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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7zke | |||||||||
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タイトル | Mot1:TBP:DNA - pre-hydrolysis state | |||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / Swi2/Snf2 protein / remodeler / transcription initiation | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 ATP-dependent chromatin remodeler activity / TBP-class protein binding / DNA-templated transcription initiation / helicase activity / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Chaetomium thermophilum (菌類) DNA molecule (その他) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Woike, S. / Eustermann, S. / Jung, J. / Wenzl, S.J. / Hagemann, G. / Bartho, J.D. / Lammens, K. / Butryn, A. / Herzog, F. / Hopfner, K.-P. | |||||||||
資金援助 | ドイツ, European Union, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2023 タイトル: Structural basis for TBP displacement from TATA box DNA by the Swi2/Snf2 ATPase Mot1. 著者: Stephan Woike / Sebastian Eustermann / James Jung / Simon Josef Wenzl / Götz Hagemann / Joseph Bartho / Katja Lammens / Agata Butryn / Franz Herzog / Karl-Peter Hopfner / 要旨: The Swi2/Snf2 family transcription regulator Modifier of Transcription 1 (Mot1) uses adenosine triphosphate (ATP) to dissociate and reallocate the TATA box-binding protein (TBP) from and between ...The Swi2/Snf2 family transcription regulator Modifier of Transcription 1 (Mot1) uses adenosine triphosphate (ATP) to dissociate and reallocate the TATA box-binding protein (TBP) from and between promoters. To reveal how Mot1 removes TBP from TATA box DNA, we determined cryogenic electron microscopy structures that capture different states of the remodeling reaction. The resulting molecular video reveals how Mot1 dissociates TBP in a process that, intriguingly, does not require DNA groove tracking. Instead, the motor grips DNA in the presence of ATP and swings back after ATP hydrolysis, moving TBP to a thermodynamically less stable position on DNA. Dislodged TBP is trapped by a chaperone element that blocks TBP's DNA binding site. Our results show how Swi2/Snf2 proteins can remodel protein-DNA complexes through DNA bending without processive DNA tracking and reveal mechanistic similarities to RNA gripping DEAD box helicases and RIG-I-like immune sensors. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7zke.cif.gz | 624.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7zke.ent.gz | 504.2 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7zke.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7zke_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7zke_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7zke_validation.xml.gz | 54.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7zke_validation.cif.gz | 82.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zk/7zke ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zk/7zke | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA鎖 , 2種, 2分子 AB
#1: DNA鎖 | 分子量: 11155.128 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) DNA molecule (その他) |
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#2: DNA鎖 | 分子量: 11008.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) DNA molecule (その他) |
-タンパク質 , 2種, 2分子 DE
#3: タンパク質 | 分子量: 29676.973 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Chaetomium thermophilum (菌類) / 遺伝子: CTHT_0042720 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: G0SAL6 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 211832.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Chaetomium thermophilum (菌類) / 遺伝子: CTHT_0026210 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: G0S6C0 |
-非ポリマー , 3種, 3分子
#5: 化合物 | ChemComp-MG / |
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#6: 化合物 | ChemComp-ADP / |
#7: 化合物 | ChemComp-BEF / |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Mot1:TBP:DNA complex in pre-hydrolysis conformation / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#4 / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||
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分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (菌類) | ||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: Rosetta (DE3) | ||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: Incubation with 1 mM ADP, 1 mM BeF2 and 5 mM NaF before blotting. 0.05% beta-octyl glucoside added before blotting. | ||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 | ||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 283 K 詳細: Incubation on the grid for 20 seconds before plunging. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 177422 / 対称性のタイプ: POINT |