+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9dtr | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structure of the yeast post-catalytic P complex spliceosome at 2.3 Angstrom resolution | ||||||
![]() |
| ||||||
![]() | SPLICING / spliceosome / snRNA / yeast / ribonucleoprotein complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() U2-type post-spliceosomal complex / spliceosomal complex disassembly / post-spliceosomal complex / mRNA branch site recognition / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / cellular bud site selection / pre-mRNA 3'-splice site binding / post-mRNA release spliceosomal complex / nuclear mRNA surveillance / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step ...U2-type post-spliceosomal complex / spliceosomal complex disassembly / post-spliceosomal complex / mRNA branch site recognition / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / cellular bud site selection / pre-mRNA 3'-splice site binding / post-mRNA release spliceosomal complex / nuclear mRNA surveillance / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / splicing factor binding / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding / snRNP binding / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / poly(U) RNA binding / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / spliceosomal complex assembly / mRNA 5'-splice site recognition / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA 3'-splice site recognition / DNA replication origin binding / Dual incision in TC-NER / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / protein K63-linked ubiquitination / U5 snRNA binding / DNA replication initiation / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / spliceosomal snRNP assembly / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / positive regulation of cell cycle / catalytic step 2 spliceosome / nuclear periphery / positive regulation of RNA splicing / spliceosomal complex / RING-type E3 ubiquitin transferase / mRNA splicing, via spliceosome / double-strand break repair via nonhomologous end joining / metallopeptidase activity / ubiquitin-protein transferase activity / ubiquitin protein ligase activity / chromosome, telomeric region / RNA helicase activity / RNA helicase / DNA repair / GTPase activity / mRNA binding / chromatin binding / chromatin / GTP binding / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / identical protein binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.31 Å | ||||||
![]() | Wilkinson, M.E. / Hoskins, A.A. | ||||||
資金援助 | ![]()
| ||||||
![]() | ![]() タイトル: Control of 3' splice site selection by the yeast splicing factor Fyv6. 著者: Katherine A Senn / Karli A Lipinski / Natalie J Zeps / Amory F Griffin / Max E Wilkinson / Aaron A Hoskins / ![]() ![]() 要旨: Pre-mRNA splicing is catalyzed in two steps: 5' splice site (SS) cleavage and exon ligation. A number of proteins transiently associate with spliceosomes to specifically impact these steps (1 and 2 ...Pre-mRNA splicing is catalyzed in two steps: 5' splice site (SS) cleavage and exon ligation. A number of proteins transiently associate with spliceosomes to specifically impact these steps (1 and 2 step factors). We recently identified Fyv6 (FAM192A in humans) as a 2 step factor in ; however, we did not determine how widespread Fyv6's impact is on the transcriptome. To answer this question, we have used RNA-seq to analyze changes in splicing. These results show that loss of Fyv6 results in activation of non-consensus, branch point (BP) proximal 3' SS transcriptome-wide. To identify the molecular basis of these observations, we determined a high-resolution cryo-EM structure of a yeast product complex spliceosome containing Fyv6 at 2.3 Å. The structure reveals that Fyv6 is the only 2 step factor that contacts the Prp22 ATPase and that Fyv6 binding is mutually exclusive with that of the 1 step factor Yju2. We then use this structure to dissect Fyv6 functional domains and interpret results of a genetic screen for suppressor mutations. The combined transcriptomic, structural, and genetic studies allow us to propose a model in which Yju2/Fyv6 exchange facilitates exon ligation and Fyv6 promotes usage of consensus, BP distal 3' SS. | ||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 2.4 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 1.8 MB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
---|
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 47157MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 256EI
#1: RNA鎖 | 分子量: 376267.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|---|
#2: RNA鎖 | 分子量: 68643.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#3: RNA鎖 | 分子量: 35883.176 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#7: RNA鎖 | 分子量: 13440.030 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
#10: RNA鎖 | 分子量: 30200.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 19種, 19分子 ACGHJLMNOPRSTVZacsy
#4: タンパク質 | 分子量: 279867.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|---|
#5: タンパク質 | 分子量: 114174.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#8: タンパク質 | 分子量: 28073.836 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 67386.062 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 50771.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#13: タンパク質 | 分子量: 18484.502 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#14: タンパク質 | 分子量: 38486.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#15: タンパク質 | 分子量: 40988.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#16: タンパク質 | 分子量: 67837.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#17: タンパク質 | 分子量: 19975.195 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#18: タンパク質 | 分子量: 15793.596 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#19: タンパク質 | 分子量: 82555.859 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#20: タンパク質 | 分子量: 100344.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#21: タンパク質 | 分子量: 130171.359 Da / 分子数: 1 / Mutation: S635A / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: PRP22, YER013W / 発現宿主: ![]() ![]() |
#24: タンパク質 | 分子量: 15992.927 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 28414.391 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#27: タンパク質 | 分子量: 44722.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#35: タンパク質 | 分子量: 20741.455 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#37: タンパク質 | 分子量: 24850.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 3種, 4分子 DKbk
#6: タンパク質 | 分子量: 20066.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|---|
#12: タンパク質 | 分子量: 42548.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#26: タンパク質 | 分子量: 22426.990 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 WY
#22: タンパク質 | 分子量: 27232.252 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|---|
#23: タンパク質 | 分子量: 12850.944 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 dnepfqgrhljm
#28: タンパク質 | 分子量: 11240.139 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #29: タンパク質 | 分子量: 10385.098 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #30: タンパク質 | 分子量: 9669.945 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #31: タンパク質 | 分子量: 8490.809 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #32: タンパク質 | 分子量: 16296.798 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #33: タンパク質 | 分子量: 12876.066 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|
-Pre-mRNA-processing factor ... , 2種, 5分子 otuvw
#34: タンパク質 | 分子量: 52128.762 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|---|
#36: タンパク質 | 分子量: 56629.777 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-非ポリマー , 6種, 17分子 










#38: 化合物 | #39: 化合物 | ChemComp-K / #40: 化合物 | #41: 化合物 | ChemComp-GTP / | #42: 化合物 | ChemComp-ZN / #43: 水 | ChemComp-HOH / | |
---|
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
---|---|
Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: Yeast post-catalytic P complex spliceosome / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#37 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
分子量 | 値: 2.27 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||
緩衝液成分 |
| ||||||||||||||||
試料 | 濃度: 0.1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3100 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1300 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.72 sec. / 電子線照射量: 40 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 51113 |
-
解析
EMソフトウェア |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1820457 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.31 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 209005 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL 詳細: After fixing in ISOLDE, the model was refined in phenix.real_space_refine with the following non-default flags: refinement { run = *minimization_global rigid_body local_grid_search morphing ...詳細: After fixing in ISOLDE, the model was refined in phenix.real_space_refine with the following non-default flags: refinement { run = *minimization_global rigid_body local_grid_search morphing simulated_annealing *adp } reference_model { enabled = True use_starting_model_as_reference = True fix_outliers = False strict_rotamer_matching = True } pdb_interpretation { reference_coordinate_restraints { enabled = True exclude_outliers = False top_out = True } automatic_linking { link_metals = True } peptide_link { restrain_rama_outliers = False restrain_rama_allowed = False } ramachandran_plot_restraints { enabled = False } } | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 6EXN Accession code: 6EXN / Source name: PDB / タイプ: experimental model |