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- PDB-7k04: Structure of TFIIH/Rad4-Rad23-Rad33/DNA in DNA opening -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7k04
タイトルStructure of TFIIH/Rad4-Rad23-Rad33/DNA in DNA opening
要素
  • (DNA repair helicase ...) x 2
  • (DNA repair protein ...DNA修復) x 2
  • (General transcription and DNA repair factor IIH subunit ...) x 4
  • Damaged DNA strand
  • RNA polymerase II transcription factor B subunit 5
  • Undamaged DNA strand
キーワードNUCLEAR PROTEIN/DNA / TFIIH (TFIIH) / Rad4 / Rad4/23 / XPC / NER / Nucleotide Excision Repair (ヌクレオチド除去修復) / GG-NER / NUCLEAR PROTEIN / NUCLEAR PROTEIN-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


nucleotide-excision repair factor 2 complex / single-strand break-containing DNA binding / XPC complex / nucleotide-excision repair, DNA damage recognition / regulation of mitotic recombination / RNA polymerase II promoter clearance / phosphatidylinositol-5-phosphate binding / SUMOylation of DNA damage response and repair proteins / positive regulation of mitotic recombination / DNA translocase activity ...nucleotide-excision repair factor 2 complex / single-strand break-containing DNA binding / XPC complex / nucleotide-excision repair, DNA damage recognition / regulation of mitotic recombination / RNA polymerase II promoter clearance / phosphatidylinositol-5-phosphate binding / SUMOylation of DNA damage response and repair proteins / positive regulation of mitotic recombination / DNA translocase activity / nucleotide-excision repair factor 3 complex / nucleotide-excision repair, preincision complex assembly / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / phosphatidylinositol-3-phosphate binding / 5'-3' DNA helicase activity / transcription factor TFIIH holo complex / transcription factor TFIIH core complex / 3'-5' DNA helicase activity / 転写開始前複合体 / poly(A)+ mRNA export from nucleus / DNA duplex unwinding / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA Polymerase I Promoter Escape / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / Dual incision in TC-NER / ATPase activator activity / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / DNA topological change / DNAミスマッチ修復 / transcription by RNA polymerase I / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA helicase activity / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / nucleotide-excision repair / ubiquitin protein ligase activity / single-stranded DNA binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / double-stranded DNA binding / proteasome-mediated ubiquitin-dependent protein catabolic process / ヘリカーゼ / transcription by RNA polymerase II / damaged DNA binding / DNA修復 / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / negative regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / DNA binding / zinc ion binding / ATP binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
Rad33 / Rad33 / DNA repair protein Rad4 / DNA repair protein Rad4, subgroup / Rad4/PNGase transglutaminase-like fold / Rad4 beta-hairpin domain 1 / Rad4 beta-hairpin domain 2 / Rad4 beta-hairpin domain 3 / Rad4, beta-hairpin domain 3 superfamily / Rad4 beta-hairpin domain 1 ...Rad33 / Rad33 / DNA repair protein Rad4 / DNA repair protein Rad4, subgroup / Rad4/PNGase transglutaminase-like fold / Rad4 beta-hairpin domain 1 / Rad4 beta-hairpin domain 2 / Rad4 beta-hairpin domain 3 / Rad4, beta-hairpin domain 3 superfamily / Rad4 beta-hairpin domain 1 / Rad4 beta-hairpin domain 3 / Rad4 beta-hairpin domain 1 / Rad4 beta-hairpin domain 2 / Rad4 beta-hairpin domain 3 / Rad4 transglutaminase-like domain / Bacterial type XPD DNA helicase, FeS cluster domain / Transglutaminase-like superfamily / TFIIH subunit Tfb4/GTF2H3 / Transcription factor Tfb4 / TFIIH C1-like domain / Ssl1-like / TFIIH subunit Ssl1/p44 / Ssl1-like / TFIIH C1-like domain / TFIIH C1-like domain / TFIIH p62 subunit, N-terminal / TFIIH subunit Tfb1/GTF2H1 / TFIIH p62 subunit, N-terminal domain / BSD domain / BSD domain superfamily / BSD domain / BSD domain profile. / domain in transcription factors and synapse-associated proteins / RAD3/XPD family / Helicase XPB/Ssl2 / Helical and beta-bridge domain / ERCC3/RAD25/XPB helicase, C-terminal domain / Helicase XPB/Ssl2, N-terminal domain / Helical and beta-bridge domain / Helicase conserved C-terminal domain / ERCC3/RAD25/XPB C-terminal helicase / Transcription factor TFIIH subunit p52/Tfb2 / ATP-dependent helicase Rad3/Chl1-like / Transcription factor Tfb2, C-terminal domain / Transcription factor Tfb2 / Transcription factor Tfb2 (p52) C-terminal domain / TFIIH subunit TTDA/Tfb5 / TFB5-like superfamily / Transcription