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- EMDB-16821: Cryo-EM structure of a pre-dimerized murine IL-12 complete extrac... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-16821
タイトルCryo-EM structure of a pre-dimerized murine IL-12 complete extracellular signaling complex (Class 2).
マップデータMain map: Anisotropy sharpened map of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex (Class 2), used for model refinement in Phenix. Additional map: DeepEMhancer sharpened map.
試料
  • 複合体: Murine IL-12 in complex with mIL-12Rbeta1-DAPK1 and mIL-12Rbeta2-Calmodulin.
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 subunit alpha
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 subunit beta
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 receptor subunit beta-1,Death-associated protein kinase 1
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 receptor subunit beta-2,Calmodulin-1
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
キーワードComplex / Cytokine / Receptor / SIGNALING PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


interleukin-12 beta subunit binding / Interleukin-12 signaling / Interleukin-23 signaling / interleukin-23 receptor binding / Interleukin-35 Signalling / interleukin-12 alpha subunit binding / interleukin-12 complex / interleukin-23 complex / T-helper 1 cell activation / natural killer cell activation involved in immune response ...interleukin-12 beta subunit binding / Interleukin-12 signaling / Interleukin-23 signaling / interleukin-23 receptor binding / Interleukin-35 Signalling / interleukin-12 alpha subunit binding / interleukin-12 complex / interleukin-23 complex / T-helper 1 cell activation / natural killer cell activation involved in immune response / positive regulation of natural killer cell mediated cytotoxicity directed against tumor cell target / negative regulation of vascular endothelial growth factor signaling pathway / negative regulation of blood vessel endothelial cell proliferation involved in sprouting angiogenesis / cellular response to hydroperoxide / positive regulation of T-helper 1 type immune response / regulation of response to tumor cell / positive regulation of autophagic cell death / DAPK1-calmodulin complex / positive regulation of smooth muscle cell apoptotic process / interleukin-12 receptor binding / natural killer cell activation / T-helper cell differentiation / interleukin-23 receptor complex / defense response to tumor cell / positive regulation of osteoclast differentiation / negative regulation of interleukin-17 production / Caspase activation via Dependence Receptors in the absence of ligand / positive regulation of NK T cell proliferation / interleukin-12-mediated signaling pathway / response to UV-B / regulation of NMDA receptor activity / CaM pathway / positive regulation of granulocyte macrophage colony-stimulating factor production / positive regulation of natural killer cell proliferation / Cam-PDE 1 activation / Sodium/Calcium exchangers / syntaxin-1 binding / Calmodulin induced events / positive regulation of T cell differentiation / Reduction of cytosolic Ca++ levels / CREB1 phosphorylation through the activation of CaMKII/CaMKK/CaMKIV cascasde / Activation of Ca-permeable Kainate Receptor / Loss of phosphorylation of MECP2 at T308 / cytokine receptor activity / CREB1 phosphorylation through the activation of Adenylate Cyclase / PKA activation / negative regulation of high voltage-gated calcium channel activity / calmodulin-dependent protein kinase activity / CaMK IV-mediated phosphorylation of CREB / Glycogen breakdown (glycogenolysis) / positive regulation of cyclic-nucleotide phosphodiesterase activity / organelle localization by membrane tethering / negative regulation of calcium ion export across plasma membrane / CLEC7A (Dectin-1) induces NFAT activation / regulation of cardiac muscle cell action potential / mitochondrion-endoplasmic reticulum membrane tethering / autophagosome membrane docking / Activation of RAC1 downstream of NMDARs / negative regulation of interleukin-10 production / positive regulation of ryanodine-sensitive calcium-release channel activity / cytokine binding / positive regulation of activated T cell proliferation / regulation of cell communication by electrical coupling involved in cardiac conduction / Negative regulation of NMDA receptor-mediated neuronal transmission / negative regulation of peptidyl-threonine phosphorylation / Synthesis of IP3 and IP4 in the cytosol / Unblocking of NMDA receptors, glutamate binding and activation / defense response to protozoan / positive regulation of interleukin-17 production / Phase 0 - rapid depolarisation / protein phosphatase activator activity / RHO GTPases activate PAKs / positive regulation of phosphoprotein phosphatase activity / positive regulation of cysteine-type endopeptidase activity involved in apoptotic process / Ion transport by P-type ATPases / positive regulation of interleukin-10 production / Long-term potentiation / Uptake and function of anthrax toxins / Calcineurin activates NFAT / Regulation of MECP2 expression and activity / catalytic complex / DARPP-32 events / detection of calcium ion / extrinsic apoptotic signaling pathway via death domain receptors / regulation of cardiac muscle contraction / negative regulation of ryanodine-sensitive calcium-release channel activity / immunoglobulin mediated immune response / Smooth Muscle Contraction / negative regulation of protein secretion / RHO GTPases activate IQGAPs / calcium channel inhibitor activity / cellular response to interferon-beta / regulation of cardiac muscle contraction by regulation of the release of sequestered calcium ion / Protein methylation / coreceptor activity / positive regulation of autophagy / eNOS activation / T cell proliferation / Activation of AMPK downstream of NMDARs / regulation of release of sequestered calcium ion into cytosol by sarcoplasmic reticulum
