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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9dgy | ||||||
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タイトル | Mycobacterium tuberculosis UvrD1 monomer-DNA complex | ||||||
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![]() | MOTOR PROTEIN/DNA / DNA Helicase / DNA Translocase / ATPase / MOTOR PROTEIN / MOTOR PROTEIN-DNA complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of strand invasion / DNA helicase complex / UV protection / recombinational repair / DNA 3'-5' helicase / dATP binding / 3'-5' DNA helicase activity / ATP-dependent activity, acting on DNA / peptidoglycan-based cell wall / double-strand break repair ...negative regulation of strand invasion / DNA helicase complex / UV protection / recombinational repair / DNA 3'-5' helicase / dATP binding / 3'-5' DNA helicase activity / ATP-dependent activity, acting on DNA / peptidoglycan-based cell wall / double-strand break repair / DNA replication / magnesium ion binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7 Å | ||||||
![]() | Chadda, A. / Galburt, E.A. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis for dimerization and activation of UvrD-family helicases. 著者: Ankita Chadda / Binh Nguyen / Timothy M Lohman / Eric A Galburt / ![]() 要旨: UvrD-family helicases are superfamily 1A motor proteins that function during DNA replication, recombination, repair, and transcription. UvrD family monomers translocate along single-stranded (ss) DNA ...UvrD-family helicases are superfamily 1A motor proteins that function during DNA replication, recombination, repair, and transcription. UvrD family monomers translocate along single-stranded (ss) DNA but need to be activated by dimerization to unwind DNA in the absence of force or accessory factors. However, prior structural studies have only revealed monomeric complexes. Here, we report the first structures of a dimeric UvrD-family helicase, UvrD1, both free and bound to a DNA junction. In each structure, the dimer interface occurs between the 2B subdomains of each subunit. The apo UvrD1 dimer is observed in symmetric compact and extended forms indicating substantial flexibility. This symmetry is broken in the DNA-bound dimer complex with leading and trailing subunits adopting distinct conformations. Biochemical experiments reveal that the UvrD dimer shares the same 2B-2B interface. In contrast to the dimeric structures, an inactive, autoinhibited UvrD1 DNA-bound monomer structure reveals 2B subdomain-DNA contacts that are likely inhibitory. The major reorientation of the 2B subdomains that occurs upon UvrD1 dimerization prevents these duplex DNA interactions, thus relieving the autoinhibition. These structures reveal that the 2B subdomain serves a major regulatory role rather than participating directly in DNA unwinding. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 151.9 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 960.3 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 992.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 39.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 58.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 46850MC ![]() 9dciC ![]() 9desC C: 同じ文献を引用 ( M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 85154.898 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: uvrD1, ivrd, pcrA, Rv0949, MTCY10D7.25c / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#2: DNA鎖 | 分子量: 5422.508 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
#3: DNA鎖 | 分子量: 8655.542 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: UvrD1 monomer-DNA junction complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 0.01 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 84 K / 最低温度: 82 K |
撮影 | 平均露光時間: 7.27 sec. / 電子線照射量: 59 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 実像数: 4999 |
電子光学装置 | 球面収差補正装置: Microscope is outfitted with a Cs image corrector with two hexapole elements |
画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 |
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解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.21.1_5286: / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 713562 | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 282302 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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