polymerase I / UV-damage / stalling / Cyclobutane Pyrimidine Dimers (CPD) / TRANSCRIPTION | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase I preinitiation complex assembly / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / regulation of cell size / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes ...RNA polymerase I preinitiation complex assembly / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / regulation of cell size / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / RNA-templated transcription / termination of RNA polymerase III transcription / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / RNA polymerase III activity / termination of RNA polymerase I transcription / RNA Polymerase I Promoter Escape / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription by RNA polymerase I / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / Estrogen-dependent gene expression / transcription by RNA polymerase III / Dual incision in TC-NER / transcription elongation by RNA polymerase I / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I complex / RNA polymerase I activity / RNA polymerase III complex / RNA polymerase II, core complex / promoter-specific chromatin binding / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / transcription elongation by RNA polymerase II / ribonucleoside binding / DNA-directed RNA polymerase / peroxisome / ribosome biogenesis / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / protein dimerization activity / nucleolus / negative regulation of transcription by RNA polymerase II / DNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Sanz-Murillo M / Xu J | |||||||||
資金援助 | スペイン, 2件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2018 タイトル: Structural basis of RNA polymerase I stalling at UV light-induced DNA damage. 著者: Marta Sanz-Murillo / Jun Xu / Georgiy A Belogurov / Olga Calvo / David Gil-Carton / María Moreno-Morcillo / Dong Wang / Carlos Fernández-Tornero / 要旨: RNA polymerase I (Pol I) transcribes ribosomal DNA (rDNA) to produce the ribosomal RNA (rRNA) precursor, which accounts for up to 60% of the total transcriptional activity in growing cells. Pol I ...RNA polymerase I (Pol I) transcribes ribosomal DNA (rDNA) to produce the ribosomal RNA (rRNA) precursor, which accounts for up to 60% of the total transcriptional activity in growing cells. Pol I monitors rDNA integrity and influences cell survival, but little is known about how this enzyme processes UV-induced lesions. We report the electron cryomicroscopy structure of Pol I in an elongation complex containing a cyclobutane pyrimidine dimer (CPD) at a resolution of 3.6 Å. The structure shows that the lesion induces an early translocation intermediate exhibiting unique features. The bridge helix residue Arg1015 plays a major role in CPD-induced Pol I stalling, as confirmed by mutational analysis. These results, together with biochemical data presented here, reveal the molecular mechanism of Pol I stalling by CPD lesions, which is distinct from Pol II arrest by CPD lesions. Our findings open the avenue to unravel the molecular mechanisms underlying cell endurance to lesions on rDNA. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0146.map.gz | 85.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0146-v30.xml emd-0146.xml | 36.9 KB 36.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_0146.png | 48.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-0146.cif.gz | 10.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0146 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0146 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0146_validation.pdf.gz | 290.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_0146_full_validation.pdf.gz | 290 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0146_validation.xml.gz | 6.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0146 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0146 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0146.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : RNA Polymerase I stalling at DNA damage
+超分子 #1: RNA Polymerase I stalling at DNA damage
+超分子 #2: RNA Polymerase I stalling at DNA damage
+超分子 #3: RNA Polymerase I stalling at DNA damage
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA190
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA135
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerases I and III subunit RPAC1
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA14
+分子 #5: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC1
+分子 #6: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC2
+分子 #7: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA43
+分子 #8: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC3
+分子 #9: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA12
+分子 #10: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC5
+分子 #11: DNA-directed RNA polymerases I and III subunit RPAC2
+分子 #12: DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC4
+分子 #13: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA49
+分子 #14: DNA-directed RNA polymerase I subunit RPA34
+分子 #15: RNA
+分子 #16: Template DNA
+分子 #17: Non-template DNA
+分子 #18: ZINC ION
+分子 #19: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.22 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2056 / 平均電子線量: 5.25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |