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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ode | |||||||||
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タイトル | E. coli 50S ribosome LiCl core particle | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME (リボソーム) / ribosome assembly (リボソーム) / folding / biogenesis (自然発生説) / 50S | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / ribosome assembly / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / assembly of large subunit precursor of preribosome ...transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / ribosome assembly / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / assembly of large subunit precursor of preribosome / response to reactive oxygen species / cytosolic ribosome assembly / DNA-templated transcription termination / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / transferase activity / negative regulation of translation / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / response to antibiotic / mRNA binding / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.84 Å | |||||||||
データ登録者 | Larsson, D.S.D. / Selmer, M. | |||||||||
資金援助 | スウェーデン, 2件
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引用 | ジャーナル: Biomolecules / 年: 2022 タイトル: Structural Consequences of Deproteinating the 50S Ribosome. 著者: Daniel S D Larsson / Sandesh Kanchugal P / Maria Selmer / 要旨: Ribosomes are complex ribonucleoprotein particles. Purified 50S ribosomes subjected to high-salt wash, removing a subset of ribosomal proteins (r-proteins), were shown as competent for in vitro ...Ribosomes are complex ribonucleoprotein particles. Purified 50S ribosomes subjected to high-salt wash, removing a subset of ribosomal proteins (r-proteins), were shown as competent for in vitro assembly into functional 50S subunits. Here, we used cryo-EM to determine the structures of such LiCl core particles derived from 50S subunits. A wide range of complexes with large variations in the extent of the ordered 23S rRNA and the occupancy of r-proteins were resolved to between 2.8 Å and 9 Å resolution. Many of these particles showed high similarity to in vivo and in vitro assembly intermediates, supporting the inherent stability or metastability of these states. Similar to states in early ribosome assembly, the main class showed an ordered density for the particle base around the exit tunnel, with domain V and the 3'-half of domain IV disordered. In addition, smaller core particles were discovered, where either domain II or IV was unfolded. Our data support a multi-pathway in vitro disassembly process, similar but reverse to assembly. Dependencies between complex tertiary RNA structures and RNA-protein interactions were observed, where protein extensions dissociated before the globular domains. We observed the formation of a non-native RNA structure upon protein dissociation, demonstrating that r-proteins stabilize native RNA structures and prevent non-native interactions also after folding. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7ode.cif.gz | 2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ode.ent.gz | 1.5 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7ode.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/od/7ode ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/od/7ode | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 12826MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 1種, 1分子 I
#1: RNA鎖 | 分子量: 941797.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: A1618 is not methylated in strain JW5107-1 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
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-50S ribosomal protein ... , 15種, 15分子 KLMRSVXYZabcgik
#2: タンパク質 | 分子量: 29923.619 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P60422 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 22291.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P60438 |
#4: タンパク質 | 分子量: 22121.566 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P60723 |
#5: タンパク質 | 分子量: 16050.606 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AA10 |
#6: タンパク質 | 分子量: 13565.067 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ADY3 |
#7: タンパク質 | 分子量: 14393.657 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG44 |
#8: タンパク質 | 分子量: 13159.278 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7K6 |
#9: タンパク質 | 分子量: 13528.024 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7L3 |
#10: タンパク質 | 分子量: 11586.374 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG48 |
#11: タンパク質 | 分子量: 12253.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P61175 |
#12: タンパク質 | 分子量: 11222.160 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ADZ0 |
#13: タンパク質 | 分子量: 11339.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P60624 |
#14: タンパク質 | 分子量: 7286.464 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7M6 |
#15: タンパク質 | 分子量: 6463.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7N4 |
#16: タンパク質・ペプチド | 分子量: 5397.463 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7P5 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: 50S LiCl core particle / タイプ: RIBOSOME 詳細: 3.5 M LiCl wash, RlmF pull-down, consensus reconstruction Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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分子量 | 値: 1.1 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: JW5107-1 |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 濃度: 0.17 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: 20 mA current / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 283 K 詳細: continuous carbon, 3 microL of sample, incubate for 30 seconds, blot for 3.5 seconds |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 詳細: The sample stage was tilted at 0, 15 or 30 degrees |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 75000 X / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.77 sec. / 電子線照射量: 42 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 11368 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 14 µm / 横: 4096 / 縦: 4096 |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.84 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 384374 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 69.21 / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: correlation coefficient 詳細: Low-resolution regions were modeled at a lower contour level. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 4YBB | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 69.21 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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