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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7vpx | ||||||
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タイトル | The cryo-EM structure of the human pre-A complex | ||||||
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![]() | SPLICING / human spliceosome / pre-A complex / PRP5 / A complex / U1 snRNP / U2 snRNP | ||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of protein refolding / pre-mRNA 5'-splice site binding / U2AF complex / U11/U12 snRNP / regulation of ATP-dependent activity / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / histone pre-mRNA 3'end processing complex ...negative regulation of protein refolding / pre-mRNA 5'-splice site binding / U2AF complex / U11/U12 snRNP / regulation of ATP-dependent activity / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / histone pre-mRNA 3'end processing complex / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / B-WICH complex / protein methylation / U12-type spliceosomal complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / RNA splicing, via transesterification reactions / U1 snRNP binding / methylosome / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / pICln-Sm protein complex / snRNP binding / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / splicing factor binding / SMN-Sm protein complex / P granule / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type precatalytic spliceosome / telomerase holoenzyme complex / U2-type spliceosomal complex / telomerase RNA binding / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / negative regulation of chaperone-mediated autophagy / U2-type catalytic step 2 spliceosome / SAGA complex / U4 snRNP / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / positive regulation of transcription by RNA polymerase I / regulation of RNA splicing / mRNA 5'-splice site recognition / mRNA Splicing - Minor Pathway / mRNA 3'-splice site recognition / U5 snRNP / U2 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / cellular response to transforming growth factor beta stimulus / Cajal body / U1 snRNA binding / regulation of DNA repair / intercellular bridge / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / cellular response to retinoic acid / Hsp70 protein binding / catalytic step 2 spliceosome / Gene and protein expression by JAK-STAT signaling after Interleukin-12 stimulation / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / stem cell differentiation / spliceosomal complex / negative regulation of smooth muscle cell proliferation / negative regulation of protein catabolic process / positive regulation of neuron projection development / mRNA splicing, via spliceosome / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / nuclear matrix / cytoplasmic ribonucleoprotein granule / fibrillar center / mRNA processing / cellular response to tumor necrosis factor / transcription corepressor activity / snRNP Assembly / spermatogenesis / SARS-CoV-2 modulates host translation machinery / single-stranded RNA binding / RNA helicase activity / nuclear speck / nuclear body / RNA helicase / ribosome / chromatin remodeling / mRNA binding / positive regulation of DNA-templated transcription / protein-containing complex binding / nucleolus / enzyme binding / protein homodimerization activity / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / extracellular exosome 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
![]() | Zhang, X. / Zhan, X. / Shi, Y. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural insights into branch site proofreading by human spliceosome. 著者: Xiaofeng Zhang / Xiechao Zhan / Tong Bian / Fenghua Yang / Pan Li / Yichen Lu / Zhihan Xing / Rongyan Fan / Qiangfeng Cliff Zhang / Yigong Shi / ![]() 要旨: Selection of the pre-mRNA branch site (BS) by the U2 small nuclear ribonucleoprotein (snRNP) is crucial to prespliceosome (A complex) assembly. The RNA helicase PRP5 proofreads BS selection but the ...Selection of the pre-mRNA branch site (BS) by the U2 small nuclear ribonucleoprotein (snRNP) is crucial to prespliceosome (A complex) assembly. The RNA helicase PRP5 proofreads BS selection but the underlying mechanism remains unclear. Here we report the atomic structures of two sequential complexes leading to prespliceosome assembly: human 17S U2 snRNP and a cross-exon pre-A complex. PRP5 is anchored on 17S U2 snRNP mainly through occupation of the RNA path of SF3B1 by an acidic loop of PRP5; the helicase domain of PRP5 associates with U2 snRNA; the BS-interacting stem-loop (BSL) of U2 snRNA is shielded by TAT-SF1, unable to engage the BS. In the pre-A complex, an initial U2-BS duplex is formed; the translocated helicase domain of PRP5 stays with U2 snRNA and the acidic loop still occupies the RNA path. The pre-A conformation is specifically stabilized by the splicing factors SF1, DNAJC8 and SF3A2. Cancer-derived mutations in SF3B1 damage its association with PRP5, compromising BS proofreading. Together, these findings reveal key insights into prespliceosome assembly and BS selection or proofreading by PRP5. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 848.3 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 150 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 242.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 32074MC ![]() 7evoC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-Splicing factor 3A subunit ... , 3種, 3分子 BAC
#1: タンパク質 | 分子量: 49327.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#10: タンパク質 | 分子量: 88991.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 58934.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質 , 5種, 6分子 DJEfk6
#2: タンパク質 | 分子量: 68401.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
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#3: タンパク質 | 分子量: 29900.764 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#12: タンパク質 | 分子量: 117576.484 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#20: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #28: タンパク質 | | 分子量: 12427.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-RNA鎖 , 4種, 4分子 HIKL
#4: RNA鎖 | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#22: RNA鎖 | 分子量: 83089.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
#23: RNA鎖 | 分子量: 3256.996 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
#24: RNA鎖 | 分子量: 52697.070 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Splicing factor 3B subunit ... , 5種, 5分子 12345
#5: タンパク質 | 分子量: 146024.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#6: タンパク質 | 分子量: 100377.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#7: タンパク質 | 分子量: 135718.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#8: タンパク質 | 分子量: 44436.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 10149.369 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 FG
#13: タンパク質 | 分子量: 28456.584 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#14: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 aibmcldnejgh
#15: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #16: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #17: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #18: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #19: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #21: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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-U1 small nuclear ribonucleoprotein ... , 3種, 3分子 OMN
#25: タンパク質 | 分子量: 51683.184 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#26: タンパク質 | 分子量: 31319.533 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#27: タンパク質 | 分子量: 17415.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-非ポリマー , 2種, 7分子 


#29: 化合物 | ChemComp-ZN / #30: 化合物 | ChemComp-SJT / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: NONE |
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3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 419522 / 対称性のタイプ: POINT |
精密化 | 最高解像度: 3 Å |