factor TFIIH complex subunit Tfb5 / Transcription factor TFIIH complex subunit Tfb5 / Helicase superfamily 1/2, DinG/Rad3-like / Helicase-like, DEXD box c2 type / ATP-dependent helicase, C-terminal / DEAD2 / Helicase superfamily 1/2, ATP-binding domain, DinG/Rad3-type / DEAD_2 / Helicase C-terminal domain / Superfamilies 1 and 2 helicase ATP-binding type-2 domain profile. / DEXDc2 / HELICc2 / Helicase/UvrB, N-terminal / Type III restriction enzyme, res subunit / DNA/RNA helicase, ATP-dependent, DEAH-box type, conserved site / DEAH-box subfamily ATP-dependent helicases signature. / C1-like domain superfamily / von Willebrand factor (vWF) type A domain / VWFA domain profile. / von Willebrand factor, type A / von Willebrand factor A-like domain superfamily / Zinc finger C2H2-type / Papain-like cysteine peptidase superfamily / helicase superfamily c-terminal domain / Superfamilies 1 and 2 helicase C-terminal domain profile. / Superfamilies 1 and 2 helicase ATP-binding type-1 domain profile. / DEAD-like helicases superfamily / Helicase, C-terminal / Helicase superfamily 1/2, ATP-binding domain / PH-like domain superfamily / Zinc finger, RING/FYVE/PHD-type / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
鉄・硫黄クラスター / デオキシリボ核酸 / DNA (> 10) / General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit XPD / DNA repair protein RAD4 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB1 / General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit XPB / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB2 / DNA repair protein RAD33 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit SSL1 ...鉄・硫黄クラスター / デオキシリボ核酸 / DNA (> 10) / General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit XPD / DNA repair protein RAD4 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB1 / General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit XPB / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB2 / DNA repair protein RAD33 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit SSL1 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB4 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB5
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
synthetic construct (人工物)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.25 Å
データ登録者van Eeuwen, T. / Min, J.H. / Murakami, K.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01-GM123233 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / : 2021
タイトル: Cryo-EM structure of TFIIH/Rad4-Rad23-Rad33 in damaged DNA opening in nucleotide excision repair.
著者: Trevor van Eeuwen / Yoonjung Shim / Hee Jong Kim / Tingting Zhao / Shrabani Basu / Benjamin A Garcia / Craig D Kaplan / Jung-Hyun Min / Kenji Murakami /
要旨: The versatile nucleotide excision repair (NER) pathway initiates as the XPC-RAD23B-CETN2 complex first recognizes DNA lesions from the genomic DNA and recruits the general transcription factor ...The versatile nucleotide excision repair (NER) pathway initiates as the XPC-RAD23B-CETN2 complex first recognizes DNA lesions from the genomic DNA and recruits the general transcription factor complex, TFIIH, for subsequent lesion verification. Here, we present a cryo-EM structure of an NER initiation complex containing Rad4-Rad23-Rad33 (yeast homologue of XPC-RAD23B-CETN2) and 7-subunit coreTFIIH assembled on a carcinogen-DNA adduct lesion at 3.9-9.2 Å resolution. A ~30-bp DNA duplex could be mapped as it straddles between Rad4 and the Ssl2 (XPB) subunit of TFIIH on the 3' and 5' side of the lesion, respectively. The simultaneous binding with Rad4 and TFIIH was permitted by an unwinding of DNA at the lesion. Translocation coupled with torque generation by Ssl2 and Rad4 would extend the DNA unwinding at the lesion and deliver the damaged strand to Rad3 (XPD) in an open form suitable for subsequent lesion scanning and verification.
履歴
登録2020年9月3日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02021年7月28日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-22588
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
E: DNA repair protein RAD33
2: General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB2
0: DNA repair helicase RAD3
1: General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB1
4: General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB4
6: General transcription and DNA repair factor IIH subunit SSL1
Y: Damaged DNA strand
W: Undamaged DNA strand
A: DNA repair protein RAD4
7: DNA repair helicase RAD25
5: RNA polymerase II transcription factor B subunit 5
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)540,96419
ポリマ-540,20611
非ポリマー7598
0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551

