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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8t08 | ||||||
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タイトル | Preholo-Proteasome from Pre1-1 Pre4-1 Double Mutant | ||||||
要素 |
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キーワード | HYDROLASE / Preholo-proteasome / core particle | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of proteasome core complex assembly / proteasome core complex assembly / nuclear outer membrane-endoplasmic reticulum membrane network / Cross-presentation of soluble exogenous antigens (endosomes) / TNFR2 non-canonical NF-kB pathway / proteasomal ubiquitin-independent protein catabolic process / Ubiquitin Mediated Degradation of Phosphorylated Cdc25A / Regulation of PTEN stability and activity / KEAP1-NFE2L2 pathway / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 ...regulation of proteasome core complex assembly / proteasome core complex assembly / nuclear outer membrane-endoplasmic reticulum membrane network / Cross-presentation of soluble exogenous antigens (endosomes) / TNFR2 non-canonical NF-kB pathway / proteasomal ubiquitin-independent protein catabolic process / Ubiquitin Mediated Degradation of Phosphorylated Cdc25A / Regulation of PTEN stability and activity / KEAP1-NFE2L2 pathway / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 / Neddylation / FBXL7 down-regulates AURKA during mitotic entry and in early mitosis / Orc1 removal from chromatin / MAPK6/MAPK4 signaling / proteasome storage granule / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / endopeptidase activator activity / proteasome assembly / proteasome endopeptidase complex / proteasome core complex, beta-subunit complex / proteasome core complex, alpha-subunit complex / Ub-specific processing proteases / threonine-type endopeptidase activity / Neutrophil degranulation / proteasome complex / peroxisome / ubiquitin-dependent protein catabolic process / proteasome-mediated ubiquitin-dependent protein catabolic process / endopeptidase activity / mRNA binding / DNA damage response / endoplasmic reticulum membrane / mitochondrion / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
データ登録者 | Walsh Jr., R.M. / Rawson, S. / Schnell, H. / Velez, B. / Hanna, J. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2023 タイトル: Structure of the preholoproteasome reveals late steps in proteasome core particle biogenesis. 著者: Richard M Walsh / Shaun Rawson / Helena M Schnell / Benjamin Velez / Tamayanthi Rajakumar / John Hanna / 要旨: Assembly of the proteasome's core particle (CP), a barrel-shaped chamber of four stacked rings, requires five chaperones and five subunit propeptides. Fusion of two half-CP precursors yields a ...Assembly of the proteasome's core particle (CP), a barrel-shaped chamber of four stacked rings, requires five chaperones and five subunit propeptides. Fusion of two half-CP precursors yields a complete structure but remains immature until active site maturation. Here, using Saccharomyces cerevisiae, we report a high-resolution cryogenic electron microscopy structure of preholoproteasome, a post-fusion assembly intermediate. Our data reveal how CP midline-spanning interactions induce local changes in structure, facilitating maturation. Unexpectedly, we find that cleavage may not be sufficient for propeptide release, as residual interactions with chaperones such as Ump1 hold them in place. We evaluated previous models proposing that dynamic conformational changes in chaperones drive CP fusion and autocatalytic activation by comparing preholoproteasome to pre-fusion intermediates. Instead, the data suggest a scaffolding role for the chaperones Ump1 and Pba1/Pba2. Our data clarify key aspects of CP assembly, suggest that undiscovered mechanisms exist to explain CP fusion/activation, and have relevance for diseases of defective CP biogenesis. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8t08.cif.gz | 1.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8t08.ent.gz | 1.1 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8t08.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8t08_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8t08_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8t08_validation.xml.gz | 170.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8t08_validation.cif.gz | 269.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/t0/8t08 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/t0/8t08 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 40938MC 8t0mC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-Proteasome subunit alpha type- ... , 7種, 14分子 ARBSCTDUEVFWGX
#1: タンパク質 | 分子量: 28033.830 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P21243, proteasome endopeptidase complex #2: タンパク質 | 分子量: 27191.828 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P23639, proteasome endopeptidase complex #3: タンパク質 | 分子量: 28748.230 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P23638, proteasome endopeptidase complex #4: タンパク質 | 分子量: 28478.111 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P40303, proteasome endopeptidase complex #5: タンパク質 | 分子量: 28649.086 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P32379, proteasome endopeptidase complex #6: タンパク質 | 分子量: 25634.000 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P40302, proteasome endopeptidase complex #7: タンパク質 | 分子量: 31575.068 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P21242, proteasome endopeptidase complex |
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-タンパク質 , 3種, 6分子 HYOfPg
#8: タンパク質 | 分子量: 16777.766 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P38293 #15: タンパク質 | 分子量: 30718.074 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: Q05778 #16: タンパク質 | 分子量: 30762.895 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P36040 |
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-Proteasome subunit beta type- ... , 7種, 14分子 IZJaKbLcMdNeQh
#9: タンパク質 | 分子量: 28299.889 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P25043, proteasome endopeptidase complex #10: タンパク質 | 分子量: 22627.842 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P25451, proteasome endopeptidase complex #11: タンパク質 | 分子量: 22605.771 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P22141 #12: タンパク質 | 分子量: 31670.539 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P30656, proteasome endopeptidase complex #13: タンパク質 | 分子量: 26905.076 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P23724, proteasome endopeptidase complex #14: タンパク質 | 分子量: 23573.604 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P38624, proteasome endopeptidase complex #17: タンパク質 | 分子量: 27716.293 Da / 分子数: 2 Mutation: Deletion of 15 C-terminal residues 252-266 (WDFAKDIKGYGTQKI) 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508/ S288c / 参照: UniProt: P30657 |
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-詳細
Has protein modification | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Preholo-Proteasome from Pre1-1 Pre4-1 Double Mutant / タイプ: COMPLEX 詳細: Pre1-1 mutation is S142F in Proteasome subunit beta type-4. Pre4-1 Mutation is the deletion of the last 15 residues from the C-terminus of Proteasome subunit beta type-7. This double mutation ...詳細: Pre1-1 mutation is S142F in Proteasome subunit beta type-4. Pre4-1 Mutation is the deletion of the last 15 residues from the C-terminus of Proteasome subunit beta type-7. This double mutation allows for the accumulation of a population of Preholo-Proteasome. This late stage 20S assembley intermediate includes two copies of chaperones UMP1 and PBA1 and 2 in addition to all 28 subunits of the 20S core particle. Entity ID: all / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.918 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 株: ATCC 204508 / S288c | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: Fluorinated Fos-Choline was added to the sample immediately prior to deposition on a grid for plunge freezing. | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 2.4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: PELCO easiGLOW / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 295.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 倍率(補正後): 47169 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 3.8 sec. / 電子線照射量: 54.3 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 33116 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 25 eV |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 3905259 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 68930 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL |