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- PDB-8dqw: Open state of Rad24-RFC:9-1-1 bound to a 5' ss/dsDNA junction -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8dqw
タイトルOpen state of Rad24-RFC:9-1-1 bound to a 5' ss/dsDNA junction
要素
  • (DNA damage checkpoint control protein ...) x 2
  • (Replication factor C subunit ...) x 4
  • DDC1 isoform 1
  • DNA (5'-D(P*CP*GP*TP*CP*CP*CP*TP*TP*CP*C)-3')
  • DNA (50-MER)
  • RAD24 isoform 1
キーワードREPLICATION/DNA / DNA damage checkpoint / REPLICATION-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


meiotic DNA integrity checkpoint signaling / checkpoint clamp complex / cell cycle / : / Rad17 RFC-like complex / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in GG-NER / Elg1 RFC-like complex / DNA replication factor C complex / Ctf18 RFC-like complex / Polymerase switching ...meiotic DNA integrity checkpoint signaling / checkpoint clamp complex / cell cycle / : / Rad17 RFC-like complex / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in GG-NER / Elg1 RFC-like complex / DNA replication factor C complex / Ctf18 RFC-like complex / Polymerase switching / Translesion synthesis by REV1 / Translesion synthesis by POLK / Translesion synthesis by POLI / Translesion Synthesis by POLH / DNA replication checkpoint signaling / telomere maintenance via recombination / Termination of translesion DNA synthesis / Activation of ATR in response to replication stress / mitotic DNA replication checkpoint signaling / reciprocal meiotic recombination / mitotic intra-S DNA damage checkpoint signaling / recombinational repair / sister chromatid cohesion / mitotic sister chromatid cohesion / leading strand elongation / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / Dual incision in TC-NER / mismatch repair / subtelomeric heterochromatin formation / 3'-5' exonuclease activity / telomere maintenance / DNA damage checkpoint signaling / meiotic cell cycle / cellular response to ionizing radiation / nucleotide-excision repair / double-strand break repair via homologous recombination / DNA-templated DNA replication / double-strand break repair / site of double-strand break / double-stranded DNA binding / damaged DNA binding / chromosome, telomeric region / DNA clamp loader activity / DNA repair / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / nucleus / cytosol
類似検索 - 分子機能
Ddc1 / DNA damage checkpoint control protein Rad17 / Checkpoint protein Hus1/Mec3 / Hus1-like protein / Checkpoint protein Rad17/Rad24 / Checkpoint protein Rad17/Rad24, fungi/metazoa / Rad1/Rec1/Rad17 / Rad9/Ddc1 / Repair protein Rad1/Rec1/Rad17 / Zinc Finger, Delta Prime; domain 3 - #10 ...Ddc1 / DNA damage checkpoint control protein Rad17 / Checkpoint protein Hus1/Mec3 / Hus1-like protein / Checkpoint protein Rad17/Rad24 / Checkpoint protein Rad17/Rad24, fungi/metazoa / Rad1/Rec1/Rad17 / Rad9/Ddc1 / Repair protein Rad1/Rec1/Rad17 / Zinc Finger, Delta Prime; domain 3 - #10 / Zinc Finger, Delta Prime; domain 3 / Replication factor C subunit 3, C-terminal domain / RCF1/5-like, AAA+ ATPase lid domain / Replication factor C, C-terminal / Replication factor C C-terminal domain / : / Box / Proliferating Cell Nuclear Antigen / Proliferating Cell Nuclear Antigen - #10 / DNA polymerase III, delta subunit / : / DNA polymerase III, clamp loader complex, gamma/delta/delta subunit, C-terminal / Helicase, Ruva Protein; domain 3 - #60 / : / Helicase, Ruva Protein; domain 3 / ATPase family associated with various cellular activities (AAA) / ATPase, AAA-type, core / P-loop containing nucleotide triphosphate hydrolases / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / Up-down Bundle / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase / Rossmann fold / Orthogonal Bundle / 3-Layer(aba) Sandwich / Mainly Alpha / Alpha Beta
類似検索 - ドメイン・相同性
PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / DNA / DNA (> 10) / DDC1 isoform 1 / DNA damage checkpoint control protein RAD17 / RAD24 isoform 1 / Replication factor C subunit 5 / Replication factor C subunit 3 / Replication factor C subunit 4 ...PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / DNA / DNA (> 10) / DDC1 isoform 1 / DNA damage checkpoint control protein RAD17 / RAD24 isoform 1 / Replication factor C subunit 5 / Replication factor C subunit 3 / Replication factor C subunit 4 / Replication factor C subunit 2 / DNA damage checkpoint control protein MEC3
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.1 Å
データ登録者Schrecker, M. / Hite, R.K.
資金援助 米国, 3件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Cancer Institute (NIH/NCI)CA008748 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM107239 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM127428 米国
引用ジャーナル: Elife / 年: 2022
タイトル: Multistep loading of a DNA sliding clamp onto DNA by replication factor C.
著者: Marina Schrecker / Juan C Castaneda / Sujan Devbhandari / Charanya Kumar / Dirk Remus / Richard K Hite /
要旨: The DNA sliding clamp proliferating cell nuclear antigen (PCNA) is an essential co-factor for many eukaryotic DNA metabolic enzymes. PCNA is loaded around DNA by the ATP-dependent clamp loader ...The DNA sliding clamp proliferating cell nuclear antigen (PCNA) is an essential co-factor for many eukaryotic DNA metabolic enzymes. PCNA is loaded around DNA by the ATP-dependent clamp loader replication factor C (RFC), which acts at single-stranded (ss)/double-stranded DNA (dsDNA) junctions harboring a recessed 3' end (3' ss/dsDNA junctions) and at DNA nicks. To illuminate the loading mechanism we have investigated the structure of RFC:PCNA bound to ATPγS and 3' ss/dsDNA junctions or nicked DNA using cryogenic electron microscopy. Unexpectedly, we observe open and closed PCNA conformations in the RFC:PCNA:DNA complex, revealing that PCNA can adopt an open, planar conformation that allows direct insertion of dsDNA, and raising the question of whether PCNA ring closure is mechanistically coupled to ATP hydrolysis. By resolving multiple DNA-bound states of RFC:PCNA we observe that partial melting facilitates lateral insertion into the central channel formed by RFC:PCNA. We also resolve the Rfc1 N-terminal domain and demonstrate that its single BRCT domain participates in coordinating DNA prior to insertion into the central RFC channel, which promotes PCNA loading on the lagging strand of replication forks in vitro. Combined, our data suggest a comprehensive and fundamentally revised model for the RFC-catalyzed loading of PCNA onto DNA.
履歴
登録2022年7月20日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02022年8月17日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12022年8月24日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD ..._citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID
改定 1.22024年2月14日Group: Data collection / Refinement description
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / em_3d_fitting_list / pdbx_initial_refinement_model
Item: _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id ..._em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
B: Replication factor C subunit 4
C: Replication factor C subunit 3
D: Replication factor C subunit 2
E: Replication factor C subunit 5
F: DNA damage checkpoint control protein RAD17
G: DDC1 isoform 1
H: DNA damage checkpoint control protein MEC3
A: RAD24 isoform 1
J: DNA (50-MER)
I: DNA (5'-D(P*CP*GP*TP*CP*CP*CP*TP*TP*CP*C)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)437,15019
ポリマ－434,51710
非ポリマー2,6339
水7,728429
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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Replication factor C subunit ... , 4種, 4分子 BCDE

