+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-13748 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Preliminary Single particle cryo-EM reconstruction of a 40-mer assembly of Hsp26 purified from yeast. | |||||||||
マップデータ | Preliminary WT map of Hsp26 purified from yeast | |||||||||
試料 |
| |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 cytoplasmic stress granule / unfolded protein binding / フォールディング / cellular response to heat / mRNA binding / ミトコンドリア / identical protein binding / 細胞核 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Peters C / Weinkauf S / Buchner J | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Phosphorylation activates the yeast small heat shock protein Hsp26 by weakening domain contacts in the oligomer ensemble. 著者: Moritz Mühlhofer / Carsten Peters / Thomas Kriehuber / Marina Kreuzeder / Pamina Kazman / Natalia Rodina / Bernd Reif / Martin Haslbeck / Sevil Weinkauf / Johannes Buchner / 要旨: Hsp26 is a small heat shock protein (sHsp) from S. cerevisiae. Its chaperone activity is activated by oligomer dissociation at heat shock temperatures. Hsp26 contains 9 phosphorylation sites in ...Hsp26 is a small heat shock protein (sHsp) from S. cerevisiae. Its chaperone activity is activated by oligomer dissociation at heat shock temperatures. Hsp26 contains 9 phosphorylation sites in different structural elements. Our analysis of phospho-mimetic mutations shows that phosphorylation activates Hsp26 at permissive temperatures. The cryo-EM structure of the Hsp26 40mer revealed contacts between the conserved core domain of Hsp26 and the so-called thermosensor domain in the N-terminal part of the protein, which are targeted by phosphorylation. Furthermore, several phosphorylation sites in the C-terminal extension, which link subunits within the oligomer, are sensitive to the introduction of negative charges. In all cases, the intrinsic inhibition of chaperone activity is relieved and the N-terminal domain becomes accessible for substrate protein binding. The weakening of domain interactions within and between subunits by phosphorylation to activate the chaperone activity in response to proteotoxic stresses independent of heat stress could be a general regulation principle of sHsps. #1: ジャーナル: Structure / 年: 2006 タイトル: Multiple distinct assemblies reveal conformational flexibility in the small heat shock protein Hsp26. 著者: White HE / Orlova EV / Chen S / Wang L / Ignatiou A / Gowen B / Stromer T / Franzmann TM / Haslbeck M / Buchner J / Saibil HR | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_13748.map.gz | 39.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-13748-v30.xml emd-13748.xml | 13.9 KB 13.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_13748_fsc.xml | 13 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_13748.png | 71.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13748 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13748 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_13748.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Preliminary WT map of Hsp26 purified from yeast | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.33 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : 40mer complex of WT Hsp26
全体 | 名称: 40mer complex of WT Hsp26 |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: 40mer complex of WT Hsp26
超分子 | 名称: 40mer complex of WT Hsp26 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
組換発現 | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 組換株: JT(DIP) GPD26(A) / 組換プラスミド: pJV517 |
分子量 | 理論値: 955.2 KDa |
-分子 #1: Hsp26
分子 | 名称: Hsp26 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
組換発現 | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
配列 | 文字列: MSFNSPFFDF FDNINNEVDA FNRLLGEGGL RGYAPRRQLA NTPAKDSTGK EVARPNNYAG ALYDPRDET LDDWFDNDLS LFPSGFGFPR SVAVPVDILD HDNNYELKVV VPGVKSKKDI D IEYHQNKN QILVSGEIPS TLNEESKDKV KVKESSSGKF KRVITLPDYP ...文字列: MSFNSPFFDF FDNINNEVDA FNRLLGEGGL RGYAPRRQLA NTPAKDSTGK EVARPNNYAG ALYDPRDET LDDWFDNDLS LFPSGFGFPR SVAVPVDILD HDNNYELKVV VPGVKSKKDI D IEYHQNKN QILVSGEIPS TLNEESKDKV KVKESSSGKF KRVITLPDYP GVDADNIKAD YA NGVLTLT VPKLKPQKDG KNHVKKIEVS SQESWGN |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
---|---|
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 294 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm 最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm / 倍率(公称値): 105000 |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 実像数: 1170 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 140.0 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |