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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9ghh | ||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Staphylococcus aureus FusB bound to the large subunit of the S. aureus 70S ribosome (FusB-Sa70S:LSU) | ||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | RIBOSOME / fusidic acid / EF-G / antibiotic / FusB | ||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() large ribosomal subunit / transferase activity / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding ...large ribosomal subunit / transferase activity / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / RNA binding / zinc ion binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Gonzalez-Lopez, A. / Selmer, M. | ||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural mechanism of FusB-mediated rescue from fusidic acid inhibition of protein synthesis. 著者: Adrián González-López / Xueliang Ge / Daniel S D Larsson / Carina Sihlbom Wallem / Suparna Sanyal / Maria Selmer / ![]() 要旨: The antibiotic resistance protein FusB rescues protein synthesis from inhibition by fusidic acid (FA), which locks elongation factor G (EF-G) to the ribosome after GTP hydrolysis. Here, we present ...The antibiotic resistance protein FusB rescues protein synthesis from inhibition by fusidic acid (FA), which locks elongation factor G (EF-G) to the ribosome after GTP hydrolysis. Here, we present time-resolved single-particle cryo-EM structures explaining the mechanism of FusB-mediated rescue. FusB binds to the FA-trapped EF-G on the ribosome, causing large-scale conformational changes of EF-G that break interactions with the ribosome, tRNA, and mRNA. This leads to dissociation of EF-G from the ribosome, followed by FA release. We also observe two independent binding sites of FusB on the classical-state ribosome, overlapping with the binding site of EF-G to each of the ribosomal subunits, yet not inhibiting tRNA delivery. The affinity of FusB to the ribosome and the concentration of FusB in S. aureus during FusB-mediated resistance support that direct binding of FusB to ribosomes could occur in the cell. Our results reveal an intricate resistance mechanism involving specific interactions of FusB with both EF-G and the ribosome, and a non-canonical release pathway of EF-G. | ||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 3.7 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 51357MC ![]() 9ghaC ![]() 9ghbC ![]() 9ghcC ![]() 9ghdC ![]() 9gheC ![]() 9ghfC ![]() 9ghgC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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非結晶学的対称性 (NCS) | NCSドメイン:
NCSドメイン領域: Component-ID: 1 / Ens-ID: 1 / Beg auth comp-ID: G / Beg label comp-ID: G / End auth comp-ID: C / End label comp-ID: C / Auth seq-ID: 2 - 75 / Label seq-ID: 2 - 76
NCSアンサンブル: (詳細: Local NCS retraints between domains: 1 2) |
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要素
+50S ribosomal protein ... , 26種, 26分子 1234789GHIJKMNOPQRSTUVWXYZ
-Large ribosomal subunit protein ... , 2種, 2分子 56
#5: タンパク質 | 分子量: 6500.609 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FZF1 |
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#6: タンパク質・ペプチド | 分子量: 5944.937 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FYU6 |
-RNA鎖 , 5種, 6分子 ABDFab
#10: RNA鎖 | 分子量: 946782.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() | ||||
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#11: RNA鎖 | 分子量: 36974.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: CP000253.1 | ||||
#13: RNA鎖 | 分子量: 24802.785 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #33: RNA鎖 | | 分子量: 503117.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: CP000253 #34: RNA鎖 | | 分子量: 7889.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 2種, 2分子 Ck
#12: タンパク質 | 分子量: 25225.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: far1, fusB / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#43: タンパク質 | 分子量: 11598.503 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: A5IV35 |
-30S ribosomal protein ... , 19種, 19分子 cdefghijlmnopqrstuv
#35: タンパク質 | 分子量: 29136.369 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FZ25 |
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#36: タンパク質 | 分子量: 24143.867 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW12 |
#37: タンパク質 | 分子量: 23051.416 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FXK6 |
#38: タンパク質 | 分子量: 17770.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW23 |
#39: タンパク質 | 分子量: 11613.146 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2G113 |
#40: タンパク質 | 分子量: 17826.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: P48940 |
#41: タンパク質 | 分子量: 14854.315 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW20 |
#42: タンパク質 | 分子量: 14856.987 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW39 |
#44: タンパク質 | 分子量: 13907.978 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW31 |
#45: タンパク質 | 分子量: 15320.870 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: P0A0H0 |
#46: タンパク質 | 分子量: 13747.919 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW30 |
#47: タンパク質 | 分子量: 7317.769 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW19 |
#48: タンパク質 | 分子量: 10634.330 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2G2Q1 |
#49: タンパク質 | 分子量: 10253.886 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FZ45 |
#50: タンパク質 | 分子量: 10196.888 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW15 |
#51: タンパク質 | 分子量: 9332.018 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2G111 |
#52: タンパク質 | 分子量: 10639.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FW10 |
#53: タンパク質 | 分子量: 9039.472 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FXY6 |
#54: タンパク質 | 分子量: 6994.267 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: Q2FXZ7 |
-非ポリマー , 3種, 151分子 




#55: 化合物 | ChemComp-ZN / #56: 化合物 | ChemComp-MG / #57: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 2.5 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 700 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 2.14 sec. / 電子線照射量: 28.14 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 10064 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: TFS Selectris / エネルギーフィルタースリット幅: 10 eV |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 859410 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 15167 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 解像度: 2.7→2.7 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.813 / WRfactor Rwork: 0.398 / SU B: 15.093 / SU ML: 0.288 / Average fsc free: 0 / Average fsc overall: 0.733 / Average fsc work: 0.733 / ESU R: 0.291 / 詳細: Hydrogens have been added in their riding positions
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溶媒の処理 | 溶媒モデル: NONE | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 81.336 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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