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- EMDB-4615: Dps-DNA crystal structure determined in vitro -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-4615
タイトルDps-DNA crystal structure determined in vitro
マップデータ
試料
  • 複合体: Dps-DNA co-crystal
生物種Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 13.5 Å
データ登録者Chesnokov YM / Kamyshinsky RA / Orekhov AS / Vasiliev AL
資金援助 ロシア, 1件
OrganizationGrant number国
Russian Science Foundation18-74-10071 ロシア
引用ジャーナル: FEBS Lett / 年: 2019
タイトル: Protective Dps-DNA co-crystallization in stressed cells: an in vitro structural study by small-angle X-ray scattering and cryo-electron tomography.
著者: Liubov A Dadinova / Yurii M Chesnokov / Roman A Kamyshinsky / Ivan A Orlov / Maxim V Petoukhov / Andrey A Mozhaev / Ekaterina Yu Soshinskaya / Vassili N Lazarev / Valentin A Manuvera / Anton ...著者: Liubov A Dadinova / Yurii M Chesnokov / Roman A Kamyshinsky / Ivan A Orlov / Maxim V Petoukhov / Andrey A Mozhaev / Ekaterina Yu Soshinskaya / Vassili N Lazarev / Valentin A Manuvera / Anton S Orekhov / Alexander L Vasiliev / Eleonora V Shtykova /
要旨: Under severe or prolonged stress, bacteria produce a nonspecific DNA-binding protein (Dps), which effectively protects DNA against damaging agents both in vitro and in vivo by forming intracellular ...Under severe or prolonged stress, bacteria produce a nonspecific DNA-binding protein (Dps), which effectively protects DNA against damaging agents both in vitro and in vivo by forming intracellular biocrystals. The phenomenon of protective crystallization of DNA in living cells has been intensively investigated during the last two decades; however, the results of studies are somewhat contradictory, and up to now, there has been no direct determination of a Dps-DNA crystal structure. Here, we report the in vitro analysis of the vital process of Dps-DNA co-crystallization using two complementary structural methods: synchrotron small-angle X-ray scattering in solution and cryo-electron tomography. Importantly, for the first time, the DNA in the co-crystals was visualized, and the lattice parameters of the crystalline Dps-DNA complex were determined.
履歴
登録2019年2月15日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年5月22日-
マップ公開2019年5月22日-
更新2020年11月25日-
現状2020年11月25日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_4615.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_4615.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 3.7 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.15 / ムービー #1: 0.3
最小 - 最大-2.0031955 - 1.8858155
平均 (標準偏差)0.001427492 (±0.4656309)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ808080
Spacing808080
セルA=B=C: 296.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z3.73.73.7
M x/y/z808080
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z296.000296.000296.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ320320320
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS808080
D min/max/mean-2.0031.8860.001

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_4615_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_4615_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_4615_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Dps-DNA co-crystal

全体名称: Dps-DNA co-crystal
要素
  • 複合体: Dps-DNA co-crystal

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超分子 #1: Dps-DNA co-crystal

超分子名称: Dps-DNA co-crystal / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
詳細: Dps protein and DNA were mixed in the concentrations corresponding to the Dps/DNA ratio 1Dps dodecamer/60 bp of DNA. A ring vector pcDNA-hIRR-GFP 9900 bp was used as DNA sample.
由来(天然)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 組換プラスミド: pET-dps
分子量理論値: 224 KDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態3D array

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試料調製

濃度3.1 mg/mL
緩衝液pH: 8
構成要素:
濃度式
50.0 mMTris-HClトリスヒドロキシメチルアミノメタン
50.0 mMNaCl塩化ナトリウム
0.5 mMEDTAエチレンジアミン四酢酸
グリッド材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: LACEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.026 kPa / 詳細: Pelco EasiGlow ( 25 mA)
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blotting for 1.5 seconds.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 倍率（補正後）: 37837 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 3.0 µm / 倍率（公称値）: 18000
特殊光学系球面収差補正装置: Cs image corrector (CEOS, Germany)
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
検出モード: INTEGRATING / デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 14.0 µm / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 1.02 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

抽出トモグラム数: 11 / 使用した粒子像数: 40286 / 参照モデル: 1DPS / 手法: template matching
CTF補正詳細: 3D models for the contrast transfer function (CTF) in RELION2
最終 3次元分類クラス数: 2 / 平均メンバー数/クラス: 20143
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 13.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 9123
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

1dps

精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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