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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5kel | ||||||||||||
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タイトル | EBOV GP in complex with variable Fab domains of IgGs c2G4 and c13C6 | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | VIRAL PROTEIN/IMMUNE SYSTEM (ウイルス性) / Ebola virus surface glycoprotein / therapeutic antibody cocktail / ZMapp (ZMapp) / VIRAL PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex (ウイルス性) | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 host cell endoplasmic reticulum / viral budding from plasma membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / suppression by virus of host tetherin activity / host cell cytoplasm / entry receptor-mediated virion attachment to host cell / symbiont entry into host cell / 脂質ラフト / fusion of virus membrane with host endosome membrane / エンベロープ (ウイルス) ...host cell endoplasmic reticulum / viral budding from plasma membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / suppression by virus of host tetherin activity / host cell cytoplasm / entry receptor-mediated virion attachment to host cell / symbiont entry into host cell / 脂質ラフト / fusion of virus membrane with host endosome membrane / エンベロープ (ウイルス) / lipid binding / symbiont-mediated suppression of host type I interferon-mediated signaling pathway / host cell plasma membrane / virion membrane / extracellular region / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Zaire ebolavirus (エボラウイルス) Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Pallesen, J. / Murin, C.D. / de Val, N. / Cottrell, C.A. / Hastie, K.M. / Turner, H.L. / Fusco, M.L. / Flyak, A.I. / Zeitlin, L. / Crowe Jr., J.E. ...Pallesen, J. / Murin, C.D. / de Val, N. / Cottrell, C.A. / Hastie, K.M. / Turner, H.L. / Fusco, M.L. / Flyak, A.I. / Zeitlin, L. / Crowe Jr., J.E. / Andersen, K.G. / Saphire, E.O. / Ward, A.B. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2016 タイトル: Structures of Ebola virus GP and sGP in complex with therapeutic antibodies. 著者: Jesper Pallesen / Charles D Murin / Natalia de Val / Christopher A Cottrell / Kathryn M Hastie / Hannah L Turner / Marnie L Fusco / Andrew I Flyak / Larry Zeitlin / James E Crowe / Kristian G ...著者: Jesper Pallesen / Charles D Murin / Natalia de Val / Christopher A Cottrell / Kathryn M Hastie / Hannah L Turner / Marnie L Fusco / Andrew I Flyak / Larry Zeitlin / James E Crowe / Kristian G Andersen / Erica Ollmann Saphire / Andrew B Ward / 要旨: The Ebola virus (EBOV) GP gene encodes two glycoproteins. The major product is a soluble, dimeric glycoprotein (sGP) that is secreted abundantly. Despite the abundance of sGP during infection, little ...The Ebola virus (EBOV) GP gene encodes two glycoproteins. The major product is a soluble, dimeric glycoprotein (sGP) that is secreted abundantly. Despite the abundance of sGP during infection, little is known regarding its structure or functional role. A minor product, resulting from transcriptional editing, is the transmembrane-anchored, trimeric viral surface glycoprotein (GP). GP mediates attachment to and entry into host cells, and is the intended target of antibody therapeutics. Because large portions of sequence are shared between GP and sGP, it has been hypothesized that sGP may potentially subvert the immune response or may contribute to pathogenicity. In this study, we present cryo-electron microscopy structures of GP and sGP in complex with GP-specific and GP/sGP cross-reactive antibodies undergoing human clinical trials. The structure of the sGP dimer presented here, in complex with both an sGP-specific antibody and a GP/sGP cross-reactive antibody, permits us to unambiguously assign the oligomeric arrangement of sGP and compare its structure and epitope presentation to those of GP. We also provide biophysical evaluation of naturally occurring GP/sGP mutations that fall within the footprints identified by our high-resolution structures. Taken together, our data provide a detailed and more complete picture of the accessible Ebolavirus glycoprotein landscape and a structural basis to evaluate patient and vaccine antibody responses towards differently structured products of the GP gene. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5kel.cif.gz | 492.4 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5kel.ent.gz | 396.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5kel.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ke/5kel ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ke/5kel | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-Ebola surface glycoprotein, ... , 2種, 6分子 AEFBGI
#1: タンパク質 | 分子量: 50974.031 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Zaire ebolavirus (strain Mayinga-76) (エボラウイルス) 株: Mayinga-76 / 遺伝子: GP 発現宿主: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) 参照: UniProt: Q05320 #2: タンパク質 | 分子量: 16137.119 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Zaire ebolavirus (エボラウイルス) 株: Mayinga-76 / 遺伝子: GP 発現宿主: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) 参照: UniProt: Q05320 |
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-抗体 , 4種, 12分子 HPQLTUCJMDNO
#3: 抗体 | 分子量: 13573.105 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) 発現宿主: Nicotiana benthamiana (ベンサミアナタバコ) #4: 抗体 | 分子量: 11641.884 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) 発現宿主: Nicotiana benthamiana (ベンサミアナタバコ) #5: 抗体 | 分子量: 13169.679 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) 発現宿主: Nicotiana benthamiana (ベンサミアナタバコ) #6: 抗体 | 分子量: 11611.877 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) 発現宿主: Nicotiana benthamiana (ベンサミアナタバコ) |
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-糖 , 5種, 15分子
#7: 多糖 | #8: 多糖 | #9: 多糖 | #10: 多糖 | #11: 糖 | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Ebola virus trimeric surface glycoprotein in complex with IgG c2G4 and c13C6 Fabs タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#6 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 値: 0.54 MDa / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: Zaire ebolavirus (エボラウイルス) / 株: Mayinga-76 |
由来(組換発現) | 生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
緩衝液成分 | 名称: 1xTBS |
試料 | 濃度: 4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-2/2 4C |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 22500 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 77 K / 最低温度: 77 K |
撮影 | 平均露光時間: 10 sec. / 電子線照射量: 57 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2526 |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 50 / 利用したフレーム数/画像: 1-50 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C3 (3回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 86000 / クラス平均像の数: 6 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: EMRinger 詳細: Model building and refinement were conducted using a combination of software programs. The refinement target was optimizing using the MolProbity score while maintaining a high (good) EMRinger score. |