#1: タンパク質 Replication factor C subunit 4 / Replication factor C4 / Activator 1 37 kDa subunit


分子量: 36201.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC4, YOL094C, O0923 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P40339
#2: タンパク質 Replication factor C subunit 3 / Replication factor C3 / Activator 1 40 kDa subunit


分子量: 38254.543 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RFC3, YNL290W, N0533 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P38629
#3: タンパク質 Replication factor C subunit 2 / Replication factor C2 / Activator 1 41 kDa subunit


分子量: 39794.473 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC2, YJR068W, J1808 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P40348
#4: タンパク質 Replication factor C subunit 5 / Replication factor C5 / Activator 1 40 kDa subunit


分子量: 39993.582 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC5, YBR087W, YBR0810 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P38251

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DNA damage checkpoint control protein ... , 2種, 2分子 FH

#5: タンパク質 DNA damage checkpoint control protein RAD17


分子量: 45637.527 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RAD17, GI527_G0005737 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H4BW58
#7: タンパク質 DNA damage checkpoint control protein MEC3


分子量: 53207.797 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: MEC3, PIP3, PSO9, YLR288C, L8003.15 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q02574

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タンパク質 , 2種, 2分子 GA

#6: タンパク質 DDC1 isoform 1


分子量: 73850.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: DDC1, GI527_G0005854 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H4BUG7
#8: タンパク質 RAD24 isoform 1


分子量: 80096.828 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RAD24, GI527_G0001991 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H8UM36

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DNA鎖 , 2種, 2分子 JI

#9: DNA鎖 DNA (50-MER)


分子量: 21507.701 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
#10: DNA鎖 DNA (5'-D(P*CP*GP*TP*CP*CP*CP*TP*TP*CP*C)-3')


分子量: 5972.841 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)

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非ポリマー , 4種, 438分子

#11: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
#12: 化合物
ChemComp-AGS / PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-GAMMA-S / ADENOSINE 5'-(3-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE 5'-(GAMMA-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE MONOTHIOPHOSPHATE / ATP-γ-S


分子量: 523.247 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H16N5O12P3S / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
コメント: ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM
#13: 化合物 ChemComp-GDP / GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / GDP


タイプ: RNA linking / 分子量: 443.201 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H15N5O11P2 / コメント: GDP, エネルギー貯蔵分子*YM
#14: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 429 / 由来タイプ: 天然 / 式: H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Open state of Rad24-RFC:9-1-1 bound to a 5' ss/dsDNA junction
タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1, #3-#10 / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
由来(組換発現)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
緩衝液pH: 7.6
緩衝液成分
ID濃度名称Buffer-ID
125 mMHEPES-KOH1
2300 mMpotassium acetate1
37 mMmagnesium acetate1
試料濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: GRAPHENE OXIDE / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 297 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 700 nm
撮影電子線照射量: 66 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
7PHENIXモデルフィッティング
12cryoSPARC3.3３次元再構成
13PHENIXモデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 2.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 938420 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築PDB-ID: 7ST9

7st9


Accession code: 7ST9 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00223662
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.4632137
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d11.343427
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0393694
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0033955

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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