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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qoz | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | Cryo-EM Structure of Pre-B+5'ss+ATPgammaS Complex (core part) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / spliceosome | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / R-loop processing / box C/D sno(s)RNA binding / dense fibrillar component ...spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / R-loop processing / box C/D sno(s)RNA binding / dense fibrillar component / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / box C/D methylation guide snoRNP complex / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / RNA splicing, via transesterification reactions / U2-type catalytic step 1 spliceosome / snRNP binding / U4 snRNA binding / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type spliceosomal complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / box C/D snoRNP assembly / U4 snRNP / U2 snRNP / U3 snoRNA binding / U2-type prespliceosome / rRNA modification in the nucleus and cytosol / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA Splicing - Minor Pathway / mRNA 3'-splice site recognition / MLL1 complex / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / U5 snRNA binding / protein deubiquitination / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / single fertilization / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / spliceosomal snRNP assembly / ribonucleoprotein complex binding / RNA processing / U1 snRNA binding / Cajal body / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / maturation of SSU-rRNA / response to cocaine / spliceosomal complex / small-subunit processome / helicase activity / mRNA splicing, via spliceosome / cellular response to xenobiotic stimulus / mRNA processing / osteoblast differentiation / cellular response to tumor necrosis factor / cellular response to lipopolysaccharide / ATPase binding / ribosomal small subunit biogenesis / protein-macromolecule adaptor activity / ubiquitinyl hydrolase 1 / RNA helicase activity / hydrolase activity / nuclear speck / cilium / ciliary basal body / RNA helicase / cell division / intracellular membrane-bounded organelle / GTPase activity / mRNA binding / centrosome / chromatin / GTP binding / nucleolus / Golgi apparatus / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / protein-containing complex / ATP hydrolysis activity / RNA binding / extracellular exosome / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / nucleus / membrane / plasma membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Zhang, Z. / Kumar, V. / Dybkov, O. / Will, C.L. / Zhong, J. / Ludwig, S. / Urlaub, H. / Kastner, B. / Stark, H. / Luehrmann, R. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024タイトル: Structural insights into the cross-exon to cross-intron spliceosome switch. 著者: Zhenwei Zhang / Vinay Kumar / Olexandr Dybkov / Cindy L Will / Jiayun Zhong / Sebastian E J Ludwig / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Holger Stark / Reinhard Lührmann / ![]() 要旨: Early spliceosome assembly can occur through an intron-defined pathway, whereby U1 and U2 small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs) assemble across the intron. Alternatively, it can occur ...Early spliceosome assembly can occur through an intron-defined pathway, whereby U1 and U2 small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs) assemble across the intron. Alternatively, it can occur through an exon-defined pathway, whereby U2 binds the branch site located upstream of the defined exon and U1 snRNP interacts with the 5' splice site located directly downstream of it. The U4/U6.U5 tri-snRNP subsequently binds to produce a cross-intron (CI) or cross-exon (CE) pre-B complex, which is then converted to the spliceosomal B complex. Exon definition promotes the splicing of upstream introns and plays a key part in alternative splicing regulation. However, the three-dimensional structure of exon-defined spliceosomal complexes and the molecular mechanism of the conversion from a CE-organized to a CI-organized spliceosome, a pre-requisite for splicing catalysis, remain poorly understood. Here cryo-electron microscopy analyses of human CE pre-B complex and B-like complexes reveal extensive structural similarities with their CI counterparts. The results indicate that the CE and CI spliceosome assembly pathways converge already at the pre-B stage. Add-back experiments using purified CE pre-B complexes, coupled with cryo-electron microscopy, elucidate the order of the extensive remodelling events that accompany the formation of B complexes and B-like complexes. The molecular triggers and roles of B-specific proteins in these rearrangements are also identified. We show that CE pre-B complexes can productively bind in trans to a U1 snRNP-bound 5' splice site. Together, our studies provide new mechanistic insights into the CE to CI switch during spliceosome assembly and its effect on pre-mRNA splice site pairing at this stage. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8qoz.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8qoz.ent.gz | 813 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8qoz.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8qoz_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8qoz_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8qoz_validation.xml.gz | 143.5 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8qoz_validation.cif.gz | 226.8 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qo/8qoz ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qo/8qoz | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 18542MC ![]() 8qp8C ![]() 8qp9C ![]() 8qpaC ![]() 8qpbC ![]() 8qpeC ![]() 8qpkC ![]() 8qxdC ![]() 8qzsC ![]() 8r08C ![]() 8r09C ![]() 8r0aC ![]() 8r0bC ![]() 8rm5C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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要素
-タンパク質 , 10種, 10分子 BGNAUSCMD7
| #1: タンパク質 | 分子量: 18527.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75643, RNA helicase |
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 95785.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BUQ8 |
| #6: タンパク質 | 分子量: 107092.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O94906 |
| #7: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 |
| #8: タンパク質 | 分子量: 65481.426 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q53GS9, ubiquitinyl hydrolase 1 |
| #9: タンパク質 | 分子量: 90414.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43290 |
| #10: タンパク質 | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 |
| #11: タンパク質 | 分子量: 14191.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55769 |
| #12: タンパク質 | 分子量: 16807.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P83876 |
| #15: タンパク質 | 分子量: 88991.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15459 |
-U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein ... , 3種, 3分子 JLF
| #3: タンパク質 | 分子量: 77669.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43395 |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 55528.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8WWY3 |
| #5: タンパク質 | 分子量: 58536.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43172 |
-RNA鎖 , 4種, 4分子 5z46
| #13: RNA鎖 | 分子量: 37254.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 20330981 |
|---|---|
| #14: RNA鎖 | 分子量: 3555.186 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
| #16: RNA鎖 | 分子量: 46181.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 340142 |
| #17: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: NR_004394.1 |
-非ポリマー , 1種, 1分子 
| #18: 化合物 | ChemComp-IHP / |
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
|---|---|
| Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: human spliceosomal pre-B+5'ss+ATPyS complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#17 / 由来: NATURAL |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 緩衝液 | pH: 7.9 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
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解析
| EMソフトウェア | 名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 411185 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
ドイツ, 1件
引用








































PDBj











































FIELD EMISSION GUN