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万見
- PDB-8wd8: Cryo-EM structure of TtdAgo-guide DNA-target DNA complex -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8wd8
タイトルCryo-EM structure of TtdAgo-guide DNA-target DNA complex
要素
  • Argonaute family protein
  • Guide DNA
  • Target DNA
キーワードDNA BINDING PROTEIN/DNA / DNA BINDING PROTEIN-DNA COMPLEX
機能・相同性
機能・相同性情報


: / Argonaute, N-terminal domain / Argonaute PAZ domain, archaea / PAZ domain / Piwi domain profile. / Piwi domain / Piwi domain / Piwi / PAZ domain superfamily / PAZ domain profile. ...: / Argonaute, N-terminal domain / Argonaute PAZ domain, archaea / PAZ domain / Piwi domain profile. / Piwi domain / Piwi domain / Piwi / PAZ domain superfamily / PAZ domain profile. / PAZ domain / Ribonuclease H superfamily / Ribonuclease H-like superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
DNA / DNA (> 10) / Argonaute family protein
類似検索 - 構成要素
生物種Thermococcus thioreducens (古細菌)
Thermus thermophilus (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å
データ登録者Zhuang, L.
資金援助1件
組織認可番号国
Not funded
引用ジャーナル: Mol Cell / 年: 2024
タイトル: Molecular mechanism for target recognition, dimerization, and activation of Pyrococcus furiosus Argonaute.
著者: Longyu Wang / Wanping Chen / Chendi Zhang / Xiaochen Xie / Fuyong Huang / Miaomiao Chen / Wuxiang Mao / Na Yu / Qiang Wei / Lixin Ma / Zhuang Li /
要旨: The Argonaute nuclease from the thermophilic archaeon Pyrococcus furiosus (PfAgo) contributes to host defense and represents a promising biotechnology tool. Here, we report the structure of a PfAgo- ...The Argonaute nuclease from the thermophilic archaeon Pyrococcus furiosus (PfAgo) contributes to host defense and represents a promising biotechnology tool. Here, we report the structure of a PfAgo-guide DNA-target DNA ternary complex at the cleavage-compatible state. The ternary complex is predominantly dimerized, and the dimerization is solely mediated by PfAgo at PIWI-MID, PIWI-PIWI, and PAZ-N interfaces. Additionally, PfAgo accommodates a short 14-bp guide-target DNA duplex with a wedge-type N domain and specifically recognizes 5'-phosphorylated guide DNA. In contrast, the PfAgo-guide DNA binary complex is monomeric, and the engagement of target DNA with 14-bp complementarity induces sufficient dimerization and activation of PfAgo, accompanied by movement of PAZ and N domains. A closely related Argonaute from Thermococcus thioreducens adopts a similar dimerization configuration with an additional zinc finger formed at the dimerization interface. Dimerization of both Argonautes stabilizes the catalytic loops, highlighting the important role of Argonaute dimerization in the activation and target cleavage.
履歴
登録2023年9月14日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年1月31日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年1月31日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年1月31日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年1月31日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
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改定 1.02024年1月31日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
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改定 1.02024年1月31日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年2月14日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author / Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title
改定 1.22024年2月28日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last
改定 1.32024年5月1日Group: Source and taxonomy / カテゴリ: entity_src_gen
Item: _entity_src_gen.pdbx_gene_src_gene / _entity_src_gen.pdbx_gene_src_ncbi_taxonomy_id / _entity_src_gen.pdbx_gene_src_scientific_name
改定 1.42025年7月2日Group: Data collection / Structure summary / カテゴリ: em_admin / em_software / pdbx_entry_details
Item: _em_admin.last_update / _em_software.name / _pdbx_entry_details.has_protein_modification
改定 1.12025年7月2日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Data processing / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: em_admin / em_software / Data content type: EM metadata / EM metadata / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Argonaute family protein
T: Target DNA
G: Guide DNA
B: Argonaute family protein
U: Target DNA
H: Guide DNA
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)195,38913
ポリマ－195,1786
非ポリマー2117
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質 Argonaute family protein


分子量: 87488.398 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Thermococcus thioreducens (古細菌)
発現宿主: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌)
参照: UniProt: A0A0Q2M2Z1
#2: DNA鎖 Target DNA


分子量: 5051.302 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Thermus thermophilus (バクテリア)
#3: DNA鎖 Guide DNA


分子量: 5049.273 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Thermus thermophilus (バクテリア)
#4: 化合物 ChemComp-ZN / ZINC ION


分子量: 65.409 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: Zn / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#5: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1Cryo-EM structure of TtdAgo-guide DNA-target DNA complexCOMPLEX#1-#30MULTIPLE SOURCES
2DNA binding proteinCOMPLEX#11RECOMBINANT
3DNACOMPLEX#2-#31SYNTHETIC
由来(天然)生物種: Thermus thermophilus (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2200 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1200 nm
撮影電子線照射量: 54 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
3次元再構成解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 629194 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00714071
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.71119281
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d15.4762281
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0482182
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0082209

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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