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タイトルCryoEM structural exploration of catalytically active enzyme pyruvate carboxylase.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 13, Issue 1, Page 6185, Year 2022
掲載日2022年10月19日
著者Jorge Pedro López-Alonso / Melisa Lázaro / David Gil-Cartón / Philip H Choi / Alexandra Dodu / Liang Tong / Mikel Valle /
PubMed 要旨Pyruvate carboxylase (PC) is a tetrameric enzyme that contains two active sites per subunit that catalyze two consecutive reactions. A mobile domain with an attached prosthetic biotin links both ...Pyruvate carboxylase (PC) is a tetrameric enzyme that contains two active sites per subunit that catalyze two consecutive reactions. A mobile domain with an attached prosthetic biotin links both reactions, an initial biotin carboxylation and the subsequent carboxyl transfer to pyruvate substrate to produce oxaloacetate. Reaction sites are at long distance, and there are several co-factors that play as allosteric regulators. Here, using cryoEM we explore the structure of active PC tetramers focusing on active sites and on the conformational space of the oligomers. The results capture the mobile domain at both active sites and expose catalytic steps of both reactions at high resolution, allowing the identification of substrates and products. The analysis of catalytically active PC tetramers reveals the role of certain motions during enzyme functioning, and the structural changes in the presence of additional cofactors expose the mechanism for allosteric regulation.
リンクNat Commun / PubMed:36261450 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.12 - 3.29 Å
構造データ

EMDB-15028, PDB-7zyy:
Cryo-EM structure of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.12 Å

EMDB-15029, PDB-7zyz:
Cryo-EM structure of "CT oxa" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.47 Å

EMDB-15030, PDB-7zz0:
Cryo-EM structure of "CT empty" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.26 Å

EMDB-15031, PDB-7zz1:
Cryo-EM structure of "CT react" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.27 Å

EMDB-15032, PDB-7zz2:
Cryo-EM structure of "CT pyr" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.48 Å

EMDB-15033, PDB-7zz3:
Cryo-EM structure of "BC react" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.41 Å

EMDB-15034, PDB-7zz4:
Cryo-EM structure of "BC closed" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.63 Å

EMDB-15035, PDB-7zz5:
Cryo-EM structure of "BC open" conformation of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.43 Å

EMDB-15036, PDB-7zz6:
Cryo-EM structure of "CT-CT dimer" of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.15 Å

EMDB-15037, PDB-7zz8:
Cryo-EM structure of Lactococcus lactis pyruvate carboxylase with acetyl-CoA and cyclic di-AMP
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.29 Å

化合物

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-MN:
Unknown entry

ChemComp-ADP:
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP / ADP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-PYR:
PYRUVIC ACID / ピルビン酸

ChemComp-BCT:
BICARBONATE ION / 炭酸水素アニオン / pH緩衝剤*YM

ChemComp-HOH:
WATER

ChemComp-OAA:
OXALOACETATE ION

ChemComp-BTN:
BIOTIN / ビオチン

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-2BA:
(2R,3R,3aS,5R,7aR,9R,10R,10aS,12R,14aR)-2,9-bis(6-amino-9H-purin-9-yl)octahydro-2H,7H-difuro[3,2-d:3',2'-j][1,3,7,9,2,8 / c-di-AMP

由来
  • lactococcus lactis (乳酸菌)
キーワードLIGASE / Tetramer / carboxylase / biotin / inhibitor

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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