類似検索 - 分子機能
Interleukin-12 alpha / Interleukin-12 alpha subunit / Interleukin-12 beta / Interleukin-12 beta, central domain / Cytokine interleukin-12p40 C-terminus / Death-associated protein kinase 1 / Immunoglobulin C2-set-like, ligand-binding / Ig-like C2-type domain / Long hematopoietin receptor, soluble alpha chain, conserved site / Long hematopoietin receptor, soluble alpha chains family signature. ...Interleukin-12 alpha / Interleukin-12 alpha subunit / Interleukin-12 beta / Interleukin-12 beta, central domain / Cytokine interleukin-12p40 C-terminus / Death-associated protein kinase 1 / Immunoglobulin C2-set-like, ligand-binding / Ig-like C2-type domain / Long hematopoietin receptor, soluble alpha chain, conserved site / Long hematopoietin receptor, soluble alpha chains family signature. / Long hematopoietin receptor, Gp130 family 2, conserved site / Long hematopoietin receptor, gp130 family signature. / Roc domain profile. / Roc domain / Death domain profile. / DEATH domain, found in proteins involved in cell death (apoptosis). / Death domain / Death domain / Four-helical cytokine-like, core / Death-like domain superfamily / Ankyrin repeat / Fibronectin type III domain / Fibronectin type 3 domain / EF-hand domain pair / Immunoglobulin subtype 2 / Immunoglobulin C-2 Type / Ankyrin repeats (3 copies) / Fibronectin type-III domain profile. / Ankyrin repeat profile. / Ankyrin repeat region circular profile. / ankyrin repeats / Fibronectin type III / Ankyrin repeat / Fibronectin type III superfamily / Ankyrin repeat-containing domain superfamily / EF-hand, calcium binding motif / EF-Hand 1, calcium-binding site / EF-hand calcium-binding domain. / EF-hand calcium-binding domain profile. / EF-hand domain / EF-hand domain pair / Ig-like domain profile. / Immunoglobulin-like domain / Serine/threonine-protein kinase, active site / Serine/Threonine protein kinases active-site signature. / Immunoglobulin-like domain superfamily / Protein kinase domain / Serine/Threonine protein kinases, catalytic domain / Protein kinase, ATP binding site / Protein kinases ATP-binding region signature. / Immunoglobulin-like fold / Protein kinase domain profile. / Protein kinase domain / Protein kinase-like domain superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Calmodulin-1 / Interleukin-12 subunit alpha / Interleukin-12 subunit beta / Death-associated protein kinase 1 / Interleukin-12 receptor subunit beta-2 / Interleukin-12 receptor subunit beta-1
類似検索 - 構成要素
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.6 Å
データ登録者Felix J / Bloch Y / Savvides SN
資金援助 ベルギー, 2件
OrganizationGrant number
Research Foundation - Flanders (FWO)12S0519N ベルギー
Research Foundation - Flanders (FWO)G0B4918N ベルギー
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2024
タイトル: Structures of complete extracellular receptor assemblies mediated by IL-12 and IL-23.
著者: Yehudi Bloch / Jan Felix / Romain Merceron / Mathias Provost / Royan Alipour Symakani / Robin De Backer / Elisabeth Lambert / Ahmad R Mehdipour / Savvas N Savvides /
要旨: Cell-surface receptor complexes mediated by pro-inflammatory interleukin (IL)-12 and IL-23, both validated therapeutic targets, are incompletely understood due to the lack of structural insights into ...Cell-surface receptor complexes mediated by pro-inflammatory interleukin (IL)-12 and IL-23, both validated therapeutic targets, are incompletely understood due to the lack of structural insights into their complete extracellular assemblies. Furthermore, there is a paucity of structural details describing the IL-12-receptor interaction interfaces, in contrast to IL-23-receptor complexes. Here we report structures of fully assembled mouse IL-12/human IL-23-receptor complexes comprising the complete extracellular segments of the cognate receptors determined by electron cryo-microscopy. The structures reveal key commonalities but also surprisingly diverse features. Most notably, whereas IL-12 and IL-23 both utilize a conspicuously presented aromatic residue on their α-subunit as a hotspot to interact with the N-terminal Ig domain of their high-affinity receptors, only IL-12 juxtaposes receptor domains proximal to the cell membrane. Collectively, our findings will help to complete our understanding of cytokine-mediated assemblies of tall cytokine receptors and will enable a cytokine-specific interrogation of IL-12/IL-23 signaling in physiology and disease.
履歴
登録2023年3月10日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年2月7日-
マップ公開2024年2月7日-
更新2024年5月1日-
現状2024年5月1日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_16821.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 40.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Main map: Anisotropy sharpened map of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex (Class 2), used for model refinement in Phenix. Additional map: DeepEMhancer sharpened map.
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.51 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.1
最小 - 最大-0.36380848 - 0.6111633
平均 (標準偏差)0.0003129092 (±0.013889578)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderZYX
Origin000
サイズ220220220
Spacing220220220
セルA=B=C: 332.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_16821_msk_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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追加マップ: DeepEMhancer sharpened map of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex...

