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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8p98 | ||||||
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タイトル | BtuB3G3 bound to cyanocobalamin with ordered EL8 | ||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質) / Cyanocobalamin (シアノコバラミン) / transporter (運搬体タンパク質) / lipoprotein (リポタンパク質) / complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Protein of unknown function DUF5074 / Domain of unknown function (DUF5074) / Cytochrome cd1-nitrite reductase-like, haem d1 domain superfamily / Vitamin B12 transporter BtuB-like / TonB-dependent receptor, plug domain superfamily / TonB-dependent receptor, plug domain / TonB-dependent receptor-like, beta-barrel domain superfamily / TonB-dependent Receptor Plug Domain / Prokaryotic membrane lipoprotein lipid attachment site profile. / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily 類似検索 - ドメイン・相同性 | ||||||
生物種 | Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.97 Å | ||||||
データ登録者 | Silale, A. / Abellon-Ruiz, J. / van den Berg, B. | ||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: BtuB TonB-dependent transporters and BtuG surface lipoproteins form stable complexes for vitamin B uptake in gut Bacteroides. 著者: Javier Abellon-Ruiz / Kalyanashis Jana / Augustinas Silale / Andrew M Frey / Arnaud Baslé / Matthias Trost / Ulrich Kleinekathöfer / Bert van den Berg / 要旨: Vitamin B (cobalamin) is required for most human gut microbes, many of which are dependent on scavenging to obtain this vitamin. Since bacterial densities in the gut are extremely high, competition ...Vitamin B (cobalamin) is required for most human gut microbes, many of which are dependent on scavenging to obtain this vitamin. Since bacterial densities in the gut are extremely high, competition for this keystone micronutrient is severe. Contrasting with Enterobacteria, members of the dominant genus Bacteroides often encode several BtuB vitamin B outer membrane transporters together with a conserved array of surface-exposed B-binding lipoproteins. Here we show that the BtuB transporters from Bacteroides thetaiotaomicron form stable, pedal bin-like complexes with surface-exposed BtuG lipoprotein lids, which bind B with high affinities. Closing of the BtuG lid following B capture causes destabilisation of the bound B by a conserved BtuB extracellular loop, causing translocation of the vitamin to BtuB and subsequent transport. We propose that TonB-dependent, lipoprotein-assisted small molecule uptake is a general feature of Bacteroides spp. that is important for the success of this genus in colonising the human gut. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8p98.cif.gz | 255 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8p98.ent.gz | 161 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8p98.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/p9/8p98 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/p9/8p98 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 17575MC 8blwC 8bmxC 8bmyC 8bmzC 8bn0C 8okvC 8p97C C: 同じ文献を引用 (文献) M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 81169.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 (バクテリア) 遺伝子: btuB_6 発現宿主: Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 (バクテリア) 参照: UniProt: A0A0P0F201 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 41165.793 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 (バクテリア) 参照: UniProt: Q8A5Z1 |
#3: 化合物 | ChemComp-CNC / |
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Complex of TonB-dependent transporter BtuB3 with surface lipoprotein BtuG3 bound to cyanocobalamin (state 1) タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: NATURAL | |||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.122 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 (バクテリア) | |||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: The protein complex was purified in lauryl maltose neopentyl glycol (LMNG). Prior to making grids, the sample was subjected to size exclusion chromatography without LMNG in the mobile phase ...詳細: The protein complex was purified in lauryl maltose neopentyl glycol (LMNG). Prior to making grids, the sample was subjected to size exclusion chromatography without LMNG in the mobile phase to separate protein-LMNG complexes from free LMNG. | |||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | |||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 35.6 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 9826 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルタースリット幅: 10 eV |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 3311038 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.97 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 66318 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1
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精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 110.43 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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