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タイトルDNA melting initiates the RAG catalytic pathway.
ジャーナル・号・ページNat Struct Mol Biol, Vol. 25, Issue 8, Page 732-742, Year 2018
掲載日2018年7月30日
著者Heng Ru / Wei Mi / Pengfei Zhang / Frederick W Alt / David G Schatz / Maofu Liao / Hao Wu /
PubMed 要旨The mechanism for initiating DNA cleavage by DDE-family enzymes, including the RAG endonuclease, which initiates V(D)J recombination, is not well understood. Here we report six cryo-EM structures of ...The mechanism for initiating DNA cleavage by DDE-family enzymes, including the RAG endonuclease, which initiates V(D)J recombination, is not well understood. Here we report six cryo-EM structures of zebrafish RAG in complex with one or two intact recombination signal sequences (RSSs), at up to 3.9-Å resolution. Unexpectedly, these structures reveal DNA melting at the heptamer of the RSSs, thus resulting in a corkscrew-like rotation of coding-flank DNA and the positioning of the scissile phosphate in the active site. Substrate binding is associated with dimer opening and a piston-like movement in RAG1, first outward to accommodate unmelted DNA and then inward to wedge melted DNA. These precleavage complexes show limited base-specific contacts of RAG at the conserved terminal CAC/GTG sequence of the heptamer, thus suggesting conservation based on a propensity to unwind. CA and TG overwhelmingly dominate terminal sequences in transposons and retrotransposons, thereby implicating a universal mechanism for DNA melting during the initiation of retroviral integration and DNA transposition.
リンクNat Struct Mol Biol / PubMed:30061602 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.0 - 5.0 Å
構造データ

EMDB-7843, PDB-6dbi:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS nicked DNA intermediates
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.4 Å

EMDB-7844, PDB-6dbj:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS nicked DNA intermediates
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-7845, PDB-6dbl:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS substrate DNAs
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.0 Å

EMDB-7846, PDB-6dbo:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS substrate DNAs
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.4 Å

EMDB-7847, PDB-6dbq:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS substrate DNAs
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.22 Å

EMDB-7848, PDB-6dbr:
Cryo-EM structure of RAG in complex with one melted RSS and one unmelted RSS
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.0 Å

EMDB-7849, PDB-6dbt:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS substrate DNAs
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.3 Å

EMDB-7850, PDB-6dbu:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS substrate DNAs
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-7851, PDB-6dbv:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS and 23-RSS substrate DNAs
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.29 Å

EMDB-7852, PDB-6dbw:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS substrate DNA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.7 Å

EMDB-7853, PDB-6dbx:
Cryo-EM structure of RAG in complex with 12-RSS substrate DNA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.2 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-CA:
Unknown entry / カルシウムジカチオン

由来
  • danio rerio (ゼブラフィッシュ)
  • escherichia coli (大腸菌)
キーワードRECOMBINATION/DNA / V(D)J recombination (V(D)J遺伝子再構成) / synaptic RAG complex / nicked RSS intermediates / paired complex / RECOMBINATION-DNA complex / RSS / RAG complex / melted DNA / Pre-cleavage complex / Pre-cleveage complex / RSS substrate DNA / Pre-cleveaage complex / Melted RSS / Unmelted RSS / unmelted DNA substrates / melted RSS substrate / singly-bound complex / unmelted RSS substrate / singly bound complex

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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