ファイルemd_16821_additional_1.map
注釈DeepEMhancer sharpened map of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex (Class 2), used for model building in Coot and visualization in ChimeraX.
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Half map 2 of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex...

ファイルemd_16821_half_map_1.map
注釈Half map 2 of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex (Class 2).
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Half map 1 of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex...

ファイルemd_16821_half_map_2.map
注釈Half map 1 of the murine IL12:IL12Rbeta1-DAPK1:IL12Rbeta2-Calmodulin complex (Class 2).
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : Murine IL-12 in complex with mIL-12Rbeta1-DAPK1 and mIL-12Rbeta2-...

全体名称: Murine IL-12 in complex with mIL-12Rbeta1-DAPK1 and mIL-12Rbeta2-Calmodulin.
要素
  • 複合体: Murine IL-12 in complex with mIL-12Rbeta1-DAPK1 and mIL-12Rbeta2-Calmodulin.
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 subunit alpha
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 subunit beta
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 receptor subunit beta-1,Death-associated protein kinase 1
    • タンパク質・ペプチド: Interleukin-12 receptor subunit beta-2,Calmodulin-1
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

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超分子 #1: Murine IL-12 in complex with mIL-12Rbeta1-DAPK1 and mIL-12Rbeta2-...

超分子名称: Murine IL-12 in complex with mIL-12Rbeta1-DAPK1 and mIL-12Rbeta2-Calmodulin.
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
分子量理論値: 216 KDa

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分子 #1: Interleukin-12 subunit alpha

分子名称: Interleukin-12 subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
分子量理論値: 25.927496 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: RVIPVSGPAR CLSQSRNLLK TTDDMVKTAR EKLKHYSCTA EDIDHEDITR DQTSTLKTCL PLELHKNESC LATRETSSTT RGSCLPPQK TSLMMTLCLG SIYEDLKMYQ TEFQAINAAL QNHNHQQIIL DKGMLVAIDE LMQSLNHNGE TLRQKPPVGE A DPYRVKMK ...文字列:
RVIPVSGPAR CLSQSRNLLK TTDDMVKTAR EKLKHYSCTA EDIDHEDITR DQTSTLKTCL PLELHKNESC LATRETSSTT RGSCLPPQK TSLMMTLCLG SIYEDLKMYQ TEFQAINAAL QNHNHQQIIL DKGMLVAIDE LMQSLNHNGE TLRQKPPVGE A DPYRVKMK LCILLHAFST RVVTINRVMG YLSSAGTSDE VDGGSGGSGL NDIFEAQKIE WHEGRTKHHH HHH

