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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8x9k | ||||||
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タイトル | Cte_Branching,Ca,inactive | ||||||
![]() | RNA (808-MER) | ||||||
![]() | RNA / SPLICING / CP group ii intron / Cte / back-splicing / circular RNA / Cryo-EM | ||||||
機能・相同性 | : / RNA / RNA (> 10) / RNA (> 100)![]() | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.63 Å | ||||||
![]() | Ling, X.B. / Ma, J.B. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structures of a natural circularly permuted group II intron reveal mechanisms of branching and backsplicing. 著者: Xiaobin Ling / Yuqi Yao / Jinbiao Ma / ![]() ![]() 要旨: Circularly permuted (CP) group II introns, identified in various bacteria phyla, swap domains D5 and D6 near the 5' end and have reversed splice sites (SSs), leading to backsplicing and circular RNA ...Circularly permuted (CP) group II introns, identified in various bacteria phyla, swap domains D5 and D6 near the 5' end and have reversed splice sites (SSs), leading to backsplicing and circular RNA formation. In this study, we present multiple high-resolution cryo-electron microscopy structures of a natural CP group II intron from Comamonas testosteroni KF-1 (Cte 1), elucidating the molecular mechanisms of branching and backsplicing. During branching, the 5' SS is positioned by an auxiliary sequence (AUX)-enhanced interaction between the exon-binding site and intron-binding site (IBS) and stacks on the branch-site adenosine within D6, allowing the attacking 2'-OH group to coordinate with a metal ion in the active center. In backsplicing, the 3' SS is aligned with the branching step, leaving IBS in the active center, stabilized by base pairing with the AUX, which enables the free 3'-end hydroxyl group to directly attack the scissile phosphate of 3' SS. Furthermore, a groove in Cte 1 may stabilize the circular RNA. These findings highlight a conserved catalytic mechanism for canonical group II introns, albeit facilitated by the versatile AUX, opening avenues for designing potent ribozymes producing circular RNAs. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 497.6 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 306.9 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 38173MC ![]() 8x9lC ![]() 8x9mC ![]() 8x9nC ![]() 8x9oC ![]() 8x9qC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: RNA鎖 | 分子量: 262367.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() | ||||||||
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#2: 化合物 | ChemComp-CA / #3: 化合物 | ChemComp-K / #4: 水 | ChemComp-HOH / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Cte-Branching / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1 / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm |
撮影 | 電子線照射量: 53.8 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 2.63 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1847796 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 78.75 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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