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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9j0o | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Arrested elongation complex of mammalian RNA polymerase II with nucleosome (AEC1-nuc) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | TRANSCRIPTION / RNA polymerase / NELF / nucleosome / DNA / RNA | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() NELF complex / NTRK3 as a dependence receptor / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / negative regulation of chromosome condensation / Barr body / DSIF complex / : / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / inner kinetochore / pericentric heterochromatin formation ...NELF complex / NTRK3 as a dependence receptor / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / negative regulation of chromosome condensation / Barr body / DSIF complex / : / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / inner kinetochore / pericentric heterochromatin formation / Formation of RNA Pol II elongation complex / Formation of the Early Elongation Complex / Transcriptional regulation by small RNAs / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / FGFR2 alternative splicing / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / mRNA Capping / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Estrogen-dependent gene expression / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA Splicing - Major Pathway / negative regulation of stem cell differentiation / muscle cell differentiation / nuclear lumen / positive regulation of DNA-templated transcription, elongation / oocyte maturation / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / nucleosomal DNA binding / transcription elongation-coupled chromatin remodeling / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / nucleus organization / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II complex binding / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / positive regulation of macroautophagy / negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / spermatid development / negative regulation of tumor necrosis factor-mediated signaling pathway / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / single fertilization / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / subtelomeric heterochromatin formation / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / negative regulation of megakaryocyte differentiation / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / protein localization to CENP-A containing chromatin / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA Polymerase II Transcription Elongation / Replacement of protamines by nucleosomes in the male pronucleus / transcription by RNA polymerase I / Formation of RNA Pol II elongation complex / CENP-A containing nucleosome / Packaging Of Telomere Ends / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected purine / Cleavage of the damaged purine / transcription-coupled nucleotide-excision repair / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected pyrimidine / Cleavage of the damaged pyrimidine / embryo implantation / DNA-directed RNA polymerase complex / telomere organization / Inhibition of DNA recombination at telomere / RNA Polymerase I Promoter Opening / Meiotic synapsis / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / Regulation of endogenous retroelements by the Human Silencing Hub (HUSH) complex / SUMOylation of chromatin organization proteins / DNA methylation / Condensation of Prophase Chromosomes / Chromatin modifications during the maternal to zygotic transition (MZT) / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / HCMV Late Events / ERCC6 (CSB) and EHMT2 (G9a) positively regulate rRNA expression / innate immune response in mucosa / PRC2 methylates histones and DNA / Regulation of endogenous retroelements by KRAB-ZFP proteins / Defective pyroptosis 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Naganuma, M. / Kujirai, T. / Ehara, H. / Uejima, T. / Ito, T. / Goto, M. / Aoki, M. / Henmi, M. / Miyamoto-Kohno, S. / Shirouzu, M. ...Naganuma, M. / Kujirai, T. / Ehara, H. / Uejima, T. / Ito, T. / Goto, M. / Aoki, M. / Henmi, M. / Miyamoto-Kohno, S. / Shirouzu, M. / Kurumizaka, H. / Sekine, S. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural insights into promoter-proximal pausing of RNA polymerase II at +1 nucleosome. 著者: Masahiro Naganuma / Tomoya Kujirai / Haruhiko Ehara / Tamami Uejima / Tomoko Ito / Mie Goto / Mari Aoki / Masami Henmi / Sayako Miyamoto-Kohno / Mikako Shirouzu / Hitoshi Kurumizaka / Shun-Ichi Sekine / ![]() 要旨: The metazoan transcription elongation complex (EC) of RNA polymerase II (RNAPII) generally stalls between the transcription start site and the first (+1) nucleosome. This promoter-proximal pausing ...The metazoan transcription elongation complex (EC) of RNA polymerase II (RNAPII) generally stalls between the transcription start site and the first (+1) nucleosome. This promoter-proximal pausing involves negative elongation factor (NELF), 5,6-dichloro-1-β-d-ribobenzimidazole sensitivity-inducing factor (DSIF), and transcription elongation factor IIS (TFIIS) and is critical for subsequent productive transcription elongation. However, the detailed pausing mechanism and the involvement of the +1 nucleosome remain enigmatic. Here, we report cryo-electron microscopy structures of ECs stalled on nucleosomal DNA. In the absence of TFIIS, the EC is backtracked/arrested due to conflicts between NELF and the nucleosome. We identified two alternative binding modes of NELF, one of which reveals a critical contact with the downstream DNA through the conserved NELF-E basic helix. Upon binding with TFIIS, the EC progressed to the nucleosome to establish a paused EC with a partially unwrapped nucleosome. This paused EC strongly restricts EC progression further downstream. These structures illuminate the mechanism of RNAPII pausing/stalling at the +1 nucleosome. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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その他 | ![]() |
-検証レポート
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 61059MC ![]() 9j0nC ![]() 9j0pC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-DNA-directed RNA polymerase ... , 9種, 9分子 ABCDEFGIK
#1: タンパク質 | 分子量: 217450.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#2: タンパク質 | 分子量: 134041.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 30997.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#4: タンパク質 | 分子量: 16331.255 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#5: タンパク質 | 分子量: 24644.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 14477.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#7: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 2種, 2分子 HJ
#8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 5種, 9分子 Laebfcgdh
#12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||||
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#18: タンパク質 | 分子量: 15360.983 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: H3-3A, H3.3A, H3F3, H3F3A, PP781, H3-3B, H3.3B, H3F3B 発現宿主: ![]() ![]() #19: タンパク質 | 分子量: 11394.426 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: HIST1H4A, H4/A, H4FA, HIST1H4B, H4/I, H4FI, HIST1H4C, H4/G, H4FG, HIST1H4D, H4/B, H4FB, HIST1H4E, H4/J, H4FJ, HIST1H4F, H4/C, H4FC, HIST1H4H, H4/H, H4FH, HIST1H4I, H4/M, H4FM, HIST1H4J, ...遺伝子: HIST1H4A, H4/A, H4FA, HIST1H4B, H4/I, H4FI, HIST1H4C, H4/G, H4FG, HIST1H4D, H4/B, H4FB, HIST1H4E, H4/J, H4FJ, HIST1H4F, H4/C, H4FC, HIST1H4H, H4/H, H4FH, HIST1H4I, H4/M, H4FM, HIST1H4J, H4/E, H4FE, HIST1H4K, H4/D, H4FD, HIST1H4L, H4/K, H4FK, HIST2H4A, H4/N, H4F2, H4FN, HIST2H4, HIST2H4B, H4/O, H4FO, HIST4H4 発現宿主: ![]() ![]() #20: タンパク質 | 分子量: 14165.551 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #21: タンパク質 | 分子量: 13935.239 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
-Transcription elongation factor ... , 2種, 2分子 YZ
#13: タンパク質 | 分子量: 13297.278 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
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#14: タンパク質 | 分子量: 123297.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#15: DNA鎖 | 分子量: 61381.906 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
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#17: DNA鎖 | 分子量: 60869.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#16: RNA鎖 | 分子量: 5037.968 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
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-Negative elongation factor ... , 4種, 4分子 UWVX
#22: タンパク質 | 分子量: 57343.598 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9H3P2 |
---|---|
#23: タンパク質 | 分子量: 68547.758 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q8IXH7 |
#24: タンパク質 | 分子量: 65779.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q8WX92 |
#25: タンパク質 | 分子量: 45852.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: P18615 |
-非ポリマー , 2種, 10分子 


#26: 化合物 | ChemComp-ZN / #27: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 57 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 24102 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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