UniProtKB: Interleukin-12 subunit alpha

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分子 #2: Interleukin-12 subunit beta

分子名称: Interleukin-12 subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
分子量理論値: 35.83732 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MWELEKDVYV VEVDWTPDAP GETVNLTCDT PEEDDITWTS DQRHGVIGSG KTLTITVKEF LDAGQYTCHK GGETLSHSHL LLHKKENGI WSTEILKNFK NKTFLKCEAP NYSGRFTCSW LVQRNMDLKF NIKSSSSSPD SRAVTCGMAS LSAEKVTLDQ R DYEKYSVS ...文字列:
MWELEKDVYV VEVDWTPDAP GETVNLTCDT PEEDDITWTS DQRHGVIGSG KTLTITVKEF LDAGQYTCHK GGETLSHSHL LLHKKENGI WSTEILKNFK NKTFLKCEAP NYSGRFTCSW LVQRNMDLKF NIKSSSSSPD SRAVTCGMAS LSAEKVTLDQ R DYEKYSVS CQEDVTCPTA EETLPIELAL EARQQNKYEN YSTSFFIRDI IKPDPPKNLQ MKPLKNSQVE VSWEYPDSWS TP HSYFSLK FFVRIQRKKE KMKETEEGCN QKGAFLVEKT STEVQCKGGN VCVQAQDRYY NSSCSKWACV PCRVRS

UniProtKB: Interleukin-12 subunit beta

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分子 #3: Interleukin-12 receptor subunit beta-1,Death-associated protein k...

分子名称: Interleukin-12 receptor subunit beta-1,Death-associated protein kinase 1
タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: non-specific serine/threonine protein kinase
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
分子量理論値: 63.789156 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: QLGASGPGDG CCVEKTSFPE GASGSPLGPR NLSCYRVSKT DYECSWQYDG PEDNVSHVLW CCFVPPNHTH TGQERCRYFS SGPDRTVQF WEQDGIPVLS KVNFWVESRL GNRTMKSQKI SQYLYNWTKT TPPLGHIKVS QSHRQLRMDW NVSEEAGAEV Q FRRRMPTT ...文字列:
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UniProtKB: Interleukin-12 receptor subunit beta-1, Death-associated protein kinase 1

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分子 #4: Interleukin-12 receptor subunit beta-2,Calmodulin-1

分子名称: Interleukin-12 receptor subunit beta-2,Calmodulin-1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
分子量理論値: 85.723344 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: NIDVCKLGTV TVQPAPVIPL GSAANISCSL NPKQGCSHYP SSNELILLKF VNDVLVENLH GKKVHDHTGH SSTFQVTNLS LGMTLFVCK LNCSNSQKKP PVPVCGVEIS VGVAPEPPQN ISCVQEGENG TVACSWNSGK VTYLKTNYTL QLSGPNNLTC Q KQCFSDNR ...文字列:
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UniProtKB: Interleukin-12 receptor subunit beta-2, Calmodulin-1

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分子 #7: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

分子名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 3 / : NAG
分子量理論値: 221.208 Da
Chemical component information

ChemComp-NAG:
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-アセチル-β-D-グルコサミン

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
構成要素:
濃度名称
150.0 mMNaClsodium chloride
25.0 mMC8H18N2O4SHEPES
5.0 mMCaClcalcium chloride

詳細: HEPES-buffered saline (HBS) with added calcium chloride: 25 mM HEPES, pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM CaCl
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / 装置: LEICA PLUNGER / 詳細: Leica EM GP2, 5 s. blotting time..

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電子顕微鏡法

顕微鏡JEOL CRYO ARM 300
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 8145 / 平均露光時間: 3.37 sec. / 平均電子線量: 61.8 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 60000
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN

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画像解析

粒子像選択選択した数: 2151468
初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成使用したクラス数: 2 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 209938
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 3次元分類クラス数: 2 / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-8oe0:
Cryo-EM structure of a pre-dimerized murine IL-12 complete extracellular signaling complex (Class 2).

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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