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要素

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DNA repair protein ... , 2種, 2分子 EA

#1: タンパク質 DNA repair protein RAD33 / DNA修復


分子量: 20291.457 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RAD33, YML011C, YM9571.07C / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q04231
#9: タンパク質 DNA repair protein RAD4 / DNA修復


分子量: 87374.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RAD4, YER162C / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P14736

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General transcription and DNA repair factor IIH subunit ... , 4種, 4分子 2146

#2: タンパク質 General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB2 / TFIIH subunit TFB2 / RNA polymerase II transcription factor B 52 kDa subunit / RNA polymerase II ...TFIIH subunit TFB2 / RNA polymerase II transcription factor B 52 kDa subunit / RNA polymerase II transcription factor B p52 subunit / RNA polymerase II transcription factor B subunit 2


分子量: 58602.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q02939
#4: タンパク質 General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB1 / TFIIH subunit TFB1 / RNA polymerase II transcription factor B 73 kDa subunit / RNA polymerase II ...TFIIH subunit TFB1 / RNA polymerase II transcription factor B 73 kDa subunit / RNA polymerase II transcription factor B p73 subunit / RNA polymerase II transcription factor B subunit 1


分子量: 72959.258 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P32776
#5: タンパク質 General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB4 / TFIIH subunit TFB4 / RNA polymerase II transcription factor B 34 kDa subunit / RNA polymerase II ...TFIIH subunit TFB4 / RNA polymerase II transcription factor B 34 kDa subunit / RNA polymerase II transcription factor B p34 subunit / RNA polymerase II transcription factor B subunit 4


分子量: 37506.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q12004
#6: タンパク質 General transcription and DNA repair factor IIH subunit SSL1 / TFIIH subunit SSL1 / RNA polymerase II transcription factor B subunit SSL1 / TFB subunit SSL1 / ...TFIIH subunit SSL1 / RNA polymerase II transcription factor B subunit SSL1 / TFB subunit SSL1 / Suppressor of stem-loop protein 1


分子量: 52370.035 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: Q04673

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DNA repair helicase ... , 2種, 2分子 07

#3: タンパク質 DNA repair helicase RAD3 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit RAD3 / TFIIH subunit RAD3


分子量: 89899.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P06839, ヘリカーゼ
#10: タンパク質 DNA repair helicase RAD25 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit RAD25 / TFIIH subunit RAD25 / Suppressor of ...General transcription and DNA repair factor IIH subunit RAD25 / TFIIH subunit RAD25 / Suppressor of stem-loop mutation 2


分子量: 95461.664 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SSL2, LOM3, RAD25, UVS112, YIL143C / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q00578, ヘリカーゼ

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DNA鎖 , 2種, 2分子 YW

#7: DNA鎖 Damaged DNA strand


分子量: 8641.573 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)
#8: DNA鎖 Undamaged DNA strand


分子量: 8855.751 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)

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タンパク質 , 1種, 1分子 5

#11: タンパク質 RNA polymerase II transcription factor B subunit 5 / General transcription and DNA repair factor IIH subunit TFB5 / TFIIH subunit TFB5


分子量: 8243.490 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFB5, YDR079C-A / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q3E7C1

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非ポリマー , 3種, 8分子

#12: 化合物 ChemComp-CA / CALCIUM ION / カルシウムジカチオン


分子量: 40.078 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : Ca
#13: 化合物 ChemComp-SF4 / IRON/SULFUR CLUSTER / 鉄・硫黄クラスター


分子量: 351.640 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / : Fe4S4
#14: 化合物
ChemComp-ZN / ZINC ION


分子量: 65.409 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 合成 / : Zn

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: 10 component complex of Rad4-23, Rad33 and TFIIH on damaged DNA
タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#10 / 由来: MULTIPLE SOURCES
分子量実験値: NO
緩衝液pH: 7.6
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: LEICA EM CPC / 凍結剤: ETHANE / 詳細: Manually blotted by Leica EM CPC

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy
撮影電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2Latitude画像取得
4CTFFIND4.1.13CTF補正
9RELION3.0.8初期オイラー角割当
10RELION3.0.8最終オイラー角割当
12RELION3.0.83次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 9.25 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 73146 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT
原子モデル構築PDB-ID: 6CFI

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